Hemosta

sia
Práctica 5
RECUENTO DIRECTO DE
PLAQUETAS
Andres Lara Jose Armando
Arroyo Martinez Mario
Eduardo
Bolaños Toledo Kenia
Gonzalez Basulto Lidia Itzel
Lara Cuellar Carlos Alberto
Román Armas Salmas
ÍNDICE RECUENTO DE
Método directo
PLAQUETAS
manual)
(electrónico o 3

METODOLOGÍA 4
REACTIVOS, EQUIPO Y
MATERIALES 5
TÉCNICA
6
FACTORES DE ERROR EN
LAS CUENTAS 10
CELULARES
 EL RECUENTO DE PLAQUETAS PUEDE
HACERSE DE MANERA DIRECTA Y DE
MANERA INDIRECTA

El método directo, a su vez, requiere de un contador

electrónico que sea capaz de hacer el recuento de las
diferentes células sanguíneas ( leucocitos, eritrocitos y
plaquetas).

En su defecto, podrá hacerse mediante el método manual, en

el que se empleará la cámara de Neubauer y la pipeta de
Thoma.
 METODOLOGÍA

En el recuento directo de Se llena el hemocitómetro

las plaquetas mediante la
cámara de Neubauer, se
mezcla la sangre en la
pipeta de Thoma con un
diluyente que cause la
hemólisis de los eritrocitos.
con dicha mezcla y se
recuentan las plaquetas en
la cuadrícula central, de
preferencia con
microscopio de contraste de
fases y con el objetivo de
40X.
REACTIVOS, EQUIPO Y Materiales de laboratorio:
MATERIALES
2 Tubos de recogida de muestra con EDTA
1 Aguja Vacutainer
Reactivo:
1 Contenedor de Vacutainer
1 ml. de Oxalato de amonio al 1%
1 Jeringa
1 Torundas de algodón con alcohol isopropílico
Equipo de laboratorio: 1 Ligadura
Centrífuga
1 Cámara de Neubauer
Agitador eléctrico
1 Pipeta de Thoma
Microscopio
1 Boquilla y manguera para aspiración
 TÉCNICA
Muestra por punción digital: el sitio debe estar limpio y la sangre debe fluir libremente. Limpia la
primera gota.
Muestra de sangre venosa: Debe obtenerse con una jeringa de plástico seca ( ó de vidrio
siliconizado ) con aguja corta, de calibre no menor al 21.

Retirar la aguja antes de poner la sangre en un tubo de plástico con EDTA. La sangre y el
anticoagulante deben mezclarse inmediata y cuidadosamente, para evitar la formación de espuma.

Con la pipeta de Thoma, aspirar sangre hasta la marca de 1.0 y se diluye hastal a marca
de 101 con el oxalato de amonio ( dil.1:100).Hacer por duplicado.

Colocar las pipetas en el agitador de 10 a 15 minutos.

Llenar la cámara de Neubauer con el contenido de las pipetas debidamente mezclado,

desechando las primeras 4-6 gotas
 TÉCNICA
Cubrir la cámara con una caja de Petri de 10 a 20 min, para permitir que las
plaquetas se sedimenten. Colocar un pedazo de algodón ó de papel filtro mojados
dentro de la caja para evitar la evaporación.

Empleando el microscopio de contraste de fases, contar las plaquetas en la

cuadrícula central destinada a la cuenta de glóbulos rojos ( 25 cuadros
centrales )calculando la cifra de plaquetas como sigue:

No. De plaquetas /μl= No de plaquetas contadas X factor de dilución( 100) X factor de

corrección de volumen ( 10)= No de plaquetas contadas X 1000.
 FACTORES DE ERROR EN LAS
CUENTAS CELULARES
No se debe agitar el tubo pues se forma espuma que
Cuando se use sangre capilar se requiera una gota que
impide medir cantidades exactas.
fluya libremente.
Inclinar el tubo bien mezclado a un ángulo de 45°, ó
Las muestras de sangre anticoagulada se deben mezclar
ligeramente mayor, y pipetear del borde superior del
cuidadosamente invirtiendo el tubo de sangre por lo
tubo siguiendo las mismas indicaciones que para
menos 20 veces.
sangre capilar
Las pipetas deben estar limpias y secas.
La cámara se llena por acción capilar, regulando el
Tomar las muestras con la pipeta en forma rápida y flujo del líquido de la pipeta, para que fluya suave
precisa. y rápidamente, Llenar la cámara completamente,
Si se rebasa la línea del volumen deseado ligeramente, sin permitir que el líquido rebase los límites.
ajustar tocando una papel absorbente con la punta de la Esperar de 10 a 20 minutos a que las células se
pipeta. Limpiar el exterior de la pipeta antes de asienten en el área de conteo. Proseguir con el
introducirla en la solución disolvente. conteo

La cámara del hemocitómetro y el cubreobjetos deben estar limpios y secos antes de usarse. Esto
evita errores graves que se producen por las huellas digitales y las superficies aceitosas.