BIOCONVERSIÓN

Producción de cortisona utilizando un microorganismo

Productos de la microbiología
Industrial Bioconversión
Células Sustrato

Producto
Levadura
(bioconversión
de esteroides)

Productos de las Células

Enzimas Productos
(Glucosa Químicos
Isomerasa) Alcohol (ácido cítrico)
Antibióticos Aditivos
(Penicilina) Alimenticios
(aminoácidos)
Bioquímica y Microbiología Industrial 2º de Bioquímica Universidad de Zaragoza
 Metabolitos Primarios y
Secundarios
Sustrato de Sustrato de Sustrato de
crecimiento crecimiento crecimiento

Metabolito Células Metabolito Células Metabolito

Células Primario Primario
Primario

Las células y el metabolito se producen

Metabolito
más o menos simultáneamente Metabolito
Secundario
Secundario

Después de producidas las células y el Después de producidas las células el

metabolito primario, las células sustrato se convierte en un metabolito
convierten el metabolito primario en uno secundario durante un posterior
secundario crecimiento
 Características de los metabolitos secundarios

• Específicos de un grupo de organismos

• No esenciales para el crecimiento
• Dependiente de las condiciones de crecimiento
• Producidos como grupo de estructuras relacionadas:
¯ Una cepa de Streptomyces produce 32 antibióticos distintos
del tipo antraciclina
• Puede obtenerse una superproducción espectacular
 Diferencias entre metabolismo
primario y secundario
Formación de penicilina por el
Formación de alcohol hongo Penicillium chrysogenum
a partir de azucar por la levadura
Trofofase Idiofase

Células

Penicilina
Alcohol

Células
Azúcar Azúcar
 Vía metabólica primaria para la síntesis de
aminoácidos aromáticos y metabolitos secundarios
con anillos aromáticos
Glucosa
Eritrosa Fosfoenol-piruvato
Metabolito
primario
3-Desoli-7-fosfo
D-arabinoheptulosonato Metabolito
secundario

Ansamicina Ácidoshikímico
Rifamicina
Piocianina
Candicidina Ácidocorísmico Ácido Triptófano
Nistatina antranílico
Cloranfenicol Actinomicina
Nocardicina Ácidoprefénico

Polimixina Fenilalanina Tirosina Novobiocina

Relaciones entre metabolitos
primarios y secundarios
Pentosa (C5) Ácido kójico
Metabolitos secundarios
Glucosa (C6) Sacáridos
Glucósidos
aromáticos Tetrosa (C4)

Aminoaácidos aromáticos Sikimato (C7) Triosa (C3) Serina (C3N) Glicocola (C3N)
CO2 C1-pool
Policétidos (nC2) CO2 Alanina (C3N) Piruvato(C3) Valina (C5N)
CO2
Malonato(C3) Acetato(C2) Mevalonato(C6) Pirofosfatode isopentenilo(C5)
Ácidos grasos (nC2) CO2
Terpenos/Esteroides (nC5)

Metabolitos
secundarios

Oxalacetato(C4) Citrato(C6)
Metabolitos CO2
secundarios CO2

a-cetoglutarato(C5)
Ácidoglutámico (C5N)
 Metabolitos microbianos secundarios comercializados
Metabolito secundario Utilidad comercial

Penicilina Antibiótico
Cefalosporina Antibiótico
Tetraciclina Antibiótico
Estreptomicina Antibiótico
Griseofulvina Antibiótico (antifúngico)
Actinomicina Antitumoral
Pepstatina Tratamientos antiulcerosos
ciclosporina A Inmunosupresor
Krestina Tratamiento del cáncer
Bestatina Tratamiento del cáncer
Gibberelina Regulador del crecimiento vegetal
Represión del metabolismo secundario por componentes del medio
Componente del medio Metabolito secudario reprimido

Glucosa Penicilina
Glucosa Actinomicina
Glucosa Neomicina
Glucosa Estroptomicina
Fosfato Candicidina
Fosfato Estreptomicina
Fosfato Tetraciclina
Fuentes de nitrógeno Penicilina
METABOLITOS PRIMARIOS

VITAMINAS, AMINOACIDOS Y
OTROS PRODUCTOS
ORGÁNICOS
 Uso de las vitaminas
• Suplemento alimentario para personas y
animales
• 2º fármaco más vendido (1.000 millones año)
• La mayoría se producen por síntesis química
• La cobalamina y la riboflavina por fermentación
 Vitaminas de producidas por
fermentación

Cobalamina (Vitamina B12) Riboflavina(Vitamina B2)

 Función de la cobalamina
• La sintetizan exclusivamente
los microorganismos.
• Cofactor en enzimas: C C
– Dioldeshidratasa
– Etanol amonio-liasa X H
– L-ß-lisina mutasa
– D--lisna mutasa
– Ornitina mutasa
– Glutamanto mutasa C C
– Metil CoA mutasa
– Ribonucleótido reductasa
–
H X
-metilenglutarato mutasa
 Producción comercial
Cobalamina
• 1948 de hígado
• Actualmente por fermentación
• Propionibacterium (19-23 mg/l)
• Pseudomonas dinitrificans (60 mg/l)
• Fuente de carbono molasas de remolacha y
suplementada con cobalto.
 Deficiencia de Cobalamina:
Anemia Perniciosa
• Personas mayores de 60 años; ocasionalmente en niños
• Antes de 1926 incurable y fatal
• Por absorción defectuosa de la vitamina
• Síntomas en vegetarianos estrictos
• Células rojas anormalmente grandes, inmaduras, frágiles y en bajo
número (1 a 3 millones/ml)
• Médula ósea: mitosis y replicación del DNA suspendidos
• Mucosa gástrica: suspendida la secreción de HCl
• SNC: desmielinización, ataxia y síntomas psicóticos
• Tratamiento: inyección intramuscular de 3 a 6 µgr de cobalamina y
dosis de mantenimiento de 1 mg
 Producción comercial
Riboflavina
• Cofactor FAD, FMN
• Sintetizada por muchos microorganismos:
bacterias, levaduras y hongos
• Ashbya gossypii : 7g/l
• La síntesis química esta alcanzando a la
microbiana
 Aminoácidos de uso industrial

Aminoácidos utilizados en la industria alimentaria

Producción aual
Aminoácido Usos Finalidad
en el mundo (Tm)
L-glutamato 370.000 Varios alimentos Reforzar el sabor, ablandador de la carne
L-aspartato y alanina 5.000 Zumos de frutas Enriquecer el sabor
Glicina 6.000 Alimentos edulcorados Mejora del sabor, Partida para síntesis orgánicas
L-cysteina 700 Pan Mejora calidad
Zumos Antioxidante
L-triptófano+L-histidina 400 Varios alimentos Antioxidante, evita enranciado; aditivo nutritivo
Leche en polvo
Aspartame 7.000 Bebidas refrescantes Edulcorante bajo en calorias
(a partir de
L-fenilalania+L-aspártico)
L-lisina 70.000 Pan (Japón). Aditivo nutritivo
Piensos Aditivo nutritivo
DL-Metionina 70.000 Productos de la soja y Aditivo nutritivo
Piensos. Aditivo nutritivo
 Producción de aminoácidos
• La mayoría de los aminoácidos pueden
fabricarse químicamente.
• La síntesis química da como resultado la
forma de mezclas ópticamente inactivas de
las formas D y L.
• La producción microbiológica puede ser por
fermentación directa, o por síntesis
enzimática.
 Producción de Lisina
• Brevibacterium flavium
• Regulada por retroalimentación
• Los mutantes desregulados producen hasta
60 gr/litro
Regulación de la síntesis de lisina por
retroalimentación
 Producción de Ácido Glutámico
• Corynebacterium glutamicum
• La biotina es un cofactor esencial en la biosínteis de
los ácidos grasos.
• Su deficiencia conduce a un daño en la membrana.
• Como consecuencia el ácido glutámico es secretado
al medio.
• El crecimiento del corynebacterium glutamicum:
– Medio de crecimiento con mucha biotina
– Medio deficiente en biotina provoca la excreción del
aminoácido.
Producción de compuestos orgánicos
• Ácido cítrico:
– Alimentos y bebidas
• Ácido itacónico:
– Resinas acrílicas
• Ácido glucónico:
– Tratamiento de deficiencias de calcio (gluconato cálcico)
– Agente de lavado y suavizante
• Sorbosa:
– Para la fabricación de ácido ascórbico
– Sorbosa ----(acetobacter)------>Sorbitol---->----> Vitamina C
• Giberlina:
– Hormona vegetal del crecimiento producida por hongos
• Dihidroxiacetona:
– Bronceador: Glicerol---(acetobacter)---->Dihidroxiacetona
• Dextrano:
– Prolonga la duración del plasma. Reactivo químico
• Ácido láctico:
– Alimentos, para acidificar alimentos y bebidas.
• Acetona y butanol:
– Antes por fermentación con Clostridium acetobutilicum, pero ahora se preparan por síntesis
química.
 Producción de ácido Cítrico
• Producido microbiológicamente por fermentación:
– Aspergillus niger
• La fermentación se realiza aeróbicamente.
• La condición fundamental pare tener un gran rendimiento es que le
medio sea deficiente en hierro.
• El ácido cítrico es superproducido como agente quelante para
apoderarse del hierro.
 Producción de ácido Cítrico
• Fuente de carbohidratos:
– Almidón de patata
– Hidrolizados de almidón
– Jarabe glucosa
– Jarabe o molasas de caña de azúcar
o remolacha azucarera

• La fermentación se realiza
aeróbicamente: procesos en
superficie o sumergidos. Fue la
primera fermentación aeróbica
industrial.
• El ácido cítrico se produce como
un típico metabolito secundario