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ENEC-INDAPSV

NOMBRE: VICTOR EMILIO CACAO CAAL

LIC: ANIBAL RODRIGO SEVILLANOS

TECNICO: MARTA JULIA CORONADO

TRABAJO: MAPAS CONCEPTUALES DE


PROCEDIMIETO PARA DILUCIONES PARA
GLOBULOS BLANCOS Y PLAQUETAS.

FECHA: 26/3/2020
RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS

El recuento de leucocitos mediante cámara consiste en determinar el número de ellos


presentes en un volumen determinado de sangre diluída. A esta muestra se le lisan
los hematíes para facilitar la visualización y recuento de leucocitos. La muestra de
sangre se diluye lo suficiente para que los leucos estén separados unos de otros y así
poder contarlos. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer o similar de
dimensiones conocidas.
La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de las esquinas miden 1
mm  de superficie y están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm
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de lado. El cuadrado del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de lado y


éstos a su vez están subdivididos en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado.

Recuento de leucocitos en cámara de Neubauer

En el recuento de leucocitos se emplean líquidos de dilución que lisan los hematíes. El


diluyente más utilizado es el líquido de Türk, que contiene ácido acético glacial con la
finalidad de destruir los hematíes. Este líquido está compuesto por ácido acético
glacial, violeta de genciana al 1% y agua destilada.

Los valores de referencia en el recuento de leucocitos son de 5-10 Gigaleucos por litro
(Gl/L) para hombres y mujeres. O lo que es lo mismo, 5000-10000 leucocitos/mm . 3

Cuando los valores son superiores a los de referencia estamos ante una leucocitosis.
Y si son inferiores estaremos ante una leucopenia.

Material

Pipeta de 2 ml

Micropipeta automática de 20 microlitros

Puntas de micropipeta

Guatis

Cubreobjetos

Cámara de Neubauer

Tubo de ensayo

Microscopio óptico
Reactivos

Sangre anticoagulada con EDTA

Líquido de Türk
Técnica
1. Con una pipeta echar en un tubo de ensayo 2 ml de líquido de Türk.
2. Con la micropipeta automática de 20 microlitros retirar dicho volumen del
tubo de ensayo.
3. Echar 20 microlitros de sangre anticoagulada homogeneizada en el tubo,
haciendo un factor de dilución de 1/100.
4. Homegeneizar bien la mezcla.
5. Incubar 5 minutos.
6. Poner el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer.
7. Cargar la cámara, por capilaridad, con la micropipeta automática.
8. Incubar 5 minutos con la cámara cargada.
9. Observar al microscopio óptico, realizando un recuento de leucocitos en los 4
cuadrados grandes de las esquinas. Estos cuadrados tienen, a su vez, 16
cuadrados más pequeños.

RESULTADO

SE LEYERON LOS 16 CUADRADOS PEQUEÑOS DE CADA CUADRADO GRANDE SITUADO EN LAS


ESQUINAS. ES CONVENIENTE TENER CUIDADO AL CONTAR LOS LEUCOCITOS QUE ESTÁN EN CONTACTO
CON LAS RAYAS QUE DELIMITAN LOS CUADRADOS. SI UN LEUCOCITO ESTÁ EN CONTACTO CON LAS
RAYAS SUPERIOR Y DERECHA, ENTONCES SE CUENTA. EN CAMBIO, SI ESTÁ EN CONTACTO CON LAS
RAYAS INFERIOR E IZQUIERDA, NO SE CUENTA.

Los conteos fueron los siguientes: 5, 4, 1 y 5, haciendo una suma de 15 leucocitos en


esos cuatro cuadrados grandes. El cálculo consiste en una simple regla de 3, si hay 15
leucocitos en 4*(1*1*0,1) mm , en 1 mm  habrá X leucocitos. La resolución de esta
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regla de 3, una vez despejada la X, es de 37,5 leucocitos/mm  diluídos.


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Esa cifra hay que multiplicarla por la inversa del factor de dilución (1/100), es decir,
37,5*100 = 3750 leucocitos/mm  o, lo que es lo mismo, 3,75 Gl/L.
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Recuento de plaquetas en cámara
de Neubauer

El recuento de plaquetas mediante cámara consiste en determinar el número de


trombocitos presentes en un volumen determinado de sangre diluída. Se lisan los
hematíes y se evita el agregamiento plaquetario para facilitar su visualización y
recuento. La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que estén separadas unas
de otras y así poder contarlas. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer o
similar de dimensiones conocidas.
La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de las esquinas miden 1
mm2 de superficie y están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm
de lado. El cuadrado del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de lado y
éstos a su vez están subdivididos en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado.

Recuento de plaquetas en cámara de Neubauer


En el recuento de plaquetas se emplean líquidos de dilución que lisen los hematíes y
que impidan la agregación plaquetaria. Uno de los líquidos diluyentes que se pueden
usar es la disolución de 1 gramo de oxalato amónico en 100 ml de agua destilada.
Los valores de referencia en el recuento de plaquetas son de 150-400 Gigaplaquetas
por litro (Gl/L) para hombres y mujeres. O lo que es lo mismo, 150000-400000
plaquetas/mm3. Cuando los valores son superiores a los de referencia estamos ante
una trombocitosis. Y si son inferiores estaremos ante una
trombocitopenia/trombopenia.

Material
1. Pipeta de 2 ml
2. Micropipeta automática de 20 microlitros
3. Puntas de micropipeta
4. Guatis
5. Cubreobjetos
6. Cámara de Neubauer
7. Tubo de ensayo
8. Cristalizador
9. Capilares de vidrio
10. Microscopio óptico
11. Reactivos
12. Sangre anticoagulada con EDTA
13. Líquido diluidor de plaquetas
14. Agua desionizada
Técnica
1. Con una pipeta echar en un tubo de ensayo 2 ml de líquido diluidor de
plaquetas.
2. Con la micropipeta automática de 20 microlitros retirar dicho volumen del
tubo de ensayo.
3. Echar 20 microlitros de sangre anticoagulada homogeneizada en el tubo,
haciendo un factor de dilución de 1/100.
4. Homogeneizar bien la mezcla.
5. Poner el cubreobjetos sobre la cámara de Neubauer.
6. Cargar la cámara, por capilaridad, con la micropipeta automática.
7. Incubar durante 15 minutos en una cámara húmeda.
8. Observar al microscopio óptico, realizando un recuento de plaquetas dentro
del cuadrado central. De los 16 cuadrados medianos que componen el
cuadrado central elegiremos 5 al azar. De cada cuadrado mediano elegido
leeremos 4 cuadrados pequeños, haciendo una lectura total de 20 cuadrados
pequeños.

Los conteos fueron los siguientes: 3, 2, 3, 4 y 10 haciendo una suma de 22 plaquetas en


esos 20 cuadrados pequeños. El cálculo consiste en una simple regla de 3, si hay 22
plaquetas en 20*(0,05*0,05*0,1) mm3, en 1 mm3  habrá X plaquetas. La resolución de
esta regla de 3, una vez despejada la X, es de 4400 plaquetas/mm3  diluídas.
Esa cifra hay que multiplicarla por la inversa del factor de dilución (1/100), es decir,
4400*100 =  440000 plaquetas/mm3  o, lo que es lo mismo,  440 Gp/L.