DEFINICIÓN: LA TRANSCRIPCIÓN ES LA

SÍNTESIS DE UNA MOLÉCULA DE ARN A

PARTIR DE UN MOLDE DE ADN

• El ARN se transcribe desde una de las cadenas de ADN

• Unos genes se transcriben desde una cadena y otros
desde la otra
 DESCRIPCIÓN DEL TEMA
• Estructura y clases de ARN

• Estructura del ADN molde (unidad de transcripción / gen)

en bacterias y en eucariotas

• El aparato básico de la transcripción en procariotas y en

eucariotas: polimerasas de ARN y proteínas accesorias

• Fases de la transcripción en procariotas y en eucariotas:

iniciación, elongación y terminación

• Modificaciones post-transcripcionales del ARNm

• Resumen Under the electron microscope DNA

molecules undergoing transcription exhibit
“Christmas-like tree structures”.
 El Dogma Central de la Biología
• Flujo de información: ADN ® ARN ® proteína

DNA
Replication

Transcription Translation

Figure 12.2

• El ARN se sintetiza en un proceso llamado Transcripción

https://www.youtube.com/watch?v=v3N84piSYhg
Beadle & Tatum’s Neurospora experiment (1941)
 Beadle & Tatum’s Neurospora experiment (1941)
Los genes contienen información para hacer proteínas.
Las mutaciones en los genes alteran la función de las proteínas.

Beadle and Tatum shared, with J. Lederberg, the 1958 Nobel Prize in Physiology or Medicine
https://www.youtube.com/watch?v=y_Q4Y9oY1mc
 Diferencias entre el ADN y el ARN

El ARN se distingue del ADN en tres formas:

●
El ARN es de cadena sencilla (aunque puede plegarse y
formar estructuras secundarias, ej. ARNt)
●
En el ARN la molécula de azúcar es una ribosa, no una
desoxyrribosa
●
En el ARN se usa Uracilo en vez de Timina
ADN ARN

H
3
U

OH

OH 2

OH

OH

Figure 11.7 – Part 2

El ARN puede formar estructuras secundarias y terciarias
 CLASES DE MOLÉCULAS DE ARN

Clases de ARN (*) Tipo celular Localización celular Función

ARN ribosomal (ARNr) Bacteriano y Eucariótico Citoplasma Estructura y función del ribosoma

ARN mensajero (ARNm) Bacteriano y Eucariótico Núcleo y Citoplasma Información genética para hacer proteínas

ARN transferente (ARNt) Bacteriano y Eucariótico Citoplasma Incorpora AA a la cadena polipeptídica

ARN de interferencia (ARNi) Eucariótico Citoplasma Regula la expresión génica

(*) Otros ARNs en Eucariotas: small nuclear RNA (RNA splicing); small nucleolar RNA (processing and assembly of tRNA).
 Transcripción: síntesis de ARN dirigida por ADN

• La transcripción tiene tres fases:

❑
Iniciación
❑
Elongación
❑
Terminación
• El ARN se transcribe a partir de un molde de ADN una vez que las bases de
ADN están expuestas por relajamiento de la doble hélice
• En cualquier región del cromosoma, solo una de las dos cadenas actúa de
molde para la transcripción

https://www.youtube.com/watch?v=mf9xLMh2n6w

https://www.youtube.com/watch?v=E_ImINFRrq4
 (mostrar en Serial Cloner)
https://www.youtube.com/watch?v=ZCcv-dr9JfY
 LOS GENES SUPERPUESTOS SON
MUY RAROS
Alrededor de 1.200 casos encontrados
en ratones y humanos.

Más común en virus y bacterias.

Optimizan el uso del ADN.

Sin embargo, cualquier mutación

podría afectar a más de un gen.

(Example of phage fX174)

Transcripción en Procariotas
 ESTRUCTURA DE UN GEN BACTERIANO (UNIDAD DE TRANSCRIPCIÓN)

• Unidad de transcripción: segmento de ADN que codifica para una molécula de ARN
(región codificadora de ARN y terminador) y la secuencia necesaria para su
transcripción (promotor).
• Promotor: secuencia de ADN adyacente al gen que es requerida para la
transcripción. Contiene “secuencias consenso” = secuencias cortas de nucleótidos
comunes a la mayoría de promotores. El esparcimiento y la posición relativa
respecto del lugar de inicio son similares en la mayoría de promotores.
APARATO BASAL PARA LA TRANSCRIPCIÓN EN BACTERIAS

• Las bacterias poseen una

única ARN polimerasa que
produce todas las clases de
ARN bacterianos

• El factor sigma permite a la

ARN polimerasa unirse a las
“secuencias consenso” del
promotor
Iniciación

El factor σ (sigma) de la ARN polimerasa procariótica reconoce

secuencias consenso de la región promotora a la izquierda del
punto de inicio de la transcripción.
El factor σ se separa de la polimerasa una vez la transcripción se ha
iniciado.
 Elongación
Durante la elongación, la ARN polimerasa procariótica se mueve a lo largo de
la cadena de ADN molde, sintetizando ARNm en la dirección 5' a 3', y
desenrolla el ADN en su camino.
Un mismo gen puede transcribirse a
ARNm al mismo tiempo por varias
ARN polimerasas.

Under the electron microscope DNA

molecules undergoing transcription exhibit
“Christmas-like tree structures”.
 El bucle de terminación

Terminación: la transcripción termina

cuando la ARN polimerasa transcribe una
secuencia de terminación (una repetición
invertida seguida de 6 adeninas).
Otras veces hay un complejo Rho de
proteínas que ayuda en la terminación.
 ࢻh https://www.youtube.com/watch?v=h_1QLdtF8d0

Si genes relacionados están organizados en

un operón, no hay secuencias de terminación
entre ellos y el ARN se llama “policistrónico”:

https://www.youtube.com/watch?v=aLO7u5vM32w
 La transcripción y la traducción
pueden ocurrir simultáneamente
en procariotas

www.bio.miami.edu
 Transcripción en eucariotas

https://www.youtube.com/watch?v=ks0cTwDh9g4 minuto 6:03

 ARN POLIMERASAS EUCARIÓTICAS

El núcleo eucariótico posee tres clases de ARN polimerasas con

diferente especificidad y que reconocen diferentes tipos de promotores.

La ARN polimerasa II es la encargada de generar ARN mensajero.

 Las secuencias que codifican para diferentes genes
pueden encontrarse en cualquiera de las dos cadenas
 Transcripción en Eucariotas

• La transcripción eucariótica ocurre en el

núcleo de la célula y procede también en los
tres pasos: iniciación, elongación, y
terminación.

• Los eucariotas requieren de factores de

transcripción que se unen primero a la zona
promotora y así ayudan a reclutar la
polimerasa apropiada.
 Transcripción en Eucariotas

• Se necesita un remodelamiento de la
cromatina para permitir que la ARN
polimerasa y otras proteínas puedan unirse
al ADN.
•La ARN Polimerasa II transcribe el ARNm.
•Solo un 25% del pre-ARNm se somete a
procesamiento posterior. El resto se degrada.
 Iniciación de la
transcripción en
eucariotas
 INICIACIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN EN EUCARIOTAS

La ARN polimerasa II no puede comenzar la transcripción si no se unen antes los

factores de transcripción (son también proteínas) a la zona promotora
Transcripción: Iniciación

*No hay primers (cebadores)

como en la replicación del ADN
 Transcripción: Elongación

• Elongación: la ARN polimerasa extiende la molécula de ARNm naciente en dirección 5’

a 3’, antiparalela a la hebra molde.
• Los nucleótidos son añadidos por complementariedad de bases con la hebra molde.
• La polimerasa añade unos 40 nucleótidos por segundo.
 Transcripción: Elongación

Los substratos, ribonucleósidos trifosfato (A, U, C & G), son hidrolizados al ser utilizados,
liberando energía para la acción de la ARN polimerasa.
*Para proteger de la degradación el ARNm naciente, se le añade una modificación (CAP)
en el extremo 5’ a unos 20-40 nucleótidos del origen.
La molécula naciente de ARN tiene la misma secuencia (salvo U en vez de T) que la
cadena superior (codificante) y es “complementaria” a la de la cadena molde
 Transcripción: Terminación

• El “transcrito" se separa del ADN tras transcribir una secuencia de poliadenilación

(AAUAAA). A ella se unen entonces varias proteínas unas 10-35 bases más abajo, que
liberan el pre-ARNm
• Este “Transcrito primario” se llama “pre-ARNm”
• Solo un 25% del pre-ARNm se procesa para generar el ARNm maduro
• *La ARN polimerasa sigue polimerizando pero el ARNm es degradado inmediatamente
por no tener protección en el extremo 5’.
 MODIFICACIONES POST-TRANSCRIPCIONALES DEL pre-ARNm
Modificación Función
Adición del 5´CAP Da más estabilidad al ARNm y facilita la unión del ribosoma en la traducción
Corte del 3’ y adición de cola de poli-A Aumenta la estabilidad del ARNm. Migración fuera del núcleo.
Splicing del ARNm Elimina intrones y permite generar proteínas diferentes
Edición del ARNm Altera la secuencia del ARNm

Cola de Poli(A): 50-250 A

5´ CAP
Campbell Biology, Tenth Edition - Reece, Urry, Cain et al.pdf
Lewin’s Genes
 SPLICING DEL pre-ARNm
• El splicing alternativo permite la
combinación de diferentes genes
para generar distintos ARNm
maduros

• Ello resulta en proteínas diferentes

a partir del mismo gen
Splicing

*En algunos organismos no hay

spliceosoma sino que el mismo intrón
de ARN tiene actividad catalítica, se
pliega sobre sí mismo y hace el corte
= es una ribozima.
 RESUMEN

Las bacterias tienen una sola ARN polimerasa y los eucariotas tres

En eucariotas la transcripción tiene lugar en el núcleo

En procariotas la trascripción y la traducción pueden ocurrir al

mismo tiempo

El procesamiento del pre-ARNm ocurre solo en eucariotas

 RESUMEN

La ARN polimerasa bacteriana se une directamente a la región

promotora y sintetiza ARNm en alta proporción

La ARN polimerasa eucariótica necesita proteínas accesorias

llamadas factores de transcripción para poder iniciar la
transcripción. Esta ocurre en baja proporción por defecto, pero
dependiendo del tipo de factores de transcripción de cada tejido
puede aumentarse la tasa de producción de ARNm
 https://www.youtube.com/watch?v=Lkjr6RFOBY4
Transcriptasa reversa

https://www.youtube.com/watch?v=Ro51OsR1jo8
 Transcriptómica: Microarrays

https://en.wikipedia.org/wiki/DNA_microarray
https://www.youtube.com/watch?v=hJMdso9SaIo
Esta técnica puede ser usada en múltiples
investigaciones como es el caso del Cáncer,
donde microarrays ha demostrado ser una
herramienta muy útil informativa para la
expresión de genes
Una micromatriz es un patrón de sondas de ssADN que se
inmovilizan en una superficie (llamada chip o una
diapositiva). Las secuencias de la sonda se diseñan y
colocan en una matriz en un patrón regular de lugares. El
chip o portaobjetos suele estar hecho de vidrio o nailon y
se fabrica utilizando tecnologías desarrolladas para chips
informáticos de silicio. Cada chip de microarreglo está
dispuesto como un tablero de ajedrez de 105 o 106
anuncios o funciones, cada uno de los cuales contiene
millones de copias de un sonda de ADN única (a menudo
de 25 nt de largo).
Ejemplo de un microarray de levaduras. Dos condiciones:
levaduras creciendo en presencia de oxígeno (respiración aerobia)
o en ausencia de oxígeno (fermentación).
• Aislar ARNm de levaduras crecidas aeróbicamente. Etiquetar el
ADNc de ROJO.
• Aislar ARNm de levaduras crecidas anaeróbicamente; Etiquetar
el ADNc de VERDE.
• Unión al chip y lavado.
• Análisis de datos:
*Puntos rojos = el gen se expresa SOLO en condiciones aerobias
*Puntos verdes = el gen se expresa SOLO en condiciones
anaerobias
*Puntos amarillos = el gen se expresa en AMBAS condiciones
*Puntos negros = no hay expresión de genes en ninguna de las
condiciones
*** Se conoce la posición de cada gen en el chip.
RNA-seq