TRANSFERENCIA

DE EMBRIONES EN
LA RAZA CARORA

Aldemar Chávez Rodríguez

M.V.Z.
U.T.
.

PLANEACION DE T.E.

Selección de
Diseño de un
donadoras
programa de t.e.
y receptoras
.

 1954 PRIMER TERNERO NACIDO POR T.E.

 1979 PRIMERAS EXPERIENCIAS EN
VENEZUELA (ROMUALDO GONZALEZ)
 1980 VIABLE COMERCIALMENTE LA T.E.
 1982 COMERCIO INTERNACIONAL DE
EMBRIONES CONGELADOS
.
1- PROPOSITOS.
 COMERCIAL.
 GENETICO.
 ANIMALES EXPOSICION.
 CREAR REPRODUCTORES.
 MULTIPLICAR LAS HEMBRAS ELITE.
 MULTIPLICAR UNA RAZA PURA
 .
2- USOS T.E.
-COMERCIO DE GENETICA SUPERIOR.
-MULTIPLICAR ANIMALES FISICAMENTE IMPEDIDOS
-PRUEBAS DE PROGENIE.
-USOS PARA EL SEMEN DE ALTO COSTO.
-TRANSPORTE DE MATERIAL GENETICO.
-CONSERVAR MATERIAL GENETICO.
3 - LIMITACIONES T.E.
-COSTOS.
-TIEMPO Y CONSTANCIA EN LOS TRATAMIENTOS.
-RECEPTORAS DISPONIBLES.
-EL 20% DE LA RECEPTORAS NO SE PREÑA T.E.
-EL 20% DE LA DONADORAS NO PRODUCEN EMBRIONES.
-NO TODAS LAS VACAS SON BUENAS DONADORAS.
-PERSONAL CAPACITADO Y MOTIVADO.
-INSTALACIONES BASICAS.
- PROGRAMA NUTRICIONAL Y SANITARIO ADECUADO.
 .

HISTORIA REPRODUCTIVA EVALUACION REPRODUCTIVA

PROGRAMA SANITARIO PERMEABILIDAD CERVICAL
CICLOS REGULARES CUERNOS UTERINOS
>A 60 DIAS POST PARTO TAMAÑO OVARICO
INTERVALO ENTRE PARTOS
VAGINA ANORMALIDADES
CONDICION CORPORAL
NOVILLAS CTR > 3
BALANCE ENERGETICO
POSITIVO ULTRASONIDO
EDAD MAX 13-14 AñOS CUERPO LUTEO
NOVILLAS CICLANDO OVARIOS (FOLICULOS>10)
 .
 NOVILLAS  VACAS.
 CTR > 3 ANDERSON 88  CERVIZ.
 PESO > 320 KG  > 80 DIAS POST
 CICLANDO IDEAL PARTO.
 CRUCE LECHERO  C.C.
 BALANCE E +  CICLANDO .
 PELVIS AMPLIA  BALANCE E+.
 TEMPERAMENTO  PROGRAMA SANITARIO
 PROGRAMA  HABILIDAD MATERNA.
SANITARIO
 Anderson 88.
CONTROL DEL TRACTO REPRODUCTIVO NOVILLAS (CTR)

CALIFICATIVO CERVIS UTERO OVARIOS ESTRUCTURAS P4 IND.OVARICO

CTR Diámetro diámetro Tono long ancho grosor folículos Mm CL

Mm mm mm mm mm

1- Infantil <12 <10 - 12 8 6 - - - - 0.6

2- Inmaduro 12 12-15 - 15 10 8 F1 8 - - 1.2

3- En desarrollo 15-20 15 - 18 12 10 F1 8-10 - - 2.2

4 – Activo 20 18-20 + 24 14 12 F2 >10 +,- + 4.0

5- Cíclico >20 >25 ++ >25 16 12 F2 >12 + + >4.8

RECEPTORAS

Fuente :finca la tigra 2008

RECEPTORAS CEBUINAS

Finca el jobal 2000

ECOGRAFIA DEL CUERPO LUTEO

Fuente: Chávez 2008

CUERPO LUTEO

Fuente :Chávez 2000

.

Tratamientos
hormonales

Superovulación Sincronización
de donadoras de receptoras
 HORMONAS PARA
SUPEROVULAR BOVINOS
 FSHP - siux- folltropin –pluset
 FSHO - ovagen
 FSHB - bovina recombinante súper ova
 FSHE - equina recombinante
 PMSG - ecg- folligon – novormón- anti pmsg
 HMG - humana – pergovet.
PLUSET (2 X 500 u.i) FOLLTROPIN (400 mg)
 PLUSET FOLLTROPIN
 BOS TAUROS
 NOVILLAS 300 u.i-30% 200 mg -50%
 VACAS 500 u.i.-50% 300 mg -75%
 BOS INDICUS
 NOVILLAS 200u.i.-20% 120mg- 30%
 VACAS 300 U.I.-30% 180mg- 45%
Chávez 1996
 Superovulación FOLLTROPIN
70% 31dias.
 0 implante crestar + 2 ml inyectables
 8 retiro implante +2 ml preloban
 9-10 detectar celo + 2,5 ml de conceptal ev
 19 palpación del cuerpo lúteo
 20 6 am 3 ml de FOLLTROPIN VIA im
6 pm 3 ml de folltropin im
 21 6 am 2,5 ml de folltropin im
6 pm 2,5 ml de folltropin im
 22 6 am 1 ml folltropin + 7 ml lutalyse
6 pm 1 ml folltropin + 3 ml lutalyse
 23 6 am 0,5 ml de folltropin im
6 pm 0,5 ml de folltropin im
 24 6 am DETECTAR EL CELO
6 pm i.a. 12 HORAS
 25 6 am i.a. 24 HORAS
 31 am colecta y t.e.
 RESULTADOS FOLLTROPIN 70 %

 VACAS TRATADAS 12 Pro/vaca

 Estructuras colectadas 40 3.3
 Embriones viables 18 1,5
 Receptoras preñadas 10 0,83
 % Efectividad t.e. = 55,55%.
 COSTOS RESULTADOS
FOLLTROPIN 70 %
Costos estimados 12 donadoras (COSTO DONADORA/ 7 RECEPORAS 300 US)
CONCEPTO COSTO ESTIMADO
MATERIAL 12 DONADORAS Y 90 3.600 US
RECEPTORAS

COSTO TECNICO COLECTA 1.200 US

(100 US/DONADORA)

COSTO PREÑEZ CONFIRMADA 1.000 US

(100 US/RECEPTORA) X 10

COSTO TOTAL /PREÑEZ 580 US

CHAVEZ 1996
 Ondas Foliculares
Ovulación

LH

Prog.
FSH

Celo 5 10 21
 Sincronización de las ondas
foliculares 1995-2003,Bó

 Progestágenos y estrógenos
 P4 + 17β estradiol
 50-100mg p4 + 2,5 - 5mg 17β estradiol
 Nueva onda 4,3 días después
 P4+EB (benzoato estradiol)
 50-100mg p4 + 2,5 - 5 mg estradiol
 Nueva onda 3-4 días después
 Iniciar 4 días después con FSH
 Sincronización de las ondas
foliculares 1995-2003,Bó

 Progestágenos y estrógenos
 P4+ EV (valerato de estradiol)
 Crestar ( 3mg norgestomet +5mg EV)
 Nueva onda 4 a 6 días
 Iniciar FSH 5-6 días después
 P4 + ECP(cipionato de estradiol)
 50-100mg p4 + 2-4 mg ECP NO RECOMENDADO
Superovulaciòn pluset 60% -20 d.
-5 2 ml de pgf2 preloban 2 cc im
0 2 implantes crestar sin los 2 ml inyectables +5 mg 17β + 100 mg p4
4 6 am 2,5 ml de pluset im
6 pm 2,5ml de pluset im
5 6 am 2 ml de pluset im
6 pm 2 ml de pluset im
6 6 am 1 ml pluset + 7 ml lutalyse
6 pm 1 ml pluset + 3 ml lutalyse+ retiro implantes
7 6 am 0,5 ml de pluset im
6 pm 0,5 ml de pluset im
8 6 am i.a. + 3000 hcg (chorulon) ev
6 pm i.a.
9 6 am i.a.
15 am colecta y t.e.
RESULTADOS pluset 60 % finca Agrotadeo,
estado monagas

 VACAS TRATADAS 24 Pro/vaca

 Estructuras colectadas 104 4,3
 Embriones viables 50 2,08
 Receptoras preñadas 30 0,8
 % Efectividad t.e.= 60%.
 COSTOS RESULTADOS
PLUSET 60 %
Costos estimados 24 donadoras (COSTO DONADORA / 7 RECEPTORAS 300 US)
CONCEPTO COSTO ESTIMADO
MATERIAL 24 DONADORAS Y 180 7.200 US
RECEPTORAS

COSTO TECNICO COLECTA 2.400 US

(100 US/DONADORA)

COSTO PREÑEZ CONFIRMADA 3.000 US

(100 US/RECEPTORA) X 30

COSTO TOTAL /PREÑEZ 420 US

CHAVEZ 1998
FINCA LA TIGRA ESTADO MONAGAS

Fuente la tigra 2007

 HIPOTESIS

 LAS VACAS CARORA,ASI COMO LAS BOS INDICUS SON SENSIBLES

A LA FSH-P
 TRABAJOS CON RAZAS CRIOLLAS EN COLOMBIA MOSTRARON
ALTA SENSIBILIDAD A LA FSH-P. RAZAS BON Y CHINO
SANTANDEREANO
 LOS ESTROGENOS NO SINCRONIZAN BIEN LAS ONDAS
FOLICULARES EN RAZAS CRIOLLAS.
 REALIZAR TRABAJOS CON DOSIS BAJAS DE FSH-P
 UTILIZAR PROTOCOLOS NUEVOS P24-P36. (BARROS-NOGUEIRA-
BARUSELLI 2001-2005)
 USAR INDUCTORES DE OVULACION GNRH, LH, HCG. I.A. A TIEMPO
FIJO.
 Superovulaciòn FOLLTROPIN 50%
p24con i.a. tiempo fijo.
0 2 ml de preloban vía i.m.
8 aplicar un implante de crestar y una dosis inyectable (p4 norg-valerato de
e.)
13 6 am 2 ml de folltropin im
6 pm 2 ml de folltropin im
14 6 am 1,5 ml de folltropin im
6 pm 1 ,5ml de folltropin im
15 6 am 1 ml folltropin + 7 ml lutalyse
6 pm 1 ml folltropin + 3 ml lutalyse
16 6 am 0,5 ml de folltropin im retirar implantes
6 pm 0,5 ml de folltropin im
17 6 am i.a. + 5 cc de conceptal (3000 u.i. hcg)
6 pm i.a.
18 6 am i.a.
25 am colecta y t.e.
 RESULTADOS T.E. FINCA LA TIGRA
2006-2008

VACAS TRATADAS 66 Pro/vaca

 Vacas sin respuesta14
 Estructuras colectadas 682 10,33
 Infértiles (óvulos ) 302 4,57
 Embriones degenerados 82 1,24
 Embriones viables 275 4,16
 Receptoras preñadas 152 2,30
 % DE EFECTIVIDAD t.e. 55,27%
 COSTOS RESULTADOS LA
TIGRA
Costos estimados 66 donadoras ( COSTO DONADORA / 7 RECEPTORAS 300US)
CONCEPTO COSTO ESTIMADO
MATERIAL 66 DONADORAS Y 495 19.800 US
RECEPTORAS( MATERIAL DESECHABLE
APROBADO POR LA IETS)

COSTO TECNICO COLECTA 6.600 US

(100 US/DONADORA)

COSTO PREÑEZ CONFIRMADA 15.200 US

(100 US/RECEPTORA) X 152

COSTO TOTAL /PREÑEZ 273,68 US

CHAVEZ 2008
 COSTOS RESULTADOS LA
TIGRA
Costos estimados 66 donadoras ( COSTO DONADORA / 7 RECEPTORAS 200US)
CONCEPTO COSTO ESTIMADO
MATERIAL 66 DONADORAS Y 495 13.200US
RECEPTORAS (REUTILIZANDO MATERIAL
NO APROBADO POR LA IETS)

COSTO TECNICO COLECTA 6.600 US

(100 US/DONADORA)

COSTO PREÑEZ CONFIRMADA 15.200 US

(100 US/RECEPTORA) X 152

COSTO TOTAL /PREÑEZ 230 US

Costo material desechable 273,68 Diferencia 43,65/preñez CHAVEZ 2008
 RESULTADOS FINCA LA TIGRA
2006-2008
VACA emb transferidos recep/preñadas
 Vaca corona 31 18 (58,06%)
 Vaca luz maría 25 15 (60%)
 Vaca énfasis 19 13 (68,42%)
 Vaca Chepina 16 10 (62,5%)
 Vaca joya 33 15
(45,45%)
 RESULTADOS FINCA LA TIGRA
2006-2008
emb transferidos recep/preñadas
TORO (LAVADOS)
 SANTA CRUZ (6) 27 17 (62,96%)
 REY FEDERICO (7) 27 18 (66,67%)
 MORICHAL (9) 26 18 (69,23%)
 EL BERGON (8) 20 13 (65%)
 COMACATE (7) 24 12 (50%)
 CHAMBOTE (2) 14 10 (71,43%)
Sincronización receptoras
PGF2∞
- Una dosis un día antes PGF2 donadora
-dos dosis una cada 14 días.
GnRh
Día 0 100μg dia7 PGF2 dia8 día 9
100μg
2 ml conceptal 2ml preloban 2 ml conceptal
2ml conceptal 2 ml preloban 1mg EB celo
2ml conceptal+ CIDR-B 2ml preloban 1 mg EB celo
retiro CIDR-B
Sincronización receptoras
 Progestágenos
 CRESTAR- CIDR-B-PRID-DIB-TRIUB-CUE-MATE-MGA ETC.
 LOS IMPLANTES SE PUEDEN USAR A 7-8-9-10-11- DIAS-
 INICIO 2mg EB+ 50 mg P4
 AL RETIRAR PGF2 + ECG (PMSG)
 DETECTAR CELO.
 0-CRESTAR + 2 ML INYECTABLES
 9-RETIRO +PGF2 (2 ml PRELOBAN)+ 300 U.I. ECG (1,5mlFOLLIGON)
 10-11 DETECTAR CELO
 18 T.E.
SINCRONIZACIÓN RECEPTORAS
 TRANSFERENCIA DE EMBRIONES A TIEMPO FIJO
 DIA O CRESTAR+ 2 ml INYECTABLES
 DIA 8 RETIRAR IMPLANTE PM+300 UI eCG
+2cc preloban+0,5cc de ecp
 DIA 10 CELO
 DIA 17 T.E.
 NO REQUIERE DETECTAR CELO.

Tasa de utilizacion de receptoras > al 70 % n : 1000 animales tratados.

Material de colecta de embriones

Fuente :Chávez 2004

Medios de colecta y mantenimiento

Fuente Chávez 2004

Cajas de petri

Fuente Chávez 2004

Filtros de colecta

Fuente Chávez 2004

Sitio de trabajo de laboratorio

Finca el jobal 2000

Sitio ideal de trabajo de
laboratorio

Central genética madrigal 2008

SITIO DE TRABAJO

Finca la tigra 2007

Laboratorio móvil

Fuente Chávez , midates Francia 2003

Sitio de colecta ideal

Fuente Chávez , midates Francia 2003

Sitio de colecta Finca La Tigra

Fuente la tigra 2008

Ovarios superovulados día 7

Fuente Chávez 2000

Búsqueda de embriones

Fuente ganadería manzanares 2004

Grupo de embriones viables

Fuente Chávez 2007

Grupo de estructuras no viables

Fuente Chávez 2007

Selección de embriones

Fuente Chávez 2006

 Clasificación de embriones IETS
 Estado calidad
 1-UFO óvulos no fecundados 1- excelente
 2-2-12 células 2-regular
 3-mórula temprana 3-malo
 4-mórula 4-muerto o degenerado
 5-blastocisto temprano
 6-blastocisto
 7-blastocisto expandido
 8-blastocisto eclosionado
 9-blastocisto elongado (eclosionado expandido)
 Desarrollo embrionario
 Ovocito 150-190μm
 Día 1 ovulación fimbrias infundíbulo
 Día 2 2 células oviducto
 Día 3 4 células oviducto
 Día 4 8 células oviducto
 Día 5 16 células cuerno uterino
 Día 6 32-64 células mórula compacta
 Día 7 100-200 células blastocisto temprano
 Día 8 100-200 células blastocisto
 Día 8 100-200 células blastocisto expandido mayor diámetro
 Día 9 200-800 células blastocisto protruido
 Grados de calidad embrionaria
 Calidad tipo 1 excelente
 Desarrollo acorde a la colecta. blastómeros visibles, color y estructura uniformes
esferoide buena compactación y zona pelucida intacta
 calidad tipo 2 bueno
 Pocos blastomeros desprendidos de la masa celular, detritus celulares
 Forma irregular, poca compactación
 Calidad tipo 3 regular
 Color oscuro o muy claro, forma irregular, detritus celulares desarrollo retardado.
Zona pelucida agrietada.
 Calidad tipo 4 malo
 Degenerado, vacuolización de blastomeros, aspecto granuloso estados de 8 celulas
Clasificación de embriones

Fuente manual iets 2003

Empaque de embriones en pajuelas

Fuente Chávez 2007

Montaje en pistolas de t.e.

Fuente Chávez 2006

 Resultados de colecta de embriones finca la
tigra
de acuerdo al desarrollo y calidad del embrión

Clasificación Nro embriones Receptoras Receptoras %

embrión transferidos preñadas
vacías efectividad
4-1 138 76 62 55,07

4-2 42 25 17 59,52

4-3 9 5 4 55,56

5-1 60 31 29 51,67

5-2 25 15 10 60

totales 274 152 122 55,47

Chávez 2008
Cuerpo lúteo receptoras

Fuente Chávez 2000

Cuerpo lúteo ultrasonido

Fuente Chávez 2008

RECEPTORAS APTAS T.E.

Fuente finca la tigra 2008

 REQUISITOS DE RECEPTORAS
APTAS PARA T.E.

 1- haber presentado celo 6-8 días antes

 2- palpación de un c.l. claro y definido
 3- ultrasonido c.l. mayor a 15 mm
 4- aplicar 5 cc lidocaina al 2% epidural
 4- limpieza y desinfección de vulva
 5- transferir embrión de acuerdo a su desarrollo
 6- opcional aplicar 500 mg de flunixin meglumine
 7- progesterona 150 mg- o GnRh 2,5 ml(conceptal)
 8- llenar formato de lavado y transferencia de embrión
EMBRIONES FINCA LA TIGRA

Fuente finca la tigra 2007

EMBRIONES FINCA LA TIGRA

Fuente la tigra 2008

EMBRIONES FINCA LA TIGRA

Fuente la tigra 2008

 Conclusiones y Recomendaciones
 1- SELECCIONAR LAS DONADORAS DE ACUERDO AL TAMAÑO OVÁRICO
 2- PALPACION DE UN C.L. CLARO Y DEFINIDO PREVIO A TRATAMIENTOS
HORMONALES. UTILIZAR ULTRASONIDO.
 3- EVALUCION PREVIA DEL SEMEN A UTILIZAR
 4- PROGRAMA SANITARIO PREVIO A TRATAMIENTOS HORMONALES
 5-UTILIZAR ANIMAES CON EDADES NO SUPERIOR A 12 a 14 AÑOS.
 6-LLEVAR REGISTRO DE RESPUESTAS A LA SUPEROVULACION CON FSH-P
DE CADA DONADORA PARA AJUSTAR DOSIS .
 7-PROBAR PROTOCOLOS MIXTOS FOLLTROIPN –PLUSET, FOLLTROPIN -
ECG . PLUSET –ECG. Y dosis bajas de fshp del20 al 50% de dosis maximo.
 8-UTILIZAR LH y la hcg COMO INDUCTOR DE OVULACION, PARA MEJORAR
OVULACION. Y EVALUARLA.
 DEJAR EN DESCANSO LA DONADORA MÍNIMO 100 DÍAS DESPUÉS DEL
PARTO ANTES DE INICIAR LA SUPEROVULACIÓN
 EVALUAR LOS PROGRAMAS DE TE EN NUMERO DE PREñECES SOBRE
VACAS TRATADAS Y NO SOBRE PORCENTAJES DE PREñEZ
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cultivo celular , fertilización in vitro, transferencia de embriones ,congelación de semen 2008

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