INTERACCIÓN REMs - MATERIA

Absorción de REMs (M= átomo/molécula)

M +h M* (t = 10-8 seg)

M* debe volver al estado fundamental:
1) Liberando el exceso de energía como Calor (Q)
M* M + Q (colisiones con otras
partículas)
2) Reemitiendo la energía como REM (de mayor  )
FLUORESCENCIA
M* M +h FOSFORESCENCIA

3) Por reacción fotoquímica

M* N
ABSORCIÓN ATÓMICA
Los átomos absorben REM como átomos libres en
estado gaseoso y sólo absorben REM a través de un
aumento en la energía electrónica (Eelec)

ABSORCIÓN MOLECULAR
Las moléculas pueden absorber REM en estado sólido,
líquido y gaseoso. La absorción es más compleja ya que
las moléculas poseen niveles de energía vibracional (Evib)
y rotacional (Erot) asociados a cada nivel de energía
electrónica (Eelec)
 ABSORCIÓN DE RADIACIÓN

Sólido
transparente,
REM incidente líquido REM transmitida
o gas

Radiaciones (REM) que no emergen son ABSORBIDAS

La energía de la REM ABSORBIDA ES TRANSFERIDA a átomos,

moléculas o iones capaces de absorber la radiación, pasando desde un
estado de energía fundamental a uno excitado.

Átomos, moléculas y iones presentan un número limitado de niveles

energéticos discretos y cuantizados. Para que se produzca absorción
de REM la energía del fotón debe corresponder exactamente a la
diferencia de energía entre el estado energético fundamental y uno de
los estados excitados de la especie absorbente.

Clase 2 Absorciometría, Dr. C. Bruhn F., Depto. A. Instrumental. Fac. Farmacia, U.de Concepción
NIVELES DE ENERGÍA DE UNA MOLÉCULA ORGÁNICA FLUORESCENTE

E Electrónica:
Energía electrónica
de la molécula o
átomo

E vibracional:
Energía resultante de
vibraciones
interatómicas
presentes en una
molécula
E rotacional:
Energía resultante de
la rotación molecular
en torno a su centro
de gravedad

Niveles de
Energía rotacional

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 NIVELES ENERGÉTICOS
E ROTACIONAL< E VIBRACIONAL< E ELECTRÓNICA

PARA QUE OCURRA ABSORCIÓN E

E FOTON
DE REM
E = E Foton

ESPECTROSCOPÍA: Es el estudio de las transiciones de energía interna

típicas de una especie (átomo, ión, molécula), con lo que es posible su
caracterización
A ESPECTROGRAMA DE ABSORCIÓN
MOLECULAR
Lo que se obtienes es un
ESPECTROGRAMA

o۷
ÁTOMOS ESPECTROSCOPÍA DE
ESPECIES QUE PUEDEN ABSORCIÓN ATÓMICA
ABSORBER REM MOLÉCULAS ESPECTROSCOPÍA DE
ABSORCIÓN MOLECULAR
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 ESPECTROS ATÓMICOS SON MÁS SENCILLOS
QUE ESPECTROS MOLECULARES
3s 3p

ÁTOMOS

MOLÉCULAS

Absorción molecular
involucra transiciones
• ELECTRÓNICAS
• VIBRACIONALES
• ROTACIONALES

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 ABSORCIÓN MOLECULAR
E = E ELECTRÓNICA + E VIBRACIONAL + E ROTACIONAL
Aumenta E electrónica de la molécula:
La E del fotón permite que los electrones pasen de un
nivel electrónico a otro superior. Este cambio va
ABSORCIÓN DE REM DE acompañado de cambios vibracionales y rotacionales.
REGIÓN UV cercano -VIS
(= 200 - 780 nm) La E captada puede disiparse a la forma de calor
(vibraciones, rotaciones)(no radiante), o a la forma de
emisión de fluorescencia (radiante).

ABSORCIÓN REM DE Aumenta E vibracional de la molécula:

REGIÓN IR cercano y me- E del fotón permite que las moléculas experimenten
dio (= 0.78 – 50 um) vibraciones interatómicas alrededor de sus enlaces

ABSORCIÓN DE REM DE Aumenta E rotacional de la molécula:

REGIÓN IR lejana y E del fotón permite que las moléculas roten en torno a
microondas su eje o centro gravitacional
(= 50 - 100 um)

Esp. de absorción atómica

De absorción
Esp. de absorción molecular
ESPECTROSCOPÍA
De emisión Esp. de emisión atómica
Esp. de emisión molecular
Dr. C. Bruhn F., Depto. A. Instrumental. Fac. Farmacia, U.de Concepción
ESPECTROSCOPÍA: Es el estudio de las transiciones energéticas internas típicas
de una especie (átomo, ión, molécula), con lo que es posible su caracterización

A
Lo que se obtienes es un
ESPECTROGRAMA

 max o۷

 %T

 max o۷  max o۷

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 ESPECTROSCOPÍA DE ABSORCIÓN MOLECULAR
La absorción de REM por un medio absorbente homogéneo depende de:
1.  de la radiación (en otras palabras, de su energía)
2. Naturaleza de la especie molecular que absorbe (estructura química)
3. Concentración de la especie molecular que absorbe en el medio
4. Camino óptico que debe recorrer la REM a través del medio que absorbe

Pi: Pot. Lum. Incidente

PR: Pot. Lum. Reflejada por paredes
del recipiente
P’A (cub): Pot. Lum. Absorbida por
Haz de luz
monocromático
Pi P paredes del recipiente
P’’A (solvente): Pot. Lum. Absorbida
por solvente
PA (soluto): Pot. Lum. Absorbida
por soluto
P
A(soluto) P: Potencia Lum. que emerge de la
PR P’A(cub) P’’A(solvente) muestra

MUESTRA Pi= PR+PA+PA’ +PA’ ’ + P P = POTENCIA LUMINOSA QUE

EMERGE DE LA MUESTRA
BLANCO Pi=PR+PA+PA’+PA’ ’ + Po Po = POTENCIA LUMINOSA QUE
EMERGE DEL BLANCO
0 Dr. C. Bruhn F., Depto. A. Instrumental. Fac. Farmacia, U.de Concepción
 MUESTRA BLANCO
Igualando Pi PR + PA+ PA’ + PA’ ’ + P = PR+ PA’+ PA’ ’+ Po

tenemos:

Entonces: PA + P = Po

Dividiendo ABSORCIÓN + TRANSMISIÓN = 1

por Po: PA/Po + P/Po =1
% ABSORCIÓN + % TRANSMISIÓN = 100

Potencia luminosa transmitida por la muestra

TRANSMISIÓN: T =
Potencia luminosa transmitida por el blanco

Potencia luminosa transmitida por la muestra x 100

% TRANSMISIÓN: % T =
Potencia luminosa transmitida por el blanco

Límites de T y %T:
Si P = P0 T=1 %T = 100
Si P = 0 T=0 %T = 0
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 RELACIÓN DE POTENCIA LUMINOSA TRANSMITIDA Y EL ESPESOR ÓPTICO
Ley de Lambert - Bouger

P0 P P
100 25 12.5
50

b b b b
Si un haz de REM monocromático incide en forma paralela sobre un medio absorbente
de concentración (c) constante, y si el espesor óptico (b) de dicha sustancia aumenta
linealmente, la potencia luminosa emergente disminuye en forma logarítmica o
exponencial.
Constante Espesor óptico
P
P0 P = P0 x10-k1b P/P0 = 10-k1b
Linealizando: T
b 2b 3b 4b b (cm) log P/P0 = -k1b k1 = f(c)
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RELACION DE POTENCIA LUMINOSA TRANSMITIDA Y LA CONCENTRACIÓN
Ley de Beer-Bernard
Si un haz de REM monocromático incide en forma
paralela sobre un medio absorbente de espesor
óptico (b) constante, y si la concentración (c) de la
especie absorbente aumenta linealmente, la
P0 ½ Po potencia luminosa emergente disminuye en forma
C logarítmica o exponencial.

P Constante

P0
P0 1/4 Po P=P0x10-k2c Concentración
2C
c 2c 3c 4c C

P0
3C 1/8 Po
log P/P0=-k2c
k2 = f(b)
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 Considerando ambas leyes:

log P/P0= -k1b log P/P0 = -k2c

log P/P0= -kbc

log P/P0 = log T = - kbc Absorbancia

log P0/P = log1/T = - log T = kbc = A

A = - log T = log 100 - log %T = 2- log %T

A (es adimensional)
LEY DE LAMBERT- BEER (LBB)
a y  dependen de:
A=kbc • Naturaleza de la
: absortividad molar k =  si c (mol/L) sustancia
• Longitud de onda
a : absortividad k = a si c (g/L) • Solvente
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 Unidades de y a
A = a () x b x c (cM)

a = A / b c = 1 / cm x (g/L) 1 L= 1000 mL= 1000 cm3

2
a = 1 / cm x (g/1000cm3)
a = cm2 / mg
mg

M = mol/L
=A/bc M = 1 / cm x (mol/L)
1 L= 1000 mL= 1000 cm3

2
 = 1 / cm x (mol/1000cm3)  = cm2 / mmol
mmol
a y  dependen de:
• Naturaleza de la sustancia
Por lo tanto: = a x PM • Longitud de onda
• Solvente
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 Ecuación
de una y = b ± mx
A= a () x b x c recta A = 0 + (ab) x c
A = 0 + (b) x cM
%T
100 -log T A

y/x = m = a*b (*b) y/x = m = a*b (*b)

c (cM)
c(cM) c (cM)
CURVAS DE CALIBRACIÓN
Previamente hay que determinar la  de trabajo a la que se obtiene una curva de
calibración:  se elige a través del espectrograma (c= cte; b= cte.)
Pendientes de 1 y 2 son distintas:

A
Espectrograma A Curva de calibración 1: la C.C. tiene mayor pendiente,
lo que corresponde a un máximo de
1 absorción más sensible.
Ax Curva de Calibración adecuada es
2 la de mayor pendiente (tiene mayor
sensibilidad).
Para obtener concentración de M.P
1 2 (nm) c se mide Ax y se interpola en la C.C.
MP
Dr. C. Bruhn adecuada.
F., Depto. A. Instrumental. Fac. Farmacia, U.de Concepción
La absorción de REM por un medio
absorbente homogéneo depende de:
1.  de la radiación

2. Naturaleza de la especie molecular

que absorbe (a o )
A () = a () () x b x c
3. Concentración de la especie
molecular que absorbe

4. Camino óptico que debe recorrer la

REM a través del medio que absorbe

Dr. C. Bruhn F., Depto. A. Instrumental. Fac. Farmacia, U.de Concepción