3M Food Safety

3M™ Petrifilm™ Salmonella Express System

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Sistema 3M™ Petrifilm™ Salmonella Express

Descripción:

El Sistema 3M Petrifilm Salmonella Express es

usado para la rápida detección y confirmación
bioquímica de Salmonella en alimentos
enriquecidos & muestras de proceso ambiental
de alimentos.

Consiste de (empacados separadamente):

• 3M Base para Enriquecimiento de

Salmonella (SEB)
• 3M Suplemento para Enriquecimiento de
Salmonella (SESUP)
• Placa 3M Petrifilm Salmonella Express
• 3M Petrifilm Salmonella Express Disco
Confirmatorio

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Características – Ventajas –
Beneficios
Caracteristicas: Ventajas: Beneficios:
 Todo en un
sólo sistema.  Rapidez (44- 52 h).
 Sistema Integrado
 Resultados presuntivos
 Seguridad
y confirmados
“Bioquímicamente”
 Productividad.
 1 sólo enriquecimiento
para matrices de baja  Ahorro
carga.

 1 sola temperatura
41:5°C
3 ▪ Respaldo local 3M
.
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Características – Ventajas –
Beneficios
Características Ventajas: Beneficios:
 Reducen tiempo
en preparación de
 Placa: Agente  No es medios.
gelificante soluble en necesario
frío calentar ni  No requieren uso
fundir agares de baño de agua.
 Se hidrata  Reducen uso
sólo cuando autoclaves de y otros
sea necesario. equipos especiales.

 Fáciles de manejar

 Mayor vida útil

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.
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Características – Ventajas –
Beneficios
Características Ventajas: Beneficios:
 Colonias coloreadas  Fácil de leer colonias
puntiformes.
 Placa: Presencia de
 Identificación de
indicadores químicos  Diferenciación de
zonas de
acidificación presuntivos positivos.

 “Selectidad”

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.
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Características – Ventajas –
Beneficios
Características Ventajas: Beneficios:
 Capacidad para ver  Mayor predicción colonias
producción de gas. típicas
 Medios de Cultivo en
películas laminadas  Compactas  Requieren menor espacio en
incubación y almacenaje.
 Apilables
 Menor volumen de
desperdicio.
 Materiales ligeros y
seguros

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.
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Características – Ventajas –
Beneficios
Caracteristicas: Ventajas: Beneficios:
 Reproducibilidad

 Calidad Estandarizada  Garantía de

 Solo error del analista.
funcionamiento
estandarizado en
 Adecuadas para
mismo lote y entre
lotes. programas certificación
de proveedores y
HACCP.

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.
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Pirámide de Patógenos – Una elección en Tecnología.

3M™ Molecular
Detection System

3M™ Tecra
Visual
Immunoassay

3M™ Petrifilm™
Salmonella
Express System

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Clientes Objetivo:

• Evaluadores de Alimentos y muestras ambientales en Laboratorios de

Procesamiento de Alimentos, Universidades, Lab. De Gobierno, Lab. De Servicio y
Referencia.

• Que procesan matrices de: Carne molida cruda, Carne de Pollo molida ,
Carne molida cruda de cerdo, nuggets de pollo, Camarón, Alimentos para
mascotas, espinacas, huevo líquido pasteurizado y muestras ambientales

• Usuarios de AgarTradicional & Cromogénico

• Clientes cuyo proceso incluye confirmación

• Que envían a laboratorio externo y les gustaría hacer la confirmación en
su propio laboratorio.
• Que confirman en su laboratorio, pero quieren tiempos más rápidos para
resultados y menos costosos.

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Descripción del Método

 Dos Métodos: Alta carga microbiana (aerobic plate count
>104 UFC/g.) vs. Baja carga microbiana (aerobic plate count
<=104 UFC/g).

Ambos Métodos usan 3M Base para Enriquecimiento

de Salmonella (SEB) + 3M Suplemento para Enriquecimiento
de Salmonella (SESUP)

 Solo el método para Alta Carga usa R-V R10 como

enriquecimiento selectivo secundario

 Sencillo método de estriado

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 Sólo una temperatura de incubación de 41.5 ±
1°C
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Instrucciones de Uso – Resumen:

 Medio de Enriquecimiento:
 3M Base para el Enriquecimiento de Salmonella con 3M Suplemento para
Enriquecimiento de Salmonella
• Adicione el Suplemento al medio base atemperado

• Almacene el Suplemento refrigerado

En seco: 50 mg/litro de Base, ó
Hidratado: 2.5 mg/ml agua destilada/ 20 ml de hidratado/litro de
base

 Incubación para Enriqucimiento primario = 18-24 horas a 41.5 C  1

 Enriquecimiento secundario para alimentos alta carga = R-V [R10]; 0.1 mL en 10

mL por 8-24 hrs. a 41.5 C  1
 Hidration de la Placa:
• 2 mL de agua con tratamiento de Osmosis inversa, Agua destilada,
Diluyente Butterfield’s Phosphate
11  protegidas
1 hora para que
de la luz, estéhasta
durante firme el antes
8 horas gel de(cubierto,
su uso , si noprotegido
se usan: -20de
. °C la luz)°C: (20-25
y -10 un máximo de %
°C/<60 5 HR),
días.
 3M FFoooodd SSaaffeettyy

Cada box y
caja trae la
cartilla

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Transporte y Almacenamiento:

 3MTM PetrifilmTM Placa Salmonella Express :

 Transporte = cadena de frío
 Almacenaje = 2° a 8ºC
 Sobres abiertos = -20° to -10°C en funda sellada, protegidas de la
luz, (no más de 4 semanas).

 3MTM PetrifilmTM Disco de Confirmación para Salmonella

Express :
 Transporte = Refrigerado
 Almacenaje = 2° a 8ºC
 Sobres abiertos = Resellados a 20° a 25°C en lugar seco, <60% HR
(no más de 4 semanas).
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Transporte y Almacenamiento:

 3MTM Base para Enriquecimiento de Salmonella:

 Transporte = Temp. ambiente
 Almacenaje = 15 – 25°C por 1 año (deshidratado)
2 – 25°C protegido de la luz por 28 días (preparado)

 3MTM Suplemento para Enriquecimiento de Salmonella:

 Transporte = Temp. ambiente
 Almacenaje = 2° to 8ºC protegido de la luz por 1 año (deshidratado)
2° to 8ºC protegido de la luz por 5 meses
abierto)
(deshidratado
2° to 8ºC protegido de la luz por 15 días
(preparado)
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Transporte y Almacenamiento:

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Transporte y Almacenamiento
 3M R-V R10:
 Transporte = Temp. ambiente
 Almacenaje = Temp. ambiente para polvo deshidrtado, refrigerado para
preparado

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Instrucciones de Uso – Resumen::

 Inoculación:

• Aza de 10 uL (plastico estéril, nueva de metal, ó aza de metal lisa)

• Aza debe estar llena completamente del enriquecido para el estriado

• Simple estriado para el enriquecimiento

• Tiempo de incubación de la placa = 24 hrs  2 hrs.

• Temp de incubación = 41.5 C  1

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 33MM FFoooodd SSaaffeettyy

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Sistema 3M Petrifilm Salmonella Express - Procedimiento
Suplemento del Medio
Asépticamente pese la cantidad
apropiada de 3M Suplemento para
enriquecimiento de Salmonella
Procedimiento de Enriquecimiento
Mezcle u homogeinize la muestra
por el procedimiento actual
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Procedimiento de Enriquecimiento
Asépticamente adicione el 3M
Suplemento para enriquecimiento de
Salmonella a la cantidad apropiada
de 3M Base autoclavada para
Enriquecimiento de Salmonella
cont.
Incube las muestras
enriquecidas a 41.5°C +_1°C
por 18-24 horas..
Prepare la dilución del Alimento.
Pese o pipetee el alimento dentro
de un contenedor estéril tal como
una funda para homogeneizador ó
contenedor.
Para muestras de alta carga
solamente. Después de la
incubación de enriquecimiento ,
transfiera 0.1ml. a 10ml R-
VR10
Adicione la cantidad apropiada de 3M
Base para Enriquecimiento de
Salmonella más 3M Suplemento para
enriquecimiento de Salmonella a la
funda con muestra ó contenedor.
Incube el R-VR10 a 41.5°C
+_1°C por 8-24 horas..
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Sistema 3M Petrifilm Salmonella Express – Procedimiento cont.

Inoculación , Incubación e Interpretación

Para muestras de baja carga, use un Para muestras de alta carga, use Realice un simple estriado, desde
aza estéril de 10 ul(3mm diámetro) un aza estéril de 10 ul para retirar arriba de la placa hasta abajo de la
para retirar un azada completa de la un azada completa de la muestra placa, para obtener colonias
muestra. Use un aza lisa (que no para estriar la placa. aisladas
tenga bordes dentados y que no se
deforme) para prevenir se rompa la
superficie del gel

I
n
o
c
u
l
aBaje la parte superior del film para cerrar
la Placa 3M Petrifilm SALX. Usando
En el film superior de la Placa 3M
Petrifilm SALX, señale con círculos las
cguantes (siguiendo las buenas prácticas
de laboratorio para evitar contaminación
Incube las placas a 41.5 +_1°C por
24 +-2 horas en una posición
colonias aisladas presuntivas positivas
icruzada y/o contacto directo con la horizontal con el lado coloreado
de Salmonella usando un marcador
permanente, de punta ultra fina.
placa), suavemente aplique un arriba en pilas de no más de 20
ómovimiento de barrido con una presíón placas
Bioquímicamente confirme todos los
resultados presuntivos positivos
20 nuniforme sobre el film superior para
remover cualquier burbuja de aire en el
usando el Disco Confirmatorio 3M
Petrifilm SALX.
área de inoculación.

,
 3M Food Safety

Identificando Salmonella

Especies Presumtivas
positivas de Salmonella son:
Colonias rojas, rojas obscuras,
o colonias marrón con una
zona amarilla y/o asociada a
burbujas de gas.

El uso de un contador de colonias

(con retroiluminación) puede ayudar
a distinguir las burbujas de gas y
colores de colonias, pero tiende a
opacar las zonas amarillas
3M Petrifilm SALX Plate con morfologías de colonia mixta
Observación: (1) Colonias rojas aisladas con zona amarilla y asociada
a burbuja de gas (2) Colonias rojas aisladas con zona amarilla
solamente, (3) Colonias de azul a azul-verdozas de la flora de fondo.

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Presumptive Positives

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Sistema 3M Petrifilm Salmonella Express – Procedimiento cont.

Confirmación Bioquímica

Remueva un Disco Confirmatorio 3M
Petrifilm SALX individualmente
empacado de su bolsa y permita que
alcance temperatura de laboratorio. Pele
la envoltura para exponer la lengüeta del
disco, sujete la lengüeta y remueva el
disco.Levante el film superior (con las
colonias presuntivas de Salmonella ya
encerradas en círculos) de la Placa
Petrifilm SALX e inserte el disco
haciéndolo rodar sobre el gel para evitar
atrapar burbujas de aire. Cierre la placa.
Usando una mano con guante,
suavemente aplique un
movimiento de barrido con una
presíón uniforme sobre el film
superior para remover cualquier
burbuja de aire en el area de
inoculación y asegurar buen
contacto entre el gel y el Disco
Confirmatorio 3M Petrifilm SALX
Incube el Sistema Petrifilm SALX
(Placa y Disco) a 41.5 +_1°C por 4-
5 horas.
Remueva el Sistema Petrifilm
Salmonella Express de el
incubador y proceda con la lectura
de los resultados. Mire sólo las
colonias encerradas en círculos

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Confirmación Bioquímica

3M Petrifilm SALX Plate con morfologías de colonia mixta

Observación: (1) Colonias rojas aisladas con zona amarilla y asociada a burbuja de gas
(2) Colonias rojas aisladas con zona amarilla solamente, (3) Colonias de azul a azul-
verdozas de la flora de fondo.
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3M Petrifilm SALX Plate con Disco Confirmatorio 3M Petrifilm SALX Observación:
Colonias encerradas en círculos presuntivas positivas son azules a azul
obscuro/negro con precipitado después de la adición e incubación del 3M
Petrifilm SALX Disco Confirmatorio. Estas colonias en círculos son
Bioquímicamente confirmadas Positivas para Salmonella especies.
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© 3M 2007. All Rights Reserved.
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© 3M 2007. All Rights Reserved.
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3M Método SALX – aspectos claves:
Confirmación
Bioquímica
• DESPUÉS de hacer
círculos sobre las colonias
presuntivas positivas en el
film superior, inserte el
Disco Confirmatorio.
• Incube a 41.5C  1C
por 4 - 5 horas
• Mire SOLO las colonias en
CIRCULOS por el cambio
de color::
• Verde a azul,
• azul a azul obscuro; o
negro, o con un
precipitado azul.
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Atributo Clave
• Como el Disco STX el
empaque y manejo;
recubierto en ambos lados.
• ENFOQUE en colonias en
colonias encerradas en
círculo – minimiza
distracción
• Flora de fondo usa los
mismos indicadores en el
disco como la Salmonella y
se tornará el mismo color
como la Salmonella
bioquímicamente
confirmada
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Items a Considerar:
 Sistema SALX requirirá algun esfuerzo para la interpretación:
 Como en la Placa PF EB – busque zonas ácidas y/o burbujas de gas
 Como en la Placa PF STX – uso del disco de confirmación

 Sensibilidad >99%
 Especificidad 100%

 Siempre encerrar en círculos presumptivas positivas antes de aplicar el Disco!

 Es la confirmación bioquímica de SALX equivalente al metodo de referencia?

 El resultado de confirmación bioquímica del Método 3M Petrifilm Salmonella Express (Placa + Disco
de Confirmación) es estadísticamente equivalente a los resultados bioquímicos de los métodos de
referencia. (No quivalente a resultados serológicos O y H).

 No es un paso de confirmation para cualquier ensayo rápido, incluyendo 3M MDS

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Matrices de Alimentos fraccionados & Resultados Comparativos
Matriz del Alimento Petrifilm Salmonella Express Método de Referencia Método de Referencia ISO
Presumtivo/Confirmed (BAM or USDA) 6579
Presumtivo /Confirmado
Carne Picada 15/15 14/14 14/14
Cruda de Pollo
Huevo líquido 6/6 4/4 5/5
entero
Camarón Fresco 12/12 10/10
Congelado
Espinaca 11/11 10/10
Alimento seco para 16/16 14/14
perrros
Carne molida 13/13 13/13
cruda
Nuggets 6/6 6/6
congelados de
Pollo
Carne Cruda 9/9 9/9
Molida de Cerdo
Acero Inoccidable 7/7 6/6

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Aprobaciones del Método

AOAC PTM and OMA ISO 16140

Certificado 061301
3M está en búsqueda de aprobaciones de
métodos reconocidas globalmente.

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Recursos:

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Víctor Campos – Región

Andina vcampos1@mmm.com
593 987221521
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Muchas Gracias!!