Vía de las fosfato pentosas

1
 Vía de las fosfatopentosas - Etapa oxidativa

G6P
G6P deshidrogenasa NADPH

6-Fosfoglucono-δ-lactona
Lactonasa

6-fosfogluconato
6-Fosfogluconato deshidrogenasa NADPH

Ribulosa-5-fosfato

Vía de las fosfatopentosas - Isomerizaciones en 5C

CH2OH
O
Ribulosa-5-fosfato OH
OH
CH2OPO3=
Intermediario enediol Fosfopentosa isomerasa

CHO
OH
OH
R5P
OH
CH2OPO3=

2
 Vía de las fosfatopentosas - Interconversiones de azúcares

TK
C5 + C5 C3 + C7

X5P R5P G3P SH7P

C7 + C3 TA C4 + C6

SH7P G3P E4P F6P

TK
C5 + C4 C3 + C6

X5P E4P G3P F6P

La salida neta de esta serie de intercambios es dos hexosas y una

triosa (que pueden entrar en la glucólisis/TCA) a partir de tres R5P.
En definitiva, cuando hay mayor necesidad de NADPH que de R5P,
la R5P se recicla.

Vía de las fosfatopentosas - TK & TA

La TK y la TA transfieren unidades de 2 y 3 carbonos,

respectivamente, a partir de azúcares donadores (que siempre son
cetosas) a aceptores (que siempre son aldosas).
CH2OH CH2OH
C=O C=O
HO-C-H

Este hidroxilo DEBE estar en esta configuración, por lo cual la

ribulosa-5-P debe ser isomerizada a xilulosa-5-P (por la fosfopentosa
epimerasa) antes de poder donar su unidad en la reacción previa.

3
El rol de la tiamina
pirofosfato.

4
5
 Vía de las fosfatopentosas - Control
H H

- CONH 2

N
O

-O-P-O CH2 O
NADPH

OH OH
Nicotinamide adenine
O NH2
dinucleotide phosphate
N (reducido)
N

N
N

-O-P-O O
NADP+/NADPH es 0.014.
CH2

O
NAD+/NADH es 700.
OH O
-O-P-O-
En hepatocitos de ratas bien
O alimentadas.

6
 Modalidades de funcionamiento de la vía
1- Se necesita más ribosa5P (R5P) que NADPH.
La mayor parte de la G6P se tranforma en F6P y G3P vía glucólisis. La
transketolasa transforma dos F6P y un G3P en 3 R5P. El total
estequiométrico sería:
5 G6P + ATP ---------> 6 R5P + ADP + H+

2- Las necesidades de R5P & NADPH están balanceadas.

La serie de reacciones mayoritaria será la que pasa por la vía oxidativa.
La estequiometría de esta modalidad será:
G6P + 2 NADP+ + H2O ----------> R5P +2 NADPH + CO2

3- Las necesidades de NADPH son mucho mayores que las de R5P.

En un caso la glucosa es TOTALMENTE oxidada a CO2.
En esta situación tenemos 3 grupos de reacciones de relevancia:
A- Una R5P y 2 NADPH se forman por la fase oxidativa.
B- R5P se transforma en F6P y G3P por TK y TA.
C- Finalmente se forma G6P a partir de F6P y G3P por
gluconeogénesis.
Estequiometrías
6 G6P + 12 NADP+ + 6 H2O 6 R5P + 12 NADPH + 6 CO2
6 R5P 4 F6P + 2 G3P
4 F6P + 2 G3P + H2O 5 G6P + Pi
G6P + 12 NADP+ + 7 H2O 6 CO2 + 12 NADPH + 12 H+ + Pi

7
4- Las necesidades de NADPH son mucho mayores que las de R5P.
En este caso alternativo la glucosa se convierte en piruvato.
En esta situación se genera NADPH y ATP simultáneamente, y 5 de
los 6 carbonos de G6P aparecen en el piruvato, que a su vez puede
usarse para generar más ATP (vía TCA) o como precursor en
biosíntesis.
Estequiometría total

3 G6P + 6 NADPH+ + 5 NAD+ + 5 Pi + 8 ADP

5 piruvato + 3 CO2 + 6 NADPH + 5 NADH + 8 ATP + 2 H2O + 8H+

En conclusión, la mayor demanda de NADPH se da en tejido en el

cual se sintetizan lípidos por síntesis reductiva, por lo cual tiene
sentido que la vía de las pentosas fosfato es considerablemente
más activa en tejido adiposo (en comparación con tejido
muscular).

Además, no olvidarse que en plantas parte de las reacciones

catalizadas por TK participan en la síntesis de novo de azúcares.

8
 Favismo

superóxido
Fármacos y otros O2
agentes oxidantes.
+ H2O superóxido
dismutasa
H2O2

2NADP 2GSH Glutatión

G6PD peroxidasa
2NADPH GSSG

H2O
La G6PD genera el NADPH que protege al eritrocito contra
peróxidos y superóxidos generados por estrés oxidativo.

9
Gluconeogénesis

10
 Flujo
general de
azúcares en
los seres
vivos

Breve revisión Glucosa

de glucólisis Hexokinasa ATP
G6P
Fosfoglucosa isomerasa

F6P
Aquí, por acción de Fosfofructokinasa ATP
PFK-2 se puede
formar F2,6BP F1,6BP
Aldolasa
Triosafosfato
DHAP isomerasa G3P
G3P deshidrogenasa NADH (x2)
1,3BPG
Fosfoglicerato kinasa ATP (x2)
3PG
Fosfogliceromutasa
2PG
Enolasa

PEP
Piruvato kinasa ATP (x2)
Piruvato

11
 Los pasos en que difieren la glucólisis y la gluconeogénesis
son, al mismo tiempo, los puntos de regulación y vinculación
con otras rutas.

Glucosa
(Hexokinasa) G6P fosfatasa
G6P
Fosfoglucosa isomerasa

F6P
(Fosfofructokinasa) Fructosa 1,6-Bifosfatasa
F1,6BP
Triosafosfato
isomerasa G3P DHAP Glicerol
G3P deshidrogenasa
1,3DPG
Fosfoglicerato kinasa
3PG
Fosfogliceromutasa
2PG
Enolasa

PEP
PEP carboxikinasa
(En lugar de la Oxaloacetate Algunos AAs
piruvato kinasa)
Piruvato carboxilasa (requiere biotina carboxilada por acetilCoA en PC)
Lactato Piruvato Algunos AAs

12
 Los pasos en que difieren la glucólisis y la gluconeogénesis
son, al mismo tiempo, los puntos de regulación y vinculación
con otras rutas.

Piruvato

Piruvato
CO2 + ATP

ADP

Oxaloacetato
NAD+ + H+

NAD+

Malato

Malato
Aquí participa la biotina como acarreador de CO2 de
manera análoga a la participación de la TPP en el las
Oxaloacetato reacciones de TK.

13
La piruvato carboxilasa depende
de la presencia de AcCoA, que la
activa alostéricamente, ya que el
oxaloacetato es un intermediario
(estequiométrico) en
gluconeogénesis pero también es
un intermediario catalítico en el
TCA. Niveles altos de AcetilCoA
indican necesidad de
oxaloacetato. Niveles altos de
ATP permiten que el oxaloacetato
se consuma en gluconeogénesis,
pero si el ATP está bajo, el
oxaloacetato entrará en el TCA
tras condensar con AcetilCoA.
Anaplerótica - Interviene en
gluconeogénesis y TAMBIEN
controla niveles de intermediarios
del TCA a nivel del oxaloacetato.

14
 Regulación.

Si no hay regulación es posible

que la glucólisis (que usa
glucosa) y la gluconeogénesis
(que la forma) entren en un
ciclo fútil.

Los niveles de regulación son

varios, uno de ellos se basa en la
regulación alostérica de la
fosfofructokinasa por la F2,6BP
(producida por PFK2)

15
 Tanto el AMP como la Concepto de ciclo de sustrato
F2,6BP estimulan a la
PFK, estimulando la
producción de ATP vía
glicólisis. F6P

AMP ↑ AMP ↓
F2,6P ↑ F2,6P ↓
Citrato ↓ Citrato ↑

Si los niveles de F2,6BP

F1,6BP son bajos, se estimula la
acción de la bifosfatasa
lo que estimula la
gluconeogénesis.

Regulación por F2,6BP

β-D-fructosa 2,6-bifosfato - Se porduce cuando los niveles de F6P (y
por ende la glucosa) son elevados, activando a la PFK y por ende
acelerando la glucólisis.

Ambas PFK2 (que forma F2,6BP) y FBP2 (que lo transforma en F6P),

son parte de la misma proteína bifuncional (53 Kda) que es controlada
recíprocamente por fosforilación de una serina.
Cuando la glucosa está baja en sangre, el glucagón se secreta y la
cascada de señales estimula la fosforilación y ésta a su vez favorece la
actividad de la FBPasa2 e inhibe la PFK2, bajando los niveles de
F2,6BP y estimulando la gluconeogénesis.
Cuando la glucemia se eleva, la enzima se defosforila y la actividad
PFK2 predomina, aumentando los niveles de F2,6BP y estimulando la
glucólisis.

16
Concepto de ciclo de sustrato

ATP ADP ATP ADP

100 120
A B A B
90 72
Pi H2O Pi H2O

Salida neta 10 Salida neta 48

Efecto NO LINEAL: Un aumento del flujo (20%) en una dirección

resulta en una salida neta mayor (380%)

Tanto la PFK2 como la fructosa

bifosfatasa 2 (FBP2) son parte de
una enzima bifuncional de 53
KDa. En su estado fosforilado (en
serina), en respuesta a niveles
bajos de glucosa en sangre, la
FBPasa2 se activa (hacia
gluconeogénesis) y la PFK2 se
reprime. Cuando hay niveles altos
de glucosa, la PFK2 se activa y
activando entonces la glucólisis.

17
 Gluconeogénesis & glucólisis
Control recíproco

Piruvato kinasa - Inhibida por ATP

Estimulada por F1,6BP

Piruvato carboxilasa - Inhibida por ADP

Estimulada por acetilCoA

PEP carboxikinasa - Inhibida por ADP

Fosfofructokinasa - Estimulada por AMP

F1,6BP bifosfatasa - Inhibida por F2,6BP

18
 El ciclo de Cori
Las lactato deshidrogenasas son diferentes en diferentes tejidos
Glucosa Glucosa
Cuesta 6 Produce 2
fosfatos fosfatos

Piruvato Sangre Piruvato

Lactato Lactato

Hígado Músculo
COO- COO-
| |
C=O + NADH + H+ H-C-OH + NAD+ + H+
| |
CH3 CH3

Los aminoácidos como precursores de glucosa

Según punto de entrada

19
 Metabolismo de glucógeno

Diagrama de la estructura del

glucógeno

α-1,4

α-1,6

Gránulos electrón-densos de
glucógeno en hepatocitos
(100-400 Å)

20
 Enzimas que participan en la degradación de glucógeno

Una buena parte de las enzimas necesarias para la

degradación YA están en los gránulos, y son reguladas por
fosforilaciones reversibles que aumentan o disminuyen su
actividad catalítica en respuesta a señales celulares (cAMP)

Fosforilasa
Transferasa
Forman parte del mismo
α-1,6-glucosidasa polipéptido de 160 Kda.

Degradación de glucógeno

La G1P entonces es tranformada en G6P por acción de la enzima

fosfoglucomutasa, probablemente a través de un intermediario
G1,6BP.
A su vez, para la formación de glucosa libre, el hígado, a diferencia
del músculo, posee una G6P fosfatasa (en el lumen del RE).
Ventajas de fosforólisis versus hidrólisis.
Costo
Difusión de G1P ionizada hacia exterior es baja.

21
 Participación del piridoxal fosfato

Lisina en sitio activo de fosforilasa

ε amino (formando una base de Schiff)

PLP (derivado de B6 - piridoxina)

22
 Síntesis de glucógeno
La degradación y la síntesis de glucógeno (y la de casi cualquier
otro compuesto) proceden por vías alternas que pueden ser reguladas
de manera independiente.

Síntesis de glucógeno

1- G6P G1P (fosfoglucomutasa)

2- G1P + UTP UDP-G + PPi (UDP-glucosa pirofosforilasa)
3- PPi + H2O 2Pi (pirofosfatasa)
4- UDP-G + glucógenon glucógenon+1 + UDP (sintasa)
5- UDP + ATP UTP + ADP (nucleósido difosfokinasa)

Total

G6P +ATP + glucógenon + H2O glucógenon+1 + ADP +

2Pi

23
 Generación de los precursores del glucógeno

Reacción neta: G6P + UTP -----> UDP-glucosa + 2 Pi

Generación de las cadenas principales

(enlaces a-1,4) del glucógeno

Glucógeno sintasa

24
 Generación de las cadenas laterales (ramificaciones,
enlaces α-1,6) del glucógeno

Se transfieren bloques de aprox. 7 residuos en 1,4 (incluyendo un

extremo no reductor y tienen que provenir de una cadena de por lo
menos 11 residuos) a un punto de ramificación NO MAS cercano
de 4 residuos de otro punto de ramificación.
Por lo tanto la "ramificasa" y la "desramificasa" NO catalizan
exactamente la misma reacción.

Regulación

La regulación de síntesis & degradación gira en torno a cAMP y

hormonas.
Adrenalina & glucagón son glucogenolíticas (a nivel de
músculo e hígado, respectivamente).

La insulina, glucogenogénica, sobre todo a nivel de hígado.

La armonización entre síntesis & degradación se opera por

fosforilación en serina de la fosforilasa por una fosforilasa kinasa
(dando fosforilasa a - activa) mientras que una fosforilasa fosfatasa la
inactiva por defosforilación (fosforilasa b).

25
 Regulación
Cascada de regulación:
1- Hormonas (epi & glcgn) activan a la adenilato ciclasa.
2- El cAMP generado activa una proteína kinasa (alostéricamente).
3- La kinasa fosforila a la fosforilasa Y a la sintasa, con efectos opuestos. La primera
es ACTIVADA y la segunda INACTIVADA.
4- Los efectos opuestos, mediados también por hormonas en respuesta a niveles de
glucosa circulantes, se logran mediante activación de fosfatasas, que directa o
indirectamente activan la actividad de fosforilasa revirtiendo la fosforilación mediada
por la kinasa.
5- A nivel de hígado, la fosforilasa es el sensor de glucosa mediante;
A- Comunicación entre la Ser-fosfato y el sitio alostérico para glucosa.
B- Uso de la MISMA fosfatasa para inactivar fosforilasa y activar la sintasa.
C- La unión de la fosfatasa a la fosforilasa a para evitar su activación.

26
Fosforilasa

27
 El proceso completo

Revisar enfermedades de metabolismo de glucógeno

(Stryer, capítulo 19)

28