UNIVERSIDAD NACIONAL

SANTIAGO ANTUNEZ DE MAYOLO

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA
SANITARIA
FENOLES

DOCENTE: Dr. Ing. Carlos Poma Villafuerte

 FENOL
• El fenol es una sustancia tanto manufacturada como
natural.  El fenol puro es un sólido incoloro a blanco.  El
producto comercial es un líquido.  El fenol tiene un olor
característico repugnantemente dulce y alquitranado.
• Se puede detectar el sabor y el olor del fenol a niveles
más bajos que los asociados con efectos adversos.  El
fenol se evapora más lentamente que el agua y es
moderadamente soluble en agua.
• El fenol se usa principalmente en la producción de resinas
fenólicas y en la manufactura de nylon y otras fibras
sintéticas.  También se usa en productos químicos para
matar bacterias y hongos en cieno, como desinfectante y
antiséptico y en preparaciones tales como enjuagadientes
y pastillas para el dolor de garganta.
• Los fenoles son compuestos aromáticos que se caracterizan por
tener uno o varios grupos hidroxilo unidos directamente al anillo
aromático. Por lo general, se nombran como derivados del miembro
más sencillo de la familia, el fenol.
• Sin embargo, en ocasiones esta nomenclatura se reduce a los
hidroxicompuestos y los metil fenoles reciben el nombre especial
de cresoles.
•  Esta definición incluye los fenoles di y trihídricos, los ácidos hidro
benzoicos, nitro fenoles, clorofenoles, amino fenoles, metoxifenoles,
fenoxifenoles, alquílenosle, derivados de núcleos aromáticos
condensados (naftoles) y algunos productos resultantes de la
degradación de los plaguicidas. Las propiedades de cada uno de
estos compuestos químicos dependen de la naturaleza de los grupos
sustituidos en el anillo bencénico (Train, 1979).
Del total de los compuestos fenólicos aproximadamente el 4% son
producidos naturalmente el 96% restante son de origen sintético
 ¿Qué le sucede al fenol cuando entra al medio
ambiente?

Luego de liberaciones únicas de cantidades pequeñas, el fenol

es removido del aire rápidamente (generalmente la mitad es
removida en menos de 1 día).

Generalmente permanece en el suelo sólo 2 a 5 días.

Puede permanecer en el agua durante 1 semana o más.
Liberaciones repetidas o de mayores cantidades pueden
permanecer en el aire, el agua o el suelo por períodos mucho
más prolongados.
El fenol no se acumula en peces u otros animales o en plantas.
 ¿Cómo ocurre la exposición al fenol?

Puede estar expuesto al fenol si vive cerca de vertederos o sitios de

desechos peligrosos que contienen fenol o cerca de plantas que lo
manufacturan.
Puede estar expuesto a niveles muy bajos de fenol en su hogar ya que
se encuentra en numerosos productos de consumo tales como
enjuagadientes y pastillas para el dolor de garganta.
También se puede exponer al fenol si se somete a un tratamiento
dérmico que utiliza fenol para remover lesiones de la piel o si recibe
inyecciones de fenol para tratar dolor crónico o espasticidad

Algunos alimentos tales como salchichas ahumadas, pollo frito y queso

de montaña y algunos pescados contienen niveles bajos de fenol.
Fumar o inhalar humo de cigarrillo de 2da mano lo expondrá al fenol.
El aire y el agua potable pueden tener niveles bajos de fenol.
 ¿Cómo puede afectar mi salud el fenol?

La mayor parte del fenol que se inhala o ingiere pasa a la

corriente sanguínea; cantidades más pequeñas pueden pasar a
la sangre si hay contacto con la piel.

La exposición breve al fenol en el aire puede causar irritación de

las vías respiratorias, dolor de cabeza y ardor en los ojos. 

El contacto de la piel con cantidades altas de fenol ha producido

quemaduras de la piel, daño del hígado, orina de color oscuro,
latido irregular del corazón y en algunos casos, la muerte.  La
ingestión de concentraciones altas de fenol ha producido
quemaduras internas y la muerte.  
•En animales, la inhalación de niveles altos de fenol produjo
irritación de los pulmones.  La exposición repetida produjo
temblores musculares e incoordinación.  La exposición a
niveles altos de fenol en el aire durante varias semanas
produjo parálisis y lesiones graves del corazón, el hígado, los
riñones y los pulmones y, en algunos casos, la muerte.
 
Algunos animales que tomaron agua con concentraciones
muy altas de fenol sufrieron temblores musculares e
incoordinación.

•El fenol puede tener efectos beneficiosos cuando se usa

como antiséptico o anestésico.
Qué posibilidades hay de que el fenol produzca cáncer?

La Agencia Internacional para la Investigación del Cáncer (IARC) y la EPA

han determinado que el fenol no es clasificable en cuanto a
carcinogenicidad en seres humanos.

¿Cómo puede el fenol afectar a los niños?

En niños que fueron tratados en un centro de envenenamiento

debido a ingestión accidental de fenol, los síntomas que se
observaron con más frecuencia fueron vómitos y letargo.  No se
sabe si los niños son más sensibles al fenol que los adultos.
El fenol ha causado defectos de nacimiento leves y bajo peso de
nacimiento en animales expuestos a niveles que generalmente
afectaron también a las madres durante la preñez.
¿Cómo pueden las familias reducir el riesgo de exposición al
fenol?
•Evitar el humo de tabaco, el cual contiene fenol, reducirá la
exposición al fenol.
•Siempre guarde los productos caseros y medicamentos que
contienen fenol en los envases rotulados originales fuera del
alcance de los niños.
¿Hay algún examen médico que demuestre que he estado
expuesto al fenol?
Se puede medir fenol en la sangre y la orina.  Una concentración
de fenol en la orina más alta que lo normal puede sugerir que ha
ocurrido exposición reciente al fenol o a sustancias que se
transforman en fenol en el cuerpo.
 La detección de fenol o sus metabolitos en la orina no puede
utilizarse para predecir el tipo de efectos que podrían ocurrir a
causa de la exposición.
 FENOLES EN AGUAS
Las fuentes más comunes de Fenol antropogénico en el agua natural
incluyen alquitrán de hulla y aguas residuales de industrias
manufactureras de resinas, plásticos, fibras, adhesivos, Fe, acero, Al,
caucho y efluentes de manufactura sintética de combustible.
Otros desechos de Fenol resultan del uso de productos comerciales
que contienen Fenol, incluyendo medicamentos, lociones,
desinfectantes y otros. Se han detectado contenidos de Fenol de 1
ppb en aguas subterráneas sin contaminar, y de 0.01 a 1 ppb en ríos
sin contaminar.
Los mayores niveles de Fenol se han encontrado en aguas que sirven
como depósito de aguas provenientes de actividad industrial y aguas
de uso sanitario. Teniendo en cuenta la alta solubilidad relativa del
Fenol en agua con respecto al aire, y su baja volatilidad a T°
ambiente, se espera que el Fenol se distribuya mayoritariamente en
el agua
El tiempo de vida media por biodegradación varía desde menos de 1 día en
muestras de agua de lagos, hasta 9 días en agua de estuario. Un tiempo
típico de vida media para foto-oxidación por radicales peroxilo producidos
fotoquímicamente, es de 19 horas. Los tiempos de vida medios de los
radicales Hidroxilo y peroxilo son, respectivamente, de 100 y 19.2 horas. Se
encontró que el Fenol se oxida en agua a CO2 en presencia de O2 y luz solar, a
una tasa de 11% cada 24 horas.
Además, el Fenol reacciona con iones NO3- en solución acuosa diluida, para
formar dihidroxiBencenos, nitroFenoles, nitrosoFenol, y nitroquinona,
presumiblemente mediante un mecanismo de radicales involucrando los
radicales Hidroxilo y peroxilo. El Fenol también reacciona con HNO 2 en aguas
residuales, formando CN-.
La biodegradación de Fenol en agua o suelo se puede retardar por la
presencia de concentraciones muy altas del mismo, por la presencia de otros
compuestos o por otros factores tales como la falta de nutrientes para los
microorganismos capaces de degradar Fenol. Si la biodegradación es lo
suficientemente lenta, el Fenol en agua iluminada por el sol puede sufrir una
foto-oxidación con radicales peroxilo producidos fotoquímicamente, y el
Fenol del suelo pasa al agua subterránea.
•Los fenoles son sustancias tóxicas frecuentemente
encontradas en los ambientes acuáticos como resultado de la
contaminación a partir de una gran variedad de fuentes
(industriales, biogeoquímicos, degradación de pesticidas, entre
otras) . La alta toxicidad de los compuestos fenólicos ha hecho
que la USEPA y la Comunidad Económica Europea, los
consideren como contaminantes prioritarios. En tal sentido, la
remoción de fenoles de las aguas residuales industriales tiene
gran importancia ambiental. 

•El tratamiento biológico ha sido utilizado eficientemente en la

depuración de aguas residuales que contienen compuestos
orgánicos peligrosos . Si bien los compuestos tóxicos como el
fenol contribuyen con la inestabilidad de los sistemas de
tratamientos biológicos de aguas residuales, estos compuestos
también son usados como fuentes de C y energía por ciertos
grupos de microorganismos . 
•La degradación de los compuestos fenólicos puede ser llevada
a cabo por organismos procariotas y eucariotas, tanto en
condiciones aeróbicas (O2 como aceptor final de electrones)
como anaeróbicas (nitrato, sulfato, iones metálicos o CO2 como
aceptores finales de electrones). En este sentido, algunos
investigadores han demostrado que cultivos de Pseudomonas
sp. y Spirillum sp., degradan fenol en ausencia de O2 libre.
También ha sido reportada la fermentación metanogénica de
fenol bajo estas condiciones de oxigenación . 

•Cultivos puros de Pseudomonas han mostrado crecimiento

sobre fenol, durante la reducción de nitratos (desnitrificación) . 
•Lovley et al. describieron la oxidación de fenol a CO2 por
Geobacter metallireducens mediante la reducción
desasimilatoria de Fe. Esta bacteria utiliza fenol como fuente de
C y Fe (III) como aceptor terminal de electrones. 
•También ha sido varias veces reportada la
transformación de fenol bajo condiciones de reducción
de sulfatos. Desulfobacterium phenolicum, por ej, oxida
el fenol a CO2 usando SO42- como aceptor final de
electrones.
•Karlsson et al., trabajando con medios de cultivos
enriquecidos y condiciones meso y termofílicas,
encontraron que las rutas de biodegradación de fenol
pueden diferir con respecto a la T° a la cual se realice el
proceso. 
•La degradación aeróbica microbiana de
pentaclorofenol, por ej, ha sido identificada en una
amplia variedad de ambientes que incluyen aguas
residuales industriales, lodos activados, suelos y
sedimentos acuáticos. 
•Entre las bacterias que tienen la habilidad de degradar
compuestos fenólicos bajo condiciones aeróbicas, se
encuentran: Flavobacterium sp., Rhodococcus
chlorophenolicus, Rhodococcus sp., Arthrobacter sp.,
Mycobacterium sp., Sphingomonas sp. y Pseudomonas sp.
Banerjee encontró que las especies mayormente responsables
de la biodegradación de fenoles fueron Pseudomonas stutzeri y
Pseudomonas putida, durante el tratamiento de aguas
residuales sintéticas en reactores biológicos rotatorios de
contacto (RBC). 

•En la parte occidental de Venezuela la generación de aguas de

producción petrolera sobrepasa los 305 mil barriles diarios.
Estas aguas presentan una concentración de fenol superior a
los límites permisibles de descarga a cuerpos de aguas
naturales. Esta situación hace imprescindible la evaluación de
alternativas efectivas para el tratamiento de las aguas de
producción, con la finalidad de reducir las concentraciones de
fenoles a los límites establecidos para su disposición final. 
 FENOLES EN AGUA POR DESTILACIÓN, EXTRACCIÓN CON
CLOROFORMO Y DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMETRÌA

Los fenoles son muy solubles en agua y se presentan como resultados de la

polución con residuos industriales; al aplicar Cl2 a dichas aguas, para su
desinfección, se forman clorofenoles y se presentan problemas de olores y
sabores indeseables a muy bajas concentraciones.
En concentraciones altas es muy tóxico. Causa irritación renal y hasta la muerte,
pero su ingestión es improbable por su sabor desagradable. Tóxico para los
peces. Muy usado como bactericida, pero es biodegradable.
El método se aplica en laboratorio para la matriz agua. Se emplea para el
intervalo de 0,01 a 0.4 mg/L. Es un método espectrofotométrico, en el que se
determinan los compuestos fenólicos.
Los compuestos fenólicos destilados reaccionan con 4-aminoantipirina a pH 10.0
± 0,1 en presencia de ferricianuro de potasio, formando un compuesto
coloreado de antipirina. Este tinte es extraído de la solución acuosa con
Cloroformo CHCl3 y la absorbancia es medida a 460 nm.
 ASPECTOS DE SALUD Y SEGURIDAD LABORAL

Utilice los implementos de seguridad: Blusa de laboratorio,

pantalón, zapatos antideslizantes, gafas de seguridad,
respirador, guantes de caucho. El fenol es un compuesto
con el cual debe trabajarse con extremo cuidado, por lo
tanto es necesario emplear los implementos mencionados
anteriormente.
 LIMITACIONES E INTERFERENCIAS
La mayoría de sustancias interferentes son eliminadas destilando los fenoles
de la muestra.
Las interferencias tales como bacterias descomponedoras de fenoles,
sustancias oxidantes o reductoras, y valores de pH alcalinos se eliminan por
acidificación con H3PO4. Los agentes oxidantes como Cl2 y aquellos detectables
por liberación de I2 en presencia de KI, se deben remover inmediatamente
después del muestreo añadiendo un exceso de FeSO4; si no se eliminan los
agentes oxidantes, los compuestos fenólicos se oxidan parcialmente. Si existen
compuestos azufrados se pueden eliminar acidificando a pH 4,0 con H 3PO4 y
aireando por agitación, con lo que se remueve la interferencia debida al H 2S y
el SO2. Los aceites y grasas se pueden eliminar ajustando el pH a 12-12,5 con
lentejas de NaOH, y haciendo una extracción de la solución acuosa con 50 mL
de cloroformo; se desecha la fase orgánica y se elimina el exceso de
cloroformo en el agua calentando en baño de vapor antes de iniciar el análisis
Todas las interferencias son eliminadas o reducidas al mínimo si la muestra es
preservada, almacenada y destilada.
 EFECTOS SISTÉMICOS
Los efectos sistémicos de la exposición al Fenol incluyen arritmias cardiacas, acidosis
metabólica, hiperventilación, afección respiratoria, fallo renal agudo, daño renal, orina
oscura, anemia por precipitación de glóbulos rojos, efectos neurológicos (incluidas
convulsiones), choque cardiovascular, coma y muerte.
1 Efectos Respiratorios. La exposición de ratas a 5 ppm de Fenol en aire durante 90 días
no produjo anormalidades en sus pulmones. La exposición suave a Fenol produce
irritación del tracto respiratorio. Con exposiciones más serias, se presenta inflamación y
ulceración de la tráquea, y acumulación de fluido en los pulmones. La ingestión de Fenol
puede conducir a la muerte por falla respiratoria
2 Efectos Cardiovasculares. La exposición al Fenol produce inicialmente una elevación
de la presión sanguínea, progresivamente una disminución severa en ella y finalmente
shock. La exposición dérmica produce también arritmia cardiaca. La inhalación de Fenol
se ha relacionado con enfermedad cardiovascular.
3 Efectos Gastrointestinales. Algunos síntomas comunes luego de la exposición
al Fenol por cualquier ruta, involucran al sistema gastrointestinal, ellos son:
nausea, vómito, dolor abdominal y diarrea. La ingestión de Fenol puede
también producir daños severos corrosivos a la boca, la garganta, el esófago, y
el estómago, con sangrado, perforación, formación de cicatrices y constricción
como secuelas potenciales.
Históricamente la exposición al Fenol tanto por inhalación como por contacto
con la piel, genera un desorden ocupacional que entre otros efectos produce
anorexia, conduciendo a la pérdida progresiva de peso y a la salivación
excesiva.
4 Efectos hematológicos. Los componentes de la sangre, y los órganos que se
ven involucrados en su producción, pueden ser dañados por el Fenol. La
mayoría de los cambios hematológicos (hemólisis, metemoglobinemia,
supresión de las funciones de la médula ósea y anemia) pueden ser detectados
por exámenes de sangre o por la apariencia de su color. La anemia por
precipitación de glóbulos rojos se da en infantes mayores a un año de edad. Los
niños son más vulnerables a la pérdida de actividad de la hemoglobina, debido
a su anemia natural relativa en comparación con los adultos.
5 Efectos musculares. La exposición a vapores y soluciones de Fenol
conlleva a dolor, espasmos y debilidad muscular, pero no se han
observado efectos permanentes sobre este tipo de tejidos por lo cual
se atribuyen estos síntomas a problemas neurológicos antes que
musculares. No se han realizado estudios acerca de los efectos de
ingestión de Fenol sobre los músculos.
6 Efectos Hepáticos. Luego de la exposición diaria crónica a Fenol, se
han observado lesiones en el hígado. Estudios hechos en conejillos de
indias demostraron deformación del lóbulo central (centrilobular) y
necrosis del hígado por exposición a vapores de Fenol.
7 Efectos Renales. En caso de envenenamiento crónico con Fenol por
inhalación o por contacto con la piel, se presenta orina oscura, que
perdura durante varios meses luego de la exposición al Fenol. Se han
reportado fallos renales bajo exposición aguda.
8 Efectos dérmicos. Cuando el Fenol se aplica directamente sobre la piel, se forma
una cobertura blanca de proteína precipitada, que se torna roja, y luego sana
dejando la superficie ligeramente café. Si el Fenol se deja sobre la piel, penetra
rápidamente y puede conducir a muerte de las células y gangrena. Si se expone a
contacto con Fenol un área de piel superior a 390 cm 2 , existe el riesgo de muerte
inminente. El Fenol tiene propiedades de anestésico local, por lo cual puede ocurrir
un daño extensivo antes de que se sienta dolor. La exposición repetida de la piel a
soluciones de Fenol puede producir dermatitis. Se han reportado casos en los que la
exposición a Fenol por inhalación ha conducido a pigmentación de los ojos, la nariz
y los pómulos.
9 Efectos Inmunológicos. No se reportan estudios en humanos acerca de los efectos
causados sobre el sistema inmunológico por la exposición oral a Fenol. Se ha
observado disminución de la concentración de células productoras de anticuerpos
en ratas sometidas a exposición oral, mediante soluciones de Fenol.
10 Efectos Endocrinos. No existen estudios acerca de los efectos causados sobre el
sistema endocrino por la exposición oral a Fenol.
11 Efectos Neurológicos. Se han hecho reportes de que la exposición aguda al Fenol
puede conducir a convulsiones, cuando la exposición ocurre a través de la piel o por
inhalación de vapores. En estudios hechos con ratas se ha observado la pérdida de
coordinación y la ocurrencia de espasmos musculares luego de la exposición a Fenol
mediante inhalación.
 INFORMACIÓN TOXICOLÓGICA
DL50 (oral, ratas): 300-600 mg/kg. DL50 (piel, ratas): 670 mg/kg. CL50 (inhalación, ratas): < 900
mg/m
1 CÁNCER.- A pesar de que se han realizado estudios sobre animales, que han demostrado
la posibilidad de generación de cáncer por exposición repetida a través de la piel, no existe
información acerca de la generación de cáncer en humanos a causa del contacto con Fenol,
aunque sí se reconoce como un promotor de tumores. En vista de ello, organismos de
vigilancia de la salud de la población en otros países no lo clasifican como cancerígeno por
si solo. De este modo, no se reporta dentro del listado de la IARC (Agencia Internacional
para la Investigación Sobre el Cáncer) para sustancias cancerígenas.
2 EFECTOS REPRODUCTIVOS Y DEL DESARROLLO. No existen estudios apropiados de la
toxicidad reproductiva del Fenol en humanos. Sin embargo, el Fenol ha sido identificado
como un tóxico para el desarrollo (estudios realizados sobre ratas y ratones). Estudios en
animales condujeron al nacimiento de crías con bajo peso y defectos de nacimiento
menores. Se ha identificado embriotoxicidad y fetotoxicidad del Fenol en animales, pero no
se observó teratoxicidad por exposición al Fenol.
3 EFECTOS GENOTOXICOS. La mayoría de los estudios de mutagénesis en bacterias, por
efecto del Fenol, han dado resultados negativos. Sin embargo, se han observado
mutaciones, daño de cromosomas y efectos sobre el ADN en células de mamíferos in-vitro.
 TOMA Y PRESERVACIÓN DE LA MUESTRA

Tome la muestra de tal manera que sea representativa

del vertimiento en estudio. Utilice frascos plásticos de
polipropileno de 500 mL de capacidad, como mínimo.
Los fenoles en las concentraciones usualmente
encontradas en aguas residuales están sujetos a
oxidación biológica y química, por lo cual se deben
preservar (pH menor a 4,0 con H2SO4) y almacenar las
muestras a 4°C o menos, salvo que se analicen en el
lapso de 4 horas desde la recolección. Efectúe el análisis
dentro de los 28 días siguientes a la toma de la muestra,
cuando ésta ha sido preservada.
 ANÁLISIS

Aparatos
•Balanza analítica de cuatro cifras decimales.
•Aparato de destilación: Compuesto por balón de destilación
para fenoles de 1L de capacidad con su respectivo condensador
Graham, ambos de vidrio de borosilicato, embudo de filtración
y balón aforado de 200 mL
•pH metro
•Espectrofotómetro (Hewlett Packard 8453) con longitud de
onda de trabajo de 460 nm.
•Celda de Vidrio de 1 cm de paso de luz
Reactivos
•Agua ultrapura grado 1
•H3PO4, 1: 9. Diluya 10 mL de ácido fosfórico del 85% a 100 mL con agua
ultrapura.
•NH4OH 0,5 N. Diluya 35 mL de NH4OH concentrado a 1000 mL con agua
ultrapura. Mantener refrigerado y preparar cantidades menores según el
número de muestras a procesar, ya que este se va deteriorando con el tiempo.
•Solución tampón de fosfato. Disuelva 104,5 g de K2HPO4 y 72,3 g de KH2PO4 en
agua ultrapura y diluya a 1000 mL. El pH debe ser aproximadamente 6,8.
Mantener refrigerada.
•Solución de 4-aminoantipirina. Disuelva 2,0 g de 4-aminoantipirina en agua y
diluya a 100 mL. Prepare diariamente. (La cantidad de reactivo puede variar de
acuerdo con el número de muestras a analizar, para evitar el malgasto del
mismo).
•Solución de ferricianuro de potasio, K3Fe(CN)6. Disuelva 8,0 g de K3Fe(CN)6 en
agua ultrapura y diluya a 100 mL. Filtre si es necesario y guarde en botella
oscura. Prepare semanalmente.
•Solución patrón de fenol. Disuelva 1,00 g de fenol en agua desionizada y diluya
a 1000 mL con agua ultrapura. Solución NaOH 6 M. Disuelva 240 g de Hidróxido
de sodio R.A. en agua ultrapura y diluya a 1000 mL. Cloroformo, CHCL 3.
Na2SO4.
Materiales
•Papel de filtro cualitativo, filtración rápida.
•Botellas de Polipropileno de 500 mL o 1 L.
•Balones de capacidad 1L para la destilación de fenoles.
•Condensadores tipo Graham.
•Microespátula metálica.
•Balones aforados de 100 mL, 250 mL y 1L Clase A.
•Balones aforados de 200 mL Clase A y/o Clase B.
•Pipetas graduadas de 10, 25 mL. Clase B.
•Pipetas aforadas de 1, 2, 3, 4, 5, 10, 20, 50, 100 mL Clase A
•Frasco lavador en polipropileno
•Probetas de vidrio de 50,100 y 250 mL
•Embudos de Separación de 500 mL.
•Vasos de 50 mL.
 PROCEDIMIENTO DE LIMPIEZA DE VIDRIERÍA:

Lave toda la vidriería con jabón alcalino, posteriormente déjelo

en H2SO4 al 10 % por 30 minutos y enjuague muy bien con agua
destilada. Reserve esta vidriería para la determinación de
Fenoles y utilice únicamente a la que se le haya efectuado el
control de calidad. Procedimiento de Lavado Material de
Vidrio. Enjuague con agua destilada los refrigerantes, lave los
balones de destilación con jabón biodegradable al 5 % en agua
ligeramente caliente (50°C), frote vigorosamente cada balón y
enjuague, cuando los balones están grasosos sumerja de un día
para otro en NaOH y enjuague muy bien.
 PROCEDIMIENTO DE PREPARACIÓN DE ESTÁNDARES
•Preparación de la solución patrón de Fenol: En un pesa
sustancias coloque 1,00 gramo de Fenol. Transfiéralos de forma
cuantitativa a un balón aforado de 1 litro, utilice agua ultrapura
para esta operación. La solución así obtenida tiene una
concentración de 1000 mg Fenol/L.
•Prepare una solución intermedia de 10,0 mg Fenol/L, a partir
de la solución de 1000 mg Fenol/L. Para esto tome una alícuota
de 5 mL de la solución patrón, transfiérala a un balón de 500
mL clase A y complete a volumen con agua ultrapura. Preparar
a diario.
•Prepare una solución estándar de 1,0 mg Fenol/L, a partir de la
solución de 10,0 mg Fenol/L. Para esto tome una alícuota de 10
mL de la solución intermedia de 10,0 mg Fenol/L, transfiérala a
un balón de 100 mL clase A y complete a volumen con agua
ultrapura. Preparar a diario.
 Destilación de la muestra.
Transfiera cuantitativamente la muestra al balón de destilación.

Destile hasta que se recojan aproximadamente 150 mL, apague

la unidad de calentamiento, deje enfriar aproximadamente 15
minutos y agregue al balón 50 mL más de agua. Destile hasta
que se recojan aproximadamente 200 mL en el balón aforado,
complete a volumen.

Filtre tanto muestras como patrones esto evita el arrastre de

grasa y otras impurezas del sistema al balón aforado de 200 mL.
Los estándares y controles tienen el mismo procedimiento que
las muestras.
 Desarrollo de color, extracción y determinación
espectrofotométrica.
Transfiera cuantitativamente los 200 mL obtenidos en la destilación a un embudo de
separación
Agregue 2,0 mL de NH4OH 0,5 N a cada muestra, solución patrón y blanco.
Ajuste el pH a 10.0 ± 0,1, adicionando solución buffer de fosfato (aproximadamente 3
gotas), el blanco sirve para determinar la cantidad de buffer que requiere. Verifique que el
pH se encuentre entre 9.9 – 10.1
Agregue 1 mL de la solución de 4-aminoantipirina y 1 mL de la solución de
Ferricianuro de potasio, agitando cada muestra tras la adición de cada reactivo.
Permita el desarrollo de color por 15 minutos.
Agregue 20 mL de Cloroformo a cada embudo, tape y agite vigorosamente unas cinco
veces, despresurizando el embudo. Deje en reposo para que se separen las dos
fases.
Filtre cada extracto de Cloroformo sobre papel filtro que contenga aproximadamente
un gramo de Na2SO4. Recoja el filtrado en vasos de 50 mL. No adicione mas cloroformo, ni
lave el papel filtro o los embudos con Cloroformo.
Mida la absorbancia de cada muestra en el espectrofotómetro a 460 nm con una
celda de vidrio de 1 cm de paso de luz.
 Los estándares y controles tienen el mismo procedimiento que
las muestras.

PROCESAMIENTO DE DATOS Y CÁLCULO DE RESULTADOS:

La concentración de fenoles es determinada directamente en el
espectrofotómetro, para lo cual es importante tener en cuenta el factor
de dilución para cada caso en particular. Reportar los resultados como
mg fenol/L
SECCIÓN DE CONTROL DE CALIDAD (CC) Y ASEGURAMIENTO DE
CALIDAD
En forma paralela, con cada grupo o lote de muestras, es necesario
procesar el mismo día, un estándar de 0,05 ó un estándar de 0.30 mg de
Fenol/L (correspondientes al 20 y al 80% del intervalo lineal) y un
blanco . Registre los resultados en la CARTA DE CONTROL del método.
El reporte impreso directamente por el equipo, debe ser entregado al
líder del grupo de análisis fisicoquímico.
GRACIAS