Hemoglobina

Mag.(c) Lic.TM Eduardo Rojas Narváez

 Generalidades
• Es una hemoproteína
• Función:
– Unión reversible de O2 al heme
– Facilita el intercambio de CO2 entre pulmones y
tejidos
– Control del tono vascular mediado por NO
• Constituye el 95% de las proteínas de los GR
¿Qué tan necesarios son los GR?
Generalidades
 Evolución y Estructura
• Proteína conjugada PM=64.5 kD
• Proteína globular φ=6.4 nm
• Tetrámero
– Dos pares de polipéptidos similares (globinas)
– En cada cadena está unido un grupo prostético
(hemo)
– El hemo es un complejo de hierro y una
protoporfirina
 Ontogenia de las hemoglobinas
• El desarrollo eritroide se divide en tres periodos
– Embriónico
– Fetal
– Adulto
• Los genes de las globinas alfa están en
cromosoma 16
• Los genes de las globinas no-alfa están en
cromosoma 11
 Ontogenia…
• El cluster de genes para las globinas alfa es capaz
de producir dos tipos de globina:
– Zeta (ζ) Primeras 8 semanas de vida intrauterina
– Alfa (α)
• El cluster de genes para las globinas beta incluyen:
– Epsilon (∊) Embriónica
– Gamma (γ) Embriónica y Fetal
– Delta (δ) Adulto
– Beta (β) Adulto
 Ontogenia…
• Desarrollo embriónico
– Hemoglobina Gower – 1
• ζ2 ∊ 2
– Hemoglobina Gower – 2
• α2 ∊ 2 Saco Vitelino

– Hemoglobina Portland
• ζ 2 γ2
• Desarrollo fetal
– Hemoglobina F
• α2 γ2
 Ontogenia…
• Hemoglobina F tiene alta afinidad por el
Oxígeno (mayor que las Hemoglobinas del
adulto)
• Tiene menos capacidad de unirse con 2,3 DPG
• Tiene mejor efecto Bohr por medio del cual se
incrementa la afinidad por el oxígeno
 Ontogenia…
• 20 ss empieza producción de Hb A
• 30 ss Hb A alcanza 20%
• Luego del nacimiento Hb F disminuye 10%
cada 2 ss
• Aprox 30 ss de vida Hb F alcanza su valor
normal en la etapa adulta
• 35 ss de vida gestacional empieza producción
de Hb A2
 Hemoglobinas Normales del Humano

Estructura Proporción en
Nombre Designación Molecular Adultos RN
Hb del A α2β2 97% 20%
Adulto
Hb A2 A2 α2δ2 2.5% 0.5%
Hb F F α2γ2 <1% 80%
Portland ζ2γ2 0 0
Gower II ζ 2∊ 2 0 0
Gower I α2∊2 0 0
 Estructura de la globina
• Estructura Primaria
– La cadena Alfa contienen 141 aa
– Las cadenas no Alfa contienen 146 aa
• δ y β difieren en 10 aa
• γ y β difieren en 39 aa
• Estructura Secundaria
– Contienen 8 hélices
– Son idénticas en longitud
– Las hélices forman el 75% de la molécula
– Los espacios interhelicales son flexibles
 Estructura de la globina
• Estructura Terciaria
– Aa polares se encuentran hacia la superficie
molecular (soluble en agua)
– Aa no polares se encuentran hacia la parte interna
– Las fuerzas de van der Waals vuelven estable a la
molécula
Curva de Disociación de la Oxihemoglobina
Desviación de la curva de disociación de la
oxihemoglobina
 ¿Que es el 2,3 DPG?
• Es una molécula que interactúa
con la Hb
• Está presente en el eritrocito en
igual concentración que la Hb
• Se une con fuerza a la DesoxiHb
• Facilita la liberación de O2 a los
tejidos
Eritroblasto
Pérdida del núcleo

Reticulocito

Pérdida de ARN y
mitocondrias

Eritrocito
 Eritrocito
Metabolismo reducido

Ausencia de núcleo Ausencia de

y ribosomas mitocondrias

Ausencia de síntesis Ausencia de

de proteínas Ciclo de Krebs

No se produce renovación Glicólisis

del stock de enzimas anaerobia

Agotamiento progresivo de enzimas

que limitan la sobrevida del GR
 VIA EMBDEN-MEYERHOF
Glucosa Síntesis GSH
ATP
Mg HK
ADP
Glucosa 6P Vía Pentosas
GPI
Fructosa 6P
ATP
Mg PFK
ADP
Fructosa 1-6P
ALD
TPI
DHAP G3P
NAD Pi
Reducción G3PDH
NADH
Meta Hb
1,3DPG
 VIA EMBDEN MEYERHOF
1,3DPG pH (-)
DPGM
ADP
Mg PGK Shunt Rapoport
ATP 2,3DPG Luebering

3PG DPGP
pH (+)
Degradación PGM
Nucleótidos y
Vías de rescate 2PG
ENOL
PEP
ADP
Mg
ATP PK
LDH
PIRUVATO LACTATO
NADH NAD
 Funciones del ciclo de EMP
Producción de intermediarios de la glicólisis anaerobia
1. Inicia y mantiene la glicólisis
2. Síntesis de GSH
3. Activación de ribosa -5P (PRPP)
ATP 4. Mantenimiento de integridad y plasticidad de la
membrana
5. Mantenimiento de bomba cationes ATPasa dep

2,3 DPG Modulación de la curva de disociación de oxiHb

1. Interviene en la reducción de piruvato a lactato

NADH 2. Reducción de MetaHb
 Métodos de Determinación
• Oxihemoglobina
– Fundamento:
• Hb + Hidroxido de amonio ---> Oxihemoglobina
– Reactivo
• HN4OH en dilución 0,007 N
– Condiciones de lectura
• 540 nm contra blanco de reactivo
– El método no detecta Carboxihemoglobina (HbCO),
Metahemoglobina (Hi) y Sulfohemoglobina (SHb)
 Métodos de Determinación
• Cianometahemoglobina
– Principio:
• Hb + Ferrocianuro potásico -----> Metahemoglobina
• Metahemoglobina + Cianuro de potasio ----> Cianometahemoglobina

– Reactivo:
• Drabkin modificado con detergente
– Ferrocianuro de potasio (0,2 gr)
– Cianuro de potasio (0,05 gr)
– Fosfato de potasio dihidrogenado (0,14 gr)
– Detergente no iónico (1 ml)
– Agua destilada (1000 ml)
– Condiciones de lectura
• 540 nm contra blanco de reactivo
– Método no detecta la SHb
 Métodos de Determinación
• Método del Lauril Sulfato de Sodio
– Utilizado en hematología automatizada
– Es no tóxico
– Reactivo transforma la Hb en LSS-
Metahemoglobina
– Se mide a 555 nm
Fin