UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZO

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA: LABORATORIO CLÍNICO E HISTOPATOLÓGICO

ASIGNATURA: HEMATOLOGÍA I

DOCENTE:

DRA.: XIMENA ROBALINO

TERCER SEMESTRE “A”

ESTUDIANTE:

JERÉZ BENALCÁZAR BRYAN GUSTAVO.

INFORME DE LABORATORIO N° 05

TEMA: RECUENTO DE ERITROCITOS

FECHA DE ENTREGA:

RIOBAMBA, 14 DE JULIO, 2019

PERIODO:

ABRIL-AGOSTO 2019
 INFORME DE PRÁCTICA DE LABORATORIO
PERÍODO ABRIL – AGOSTO 2019
ACADÉMICO
ASIGNATURA HEMATOLOGÍA SEMESTRE: PARALELO:
I TERCERO “A”
NOMBRE DEL Mgs. XIMENA ROBALINO FLORES
DOCENTE
FECHA Riobamba, 07 de junio del 2019
NÚMERO DE 5 HORA: 10:00 -13:00 DURACIÓN: 3 horas
PRÁCTICA
LUGAR DE LA LABORATORIO CLÍNICO DE DOCENCIA
PRÁCTICA
TÍTULO DE LA SERIE ROJA
UNIDAD
TEMA DE LA
RECUENTO DE ERITROCITOS
PRÁCTICA
RESULTADO DE APRENDIZAJE.

Aplica conocimientos teórico-prácticos mediante procedimientos y técnicas manuales y/o

automatizadas de análisis de laboratorio en el área de Hematología en muestras biológicas,
para formar profesionales capacitados.

OBJETIVO GENERAL

 Desarrollar una técnica correcta con respecto a la prueba de conteo de eritrocitos en

función al aprendizaje, desempeño y diagnóstico implicado en dicha prueba.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

 Obtener una muestra de Sangre por Punción Venosa con tubo al vacío
 Realizar un conteo de eritrocitos exitoso de forma manual en tubo.
 Realizar un conteo de eritrocitos exitoso de forma manual en pipeta de Thoma.
 Interpretar y correlacionar los resultados obtenidos.

FUNDAMENTO TEÓRICO:

ERITROCITOS

RECUENTO DE ERITROCITOS

Los procedimientos generales de recuento de eritrocitos incluyen la aspiración de una

cantidad muy exacta de sangre en una pipeta escrupulosamente limpia. A continuación se
diluye hasta una determinada señale la misma pipeta con un líquido que es anticoagulante
e isotónico respecto a los eritrocitos. Después de efectuar la adecuada mezcla, la
solución resultante se coloca en una cámara de recuento muy limpia (hemocitómetro)
y se cubre con un cubreobjetos estandarizado ópticamente plano y limpio. La
cantidad de eritrocitos se cuenta sobre la platina de un microscopio de luz.

HEMOCITÓMETRO O CÁMARA CUENTA GLÓBULOS

Es un instrumento de vidrio compuesto por dos cámaras de recuento separadas por un

 surco horizontal y limitadas a cada lado por un canal vertical. El mejor modo de
mantenerlos limpios es con agua, secarlos con un paño blando y guardarlos en alcohol
absoluto, cuando se va a utilizar se secan cuidadosamente con un paño blando.

PIPETAS DILUTORAS

Son de vidrio tubulares y su calibración es muy cuidadosa. Si se precisa pueden calibrarse

por métodos gravimétricos o colorimétricos.

La sangre aspirada hasta la señal 0.5 y diluida hasta la señal 101 hace una dilución de 0.5
partes en 100(o sea 1:200) en la zona de la ampolla de la pipeta, porque el contenido libre
de las células de la parte capilar no participa en el proceso de dilución.

LIQUIDO DE DILUCIÓN

Existen diversos tipos de líquidos de dilución utilizados en el laboratorio. Los más

comunes son los líquidos de Gower y de Hayem.

TÉCNICA DE RECUENTO DE ERITROCITOS

1. Se mantiene horizontalmente la pipeta y se introduce una muestra de sangre en la

misma exactamente hasta la señal 0,5. Un exceso de sangre se puede reducir hasta que
descienda a la señal 0.5 tocando ligeramente el extremo de la pipeta con el dedo. Es
preciso eliminar cualquier resto de sangre que esté por fuera de la pipeta.

2. La pipeta se coloca inclinada (45°) y se gira ligeramente a medida que se llena hasta
cerca de la señal 101. A continuación se coloca verticalmente y se termina de llenar
con el líquido de dilución hasta la señal 101.

3. Se quita con cuidado el tubo de aspiración de goma y la pipeta se sujete entre el dedo
pulgar y medio colocado en ambos extremos, sometiéndola a una agitación horizontal
e inclinada durante 2 a 3 minutos. Más cómodo resulta obturar los extremos con unos
tapones de goma y colocarla en un agitador; a tal fin sirve la perla de vidrio situada en
la ampolla de la pipeta, que facilita una mezcla fácil, y rápida de la solución con la
muestra de sangre.

4. Después de la agitación, se desprecian las 4 a 8 primeras gotas de cada pipeta para

eliminar el líquido del capilar que no contiene hematíes. A continuación se carga el
hemocitómetro.

5. Se coloca el cubreobjetos exactamente encima de las cámaras de recuento. La pipeta,

parcialmente vacía, se sujeta como si fuese un lápiz. Mediante el dedo índice se
controla el flujo de líquido colocándolo en el extremo próximo a la ampolla; el
extremo de la pipeta se coloca en el borde que une el cubreobjetos y la cámara. Se
disminuye la presión del dedo índice y el líquido pasa entre el cubreobjetos y el
hemocitómetro por atracción capilar hasta que se llena la cámara. No debe haber
burbujas y los surcos adyacentes no deben contener líquido.

6. Se coloca el hemocitómetro en la platina del microscopio y se deja 3 minutos para que

las células se distribuyan. Utilizando un objetivo de 10 x se localiza el cuadrado
grande central y se comprueba que las células estén uniformemente distribuidas.
Después se pasa al objetivo de 40 x y con la luz reducida se cuentan las células en 5 de
 los 25 cuadrados pequeños situados en el gran cuadrado central; es decir, los 4
cuadrados pequeños externos y uno central. Como cada cuadrado pequeño está
limitado por dobles líneas (en el rayado modificado de Neubauer) y cada uno contiene
16 cuadrados más pequeños, se cuenta un total de 80 cuadrados más pequeños. Las
células que están situadas tocando las líneas que limitan los bordes superior e
izquierdo de cada cuadrado más pequeño se incluyen en el recuento y se excluyen las
de los límites inferior y derecho. Se comienza a contar por el cuadrado pequeño
superior izquierdo externo y a continuación el superior derecho externo, el inferior
derecho externo, el inferior izquierdo externo y finalmente el central. En los 16
cuadrados más pequeños que contienen los cuadrados menores, se inicia el recuento de
izquierda a derecha contando los cuatro primeros cuadrados pequeños, y luego de
derecha a izquierda los cuatro cuadrados de lalínea inferior, y así sucesivamente. Se
anota por separado el número de los hematíes de cada grupo de 16 cuadrados y se
suman los resultados.

Cálculo y trascripción de los resultados. El recuento eritrocitario total sólo se calcula

exactamente cuándo se tienen en cuenta las dimensiones del espacio hemocitómetro
cubreobjetos y las diluciones de la pipeta. Es decir, que se calcula mejor el número de
hematíes por milímetro cúbico de sangre cuando se tienen en cuenta el área contada, la
profundidad de la cámara y la dilución, según la fórmula siguiente:

ERITROCITOS: Número de eritrocitos contados x 400 x 200 x 10

80

Área total de la cámara: 400 Dilución: 200

Profundidad o altura de la cámara: 10 Área contada: 80

ERITROCITOS x mm cúbico: Número de eritrocitos contados x 10.000

REPORTE: Eritrocitos en millones x mm cúbico de sangre total
Si el paciente está muy anémico o si se han contado menos de 400 células debe
disminuirse la dilución hasta 1:100 llenando la pipeta con sangre hasta la señal 1,0 en
lugar de hasta la señal 0,5.
Si el paciente está intensamente policitémico o se han contado más de 600 células, debe
aumentarse la dilución de la sangre hasta 1:500 o 1:333 llenando la pipeta con sangre
hasta la señal 0,2 o 0,3 respectivamente.

MATERIALES Y MÉTODOS
Equipos Materiales Reactivos
 Cámara de Neubauer  Pipeta de Thoma  Alcohol
 Microscopio  Gradilla de tubos wintrobe antiséptico
Agitador automático  Equipo para toma de muestras de  Líquido de
de pipetas sangre dilución Hayem
 Piano contador de  Papel absorbente  Gradilla
células  Absorbedor de goma
 Tubos de ensayo pequeños
 Pipetas automáticas de 1000 - 100 ul,

MUESTRA  Sangre total obtenida con anticoagulante EDTA

PROCEDIMIENTO / TÉCNICA:

PROCEDIMIENTO DEL RECUENTO DE ERITROCIDOS.

 DILUCIÓN EN PIPETA DE THOMA.

1. Preparamos nuestro material apropiadamente, además de nuestra áreade trabajo en

donde vamos a llevar a cabo nuestra práctica.

2. Se mantiene horizontalmente la pipeta y se introduce una muestra de sangre en la

misma exactamente hasta la señal 0,5.

3. La pipeta se coloca inclinada (45°) y se gira ligeramente a medida que se llena

hasta cerca de la señal 101.

4. A continuación se coloca verticalmente y se termina de llenar con el líquido de

dilución hasta la señal 101.

5. Posteriormente quitaremos con cuidado el tubo de aspiración de goma y

sujetaremos la pipeta entre el dedo pulgar y medio colocado en ambos extremos

6. La someteremos a una agitación horizontal e inclinada durante 2 a 3 minutos,

teniendo en cuenta que se puede utilizar el agitador de tubos automático.

7. Después de la agitación, se desprecian las 4 a 8 primeras gotas de la respectiva

pipeta para eliminar el líquido del capilar que no contiene hematíes.

8. A continuación se preparará la cámara de Neubauer cuidadosamente colocando un

cubre objetos en el centro de los dos vectores de recuento.

9. Se colocará cuidadosamente con el uso de una pipeta automática en las superficies

externas del cubre objetos, ingresando por capilaridad el líquido hacia nuestros
vectores de observación.

10. Como uno de los pasos finales colocaremos nuestra cámara bajo el microscopio
para su posterior observación, aumentando los objetivos gradualmente hasta 40x
en donde realizaremos el conteo respectivo.

Descripción.- Observación de
la pipeta de Thoma y de los
cuadrantes para la realización
del conteo eritrocitario.

DILUCIÓN EN TUBO DE ENSAYO

a. Preparamos nuestro material apropiadamente, además de nuestra área de trabajo

 en donde vamos a llevar a cabo nuestra práctica.

b. Posteriormente una vez se encuentre rotulado el tubo de ensayo que utilizaremos

para la práctica respectiva, colocaremos una cantidad de 1900 microlitros de
reactivo de Hayem

c. Posteriormente agregaremos 10 microlitros de sangre con anticoagulante

(EDTA)

d. Realizaremos golpes con cierto grado de potencia para homogeneizar

adecuadamente dando como resultado una dilución 1: 200

e. Posteriormente con ayuda de nuestra pipeta automática tomaremos una pequeña

cantidad de sustancia que al igual en el proceso anterior ingresara en los
cuadrantes de observación de nuestra cámara de Neubauer por capilaridad.

f. Realizaremos nuestro respectivo contero de eritrocitos, para posteriormente

aplicar las fórmulas aprendidas.

g. Aplicaremos la fórmula:

ERITROCITOS: Número de eritrocitos contados x 400 x 200 x 10

80

h. La fórmula nos ayudará en ambos procedimientos para obtener el recuento

respectivo, valor que deberemos comparar con los valores de referencia
respectivos para brindar un reporte apropiado.

RESULTADO (Gráficos, cálculos, etc.)

IMÁGENES DESCRIPCIÓN

IMAGEN 1.

Observación del procedimiento de

extracción sanguínea concerniente a la
presente práctica
 IMAGEN 2.

Podemos observar cómo se obtuvo la

muestra de extracción sanguínea en
con anticoagulante EDTA

IMAGEN 3.

Podemos observar un instrumento

denominado piano que nos servirá
para llevar a cabo el conteo respectivo
eritrocitario.

IMAGEN 4.

Podemos observar el desarrollo de la

prueba en base al uso de la pipeta de
Thoma.

IMAGEN 5.

Observaremos nuestro instrumento

que nos ayuda a homogeneizar
correctamente la muestra mediante el
uso de vibraciones consecutivas

IMAGEN 6.

Observaremos el montaje de nuestra

sustancias en la cámara de Neubauer
para el desarrollo respectivo de la
lectura y conteo
 CÁLCULOS.

Conteo de los campos A – B –C –D - E

CAMPOS CONTEO
A 108
B 99
C 113
D 95
E 98
TOTAL 506

APLICACIÓN DE LA FÓRMULA

ERITROCITOS:

Número de eritrocitos contados x 400 x 200 x 10

=
80

506 ERITROCITOS x 400 x 200 x 10

=
80

= 5´060.000 Eritrocitos x mm3

NOTA: El valor obtenido coincide con los resultados normales dentro de los
valores de referencia conocidos para mujeres.
OBSERVACIONES

 Se observó que los resultados pueden variar de acuerdo a la técnica realizada, en ciertos
casos dando un valor irreal y muy elevado de lo que sería el valor verídico del paciente,
esto en caso de pipeta de Thoma por su mal uso.

 Se observó que el recuento de eritrocitos puede realizarse por dos formas, de las cuales
debemos señalar deben dar un valor aproximado la una de la otra.

 Se observó que el uso de reactivos que se encuentren en regla resulta imprescindible y

que el mismo no debe ser contaminado accidentalmente con restos de sangre del
paciente.

CONCLUSIONES

Una vez culminada la práctica de laboratorio se ha llegado a las siguientes conclusiones:

 Se ha obtenido una muestra de Sangre por Punción Venosa con tubo al vacío con
anticoagulante EDTA, cuyo resultado es satisfactorio en relación a la comodidad del
paciente.

 Se ha realizado el conteo de eritrocitos exitoso de forma manual en tubo cuyo resultado

oscila entre los 5´060.000 Eritrocitos x mm3, siendo un resultado aceptable en relación
al género femenino de nuestra paciente encontrándose dentro de los valores normales.

 Se ha realizado el conteo de eritrocitos exitoso de forma manual en pipeta de Thoma,

cuyo resultado obtenido oscila entre los 5´000.000 Eritrocitos x mm 3, siendo un
resultado aceptable en relación al género femenino de nuestra paciente encontrándose
dentro de los valores normales.

 Al momento de interpretar y correlacionar los resultados obtenidos, hemos podido

concluir la eficacia de la prueba realizada y el estado normal de nuestra paciente en
relación al reporte emitido.

RECOMENDACIONES

Una vez culminada la práctica de laboratorio se ha llegado a las siguientes

recomendaciones:

 Se recomienda reforzar la práctica con respecto al uso de la pipeta de Thoma con

respecto a la dilución debido a que puede representar un cierto grado de dificultad
en novatos.

 Se recomienda el uso de líquido de Hayem en pequeñas cantidades separadas del

reactivo principal debido a que pueden existir riesgos como la contaminación
accidental del reactivo por la sangre del paciente.

 Se recomienda el utilizar una pipeta automática para el trasvaso de las respectivas

cantidades de sustancias a lo largo del transcurso de nuestra práctica.
REPORTE

Nombre: Lizbeth Satán Código: 008

Médico: Dr.: Camilo Benalcázar. Edad: 20 años
Fecha: Riobamba, 12 de julio, 2019 Muestra: Sangre.

RESULTADO.

EXAMEN RESULTADO VALOR DE REFERENCIA

Recuento de Eritrocitos 5´060.000 Eritrocitos MUJERES: 4.2 – 5 millones

x mm3 Eritrocitos x mm3
HOMBRES: 4.7 - 5.5 millones
Eritrocitos x mm3

FIRM A DEL
ANALI
STA RESPONSABLE.
C.I. 1804435442

PREGUNTAS:

1.- Ponga la composición del líquido de Hayem:

 IDENTIFICACIÓN DEL PRODUCTO

Identificación de la sustancia o del preparado

Denominación:
  Líquido de Hayem
 
Uso de la sustancia o preparado:
Para usos de laboratorio, análisis, investigación y química fina.
 
 
 
COMPOSICIÓN/INFORMACIÓN DE INGREDIENTES

 
 Mercurio(II) Cloruro 0,1 % - 0,5 %

 CAS [7487-94-7]      Fórmula: HgCl2     M.=271,50     

   Número CE (EINECS): 231-299-8    

 Número de índice CE: 080-010-00-X

R: 28-34-48/24/25-50/53

2.- Ponga cuáles son las dimensiones de la cámara de Neubauer

En la retícula central, la cámara de Neubauer tiene un cuadrado primario que contiene

nueve cuadrados secundarios, cada uno de ellos dividido a su vez en 16 cuadrados
terciarios. El cuadrado secundario central contiene no 16, sino 25 cuadrados, cada uno
de ellos dividido a su vez en 16 cuadrados cuaternarios. En los bordes de este cuadrado
central se cuentan los hematíes, utilizando sólo los cuadrados de los bordes del terciario
central y uno de los centrales. En los secundarios de los bordes superiores e inferiores
de la cámara se hace el recuento leucocitario.

3.- Elaborar una tabla con los valores de referencia del número de eritrocitos por edad,
género y altura geográfica

VALORES DE REFERENCIA DE RECUENTO ERITROCITARIO.

MUJERES: 4.2 – 5 millones Eritrocitos x mm3

HOMBRES: 4.7 - 5.5 millones Eritrocitos x mm3

EDAD RECUENTO DE ERITROCITOS

Recién Nacido 4 – 5 millones / ml
3 meses 3,2 a 4,8 millones / ml
1 año 3,6 a 5 millones / ml
3 a 5 años 4 a 5,3 millones / ml
 5 a 15 años 4,2 a 5,2 millones / ml
Hombre adulto 4,5 a 5 millones / ml
Mujer adulta 4,2 a 5,2 millones / ml

NOTA: Consideraremos que las variaciones de altitud geográfica serán: ± 0,5

millones / ml

4.- Qué dilución se debe utilizar en el caso de pacientes con anemia y poliglobulia?

PACIENTE ANÉMICO.

Si el paciente está muy anémico o si se han contado menos de 400 células debe
disminuirse la dilución hasta 1:100 llenando la pipeta con sangre hasta la señal 1,0en
lugar de hasta la señal 0,5.

PACIENTE CON POLIGLOBULIA.

Si el paciente está intensamente policitémico o se han contado más de 600 células, debe
aumentarse la dilución de la sangre hasta 1:500 o 1:333 llenando la pipeta con sangre
hasta la señal 0,2 o 0,3 respectivamente.

BIBLIOGRAFÍA

 GARCÍA ESPINOZA, Benjamín. Hematología II, Citología, Fisiología y Patología de

hematíes y leucocitos. Paraninfo

 VIVES CORRONS, Joan Lluís. Manual de Técnicas en Laboratorio de Hematología.

Tercera edición. Masson. 2006

 HUERTA J. Oncología para el pediatra de Atención Primaria (II): formas de

presentación de las diferentes neoplasias infantiles. Form Act Pediatr Aten Prim.
2014;7:67-74.

 Carrillo R, Morales N, Ramírez FJ. Pseudotrombocitopenia: reporte de un caso y

revisión de la bibliografía. Med Int Mex. 2009;25:163-8.

 Díaz C, Bastida P. Interpretación del hemograma pediátrico. An Pediatría Contin.

2004;2:291-6.