CUENTA DE ERITROCITOS

OBJETIVO
Aprender a realizar un recuento de Eritrocitos por milmetro
cbico de sangre, interpretar el resultado, as como
adiestrarse en el manejo de la cmara de Neubauer y la
pipeta de Thoma
FUNDAMENTO
Para el conteo de eritrocitos, se usan mtodos sistemticos
que son ms rpidos y precisos, y los mtodos manuales.
Todo mtodo manual de recuento celular incluye 3 fases:
Dilucin de la sangre
Muestreo de la sangre diluida en un volumen
Recuento de clulas en ese volumen
Una suspensin celular se caracteriza por presentar un
nmero de partculas microscpicas dispersas en un fluido.
Habitualmente ser necesario determinar tanto la densidad
de las clulas en la suspensin como el porcentaje de stas
que son viables.
Para determinar la densidad de las clulas se emplean
diferentes tcnicas, desde la relativamente simple cmara de
contaje celular de la que existen numerosas variantes, entre
ellas la que utiliza la cmara de Neubauer
Para el conteo de eritrocitos, es necesario diluir la sangre con
el lquido de Hayem, en una proporcin exacta. Luego se
examina en el microscopio con una cantidad pequea
colocada en la cmara de Neubauer, contando el nmero de
elementos que se encuentran en el retculo de la cmara y
mediante una operacin se obtiene el nmero total.

Para la realizacin del conteo manual se necesita un lquido

de dilucin, una cmara de recuento, una pipeta diluidora y
un microscopio.
MATERIAL
Pipeta de Thoma para glbulos rojos (perla roja)
Equipo para venopuncion (Tubo lila)
Boquilla roja
Tubo de plstico
Tubos de ensayo
Papel parafin
Cmara de Neubauer
Cubrehematimetro
Microscopio
Gasas
SUSTANCIAS
Alcohol al 70%
Sangre venosa
Liquido de Hayem
PROCEDIMIENTO
1. Una vez seleccionada, se desinfecta la zona con alcohol al 70%, y se practica
puncin venosa. La sangre es recogida en un tubo lila con EDTA
2. Colocar el tubo de plstico y la boquilla para aspirar en la pipeta

3. Llenar la pipeta de glbulos rojos con sangre hasta la marca 0.5 para realizar una
dilucin de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilucin ser 1/100. Limpiar la punta
con gasa o papel absorbente. Si la sangre se pasa de la marca, se puede
absorber con gasa el excedente

4. Introducir la pipeta en el tubo o frasquito que contiene el diluyente (Hayem) y llenar

de lquido de dilucin hasta la marca de 101

5. Se tapa la punta con papel parafin y se coloca en un rotador automtico o se hace

rotar manualmente de 2-3 minutos

6. Destapar la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota
pequea cerca de un extremo de la cmara para que por capilaridad se llene
exactamente. Dejar 2 minutos que los eritrocitos se sedimenten

7. Colocar en la platina del microscopio y enfocar la cuadricula a 10x. luego con el

objetivo de 40x contar sobre el cuadro grande central de la cmara solo en 5
cuadrados pequeos: uno central y cuatro angulares (80 cuadritos del total)

8. En el recuento se incluyen las clulas que cubren o tocan por dentro o por fuera
las lneas limitantes superior e izquierda en el cuadro pequeo de recuento y no se
consideran los que estn en los lmites inferior y derecho.

OBSERVACIONES

Cmara de Neubauer, 10x

El rayado de la cmara de Neubauer cubierta de miles de eritrocitos, que destacan por su forma
redonda y gran cantidad.

Cmara de Neubauer, 40x

Enfocando el cuadro central de los cuadros pequeos, se aprecian claramente los 16 cuadritos
pequeos donde se tienen que contar los eritrocitos que hay en ellos.

RESULTADOS
Los recuentos de eritrocitos se expresan como
concentraciones, que en este caso seran nmero de clulas
por unidad de volumen de sangre, que es 1mm3
Despus de contar los hemates de los 5 cuadrados
pequeos, se suman y con dicha cantidad de hace el
siguiente clculo:
N de hemates x mm3 = altura x dilucin x rea
N de hemates x mm3 = 1/10 x 1/200 x 1/5 = 1/10 000
N de hemates x mm3 = hemates contados x 10 000
En el anlisis hecho, el nmero de eritrocitos fue de 491, que
al multiplicarse por 10 000 daba como resultado 4 910
000/mm3, lo que indica un ndice normal pues el paciente era

una mujer de 11 aos de edad.

VALORES DE REFERENCIA
(Millones de clulas/mm3)
Hombres:..4 500 000-5 500 000
Mujeres:....4 000 000-5 000 000
Nios (4 aos):.........................4 200 000-5 200 000
Lactantes (1-6 meses):.....3 800 000-5 200 000
Recin nacidos:..5 000 000-6 000 000
CONCLUSIN
Los eritrocitos o glbulos rojos son clulas de color
amarillento, con la forma de un disco bicncavo, sin ncleo y
contienen un pigmento llamado hemoglobina que les otorga
su caracterstico color.
Estos se forman constantemente en la medula sea, en el
crneo, las costillas, las vrtebras y el esternn, en un
proceso conocido como eritropoyesis. Viven
aproximadamente 120 das y al envejecer son destruidos por
las clulas reticuloendoteliales del hgado, la medula sea y
el bazo.
La falta de ncleo le confiere la virtud de acarrear oxigeno sin
consumir nada de l.
La pipeta de Thoma para glbulos rojos est constituida por
dos porciones capilares y un bulbo central. El tubo capilar
inferior est dividido en 10 partes iguales con marcas de 0.5 y
1.0. En el interior del bulbo existe una perlita de plstico roja
para favorecer la mezcla de sangre con el lquido y en el
capilar superior hay una marca de 101.

El lquido de dilucin no solamente debe de diluir los

eritrocitos hasta cifras legibles, sino que tambin permita
identificarlos y que destruya otros elementos celulares que no
son de inters en este momento. En general se puede usar
cualquier solucin isotnica como diluyente y pueden ser:
Soluciones de Gower
Soluciones de Dace
Solucin salina de NaCl al 0.9%
Liquido de Hayem, el cual est formado de 5g de NaCl, 2.5g
de Na2SO4, 2.5g de MgCl2 y agua destilada para un litro. Este
ltimo es el ms usado.
Es muy importante observar que en la cmara de Neubauer
las reas de recuento de eritrocitos y linfocitos son diferentes.
Los glbulos rojos se cuentan en las reas coloreadas de
rojo, mientras que los glbulos blancos se cuentan en las
reas coloreadas de azul.

Para realizar el conteo se enfoca con el objetivo 40x, y se

localiza el cuadro central con el condensador bajo y luz dbil.
Para proceder al recuento, que se lleva a cabo en los
cuadrados pequeos del retculo marcado en color rojo,
contando las clulas en cada cuadro, en barrido o fila.

Bibliografa:

Fundamentos y tcnicas de anlisis hematolgicos y

citolgicos, articulo web consultado el da 8 de marzo de 2012
en:http://html.rincondelvago.com/fundamentos-y-tecnicas-deanalisis-hematologicos-y-citologicos.html

Cmara de Neubauer, consultado el da 15 de abril de

2011 enhttp://2l2mlaboratoristaclinico.blogspot.com/2009/04/camara-deneubauer.html

Martnez Fragoso, Vicente. Manual de Biometra

Hemtica.CBTis199, Mxico, 2012. Pp. 9-11