Transferencia de embriones

TRANSFERENCIA DE
EMBRIONES EN BOVINOS

CESAR AUGUSTO GOMEZ VELASQUEZ

MEDICO VETERINARIO. Esp., Msc (c)
LECTURA SUGERIDA:

TRANSFERENCIA DE EMBRIONES EN
BOVINOS.
GORLÄCH.
 HISTORIA
Se implementó en Norte
América, por introducción
• 1970
de razas Europeas.
Tendencia a mejoramiento
• Uso
genético.
Mundo más de 100.000 vacas donadoras
• Actual superestimuladas, más de 500.000
embriones transferidos.
 TRANSPLANTE DE EMBRIONES COMO
TECNICA REPRODUCTIVA EN HATOS
GANADEROS

• TECNICA DE MULTIPLICACION DE GENETICA,

QUE PERMITE TRANSFERIR UN EMBRION DE
UNA HEMBRA DONANTE A UNA RECEPTORA
 VENTAJAS DE UN PROGRAMA DE T.E.
• INTENSIDAD SELECCIÓN DE HEMBRAS
• AUMENTO PROGRESO GENETICO (SHOW)
• AUMENTO EFICIENCIA DE NUCLEOS DE
PRODUCCION
• RAPIDA MULTIPLICACION DE RAZAS EXOTICAS
 VENTAJAS
• PRUEBA DE DESCENDENCIA DE VACAS
• ACORTAMIENTO INTERVALO GENERACIONAL
• ESTIMACION DEL EFECTO MATERNO
• IMPORTACION EXPORTACION MATERIAL
GENETICO
• CONGELACION MATERIAL GENETICO
Consideraciones Basicas

• Seleccion de Donantes:
Calidad Genetica.
• Seleccion de Receptoras:
Calidad Sanitaria. Leche.
• Sincronizacion de Donantes
y Receptoras.
• Procesos de T.E.
• Instalaciones.
PROGRAMA DE TRANSFERENCIA DE EMBRIONES

Actividades Donadoras

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 32 80

DETECCION CELOS

Actividades Receptoras
Cesar Gomez. 2005
Tel. 315-3077680
e-mail tecnobiologia@yahoo.es
 ACTIVIDADES DONANTES Y
RECEPTORAS
• SINCRONIZACION PARA LOGRAR CELO
REFERENCIA EN DONANTES Y COMENZAR
SUPEROVULACION CUANDO EMERGE LA
ONDA FOLICULAR.
• SINCRONIZACION DE LAS RECEPTORAS.
 RETIRAR IMPLANTE CRESTAR

CRESTAR IMPLANTE+BE
CELO REFERENCIA
CRESTAR IMPLANTE+BE

2 ML DE D-CLOPROSTENOL
RET
IMPLANTE+PGF2 ACTIVIDAD
@ DONANTES

Detectar celo IA T.E.

FSHp

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 2 2 2 2 2 2 2 2 2 2 3 3 4 4 6
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 0 1 2 5 0

CONFIRM. PRENEZ
RETIRAR IMPLANTE

DETECTAR CELOS
CLOPROSTENOL

DETECTAR CELOS
CRESTAR+BE
IMPLANTE

Cesar Gomez. 2006 ACTIVIDAD

Tel. 315-3077680
e-mail tecnobiologia@yahoo.es RECEPTORAS
LAVADO Y COLECTA DE EMBRIONES

RECEPTORAS F1

FOTOS: CESAR GOMEZ

DONANTE
BRAHMAN
ROJO FOTOS: CESAR GOMEZ
 Transferencia de embriones
Donadora Receptoras

Dia 0 Estro

° Sincronización del celo

Aplición única de PMSG
°
Dia 11 Superovulación
Dia 14 Luteólisis
(Prostaglandina F2 )
{ u 8 aplicaciones de FSH
mañana y tarde cada
12 horas
Dia 16 Estro
Dia 0 Inseminacion artificial
(2-3 inseminaciones con
intervalos de 8-12 horas)
°
Partos
°

°
Dia 7 Colección y transferencia
de los embriones
 Inflado

Balon de
catéter de
Catéter de
colecta
colecta No inflado

Cuerno uterino

Medio
Medio de
de colecta
colecta Vagina Cervix

Ovario Oviduto
con
cuerpos lúteos
(superovulación)
Embriones

Cuerno uterino
ESQUEMA DEL CIRCUITO CERRADOCON FLUJO CONTINUO
ADAPTADO DE ELSDEN

Cateter flexible
37°C

Entrada
de medio
(1° vía)

1 Metro
Válvula aire (2° vía)
inflable

Salida de medio
Cuerno uterino
Catéter (3° vía)
37°C
 Materiales para T.E.
• Sonda Foley
Filtro
Conductos de Lavado
Cajas de búsqueda
Sistema de 2 vías
LAVADO DE FILTROS
LAVADO DE FILTROS
PROCEDIMIENTO DE BÚSQUEDA DE LOS
EMBRIONES
1 2 3 4 5

E
 BUSQUEDA DE EMBRIONES
EQUIPO NECESARIO

PLACA DE PETRI GRILLADA

ESTEREOSCOPIO
 BUSQUEDA DE EMBRIONES

PIPETAS EPPENDORF MICROPIPETAS TRANSFEPETOR DE 5 µL

BUSQUEDA DE EMBRIONES

FOTOS: CESAR GOMEZ

FOTOS: CESAR GOMEZ

• Búsqueda Minuciosa

FOTOS: CESAR GOMEZ

 BUSQUEDA DE EMBRIONES

FOTOGRAFIAS DEL MISMO EMBRION CON DIFERENTE AUMENTO. LA DEL LADO IZQUIERDO FUE TOMADA
CON AUMENTO DE 0.8 Y LA DERECHA CON AUMENTO 6.
 CLASIFICACION DE ESTRUCTURAS
ENCONTRABLES (ESTADO DE DESARROLLO)
ESTADIO EDAD (DIAS) CODIGO IETS
OVULO FERTILIZADO 0–2
EMBRION DE 2 CELULAS 1–3
EMBRION DE 4 CELULAS 2–3
EMBRION DE 8 CELULAS 3–5
EMBRION DE 16 CEL. 4–5
MORULA TEMPRANA 5–6 3
MORULA COMPACTA 6–7 4
BLASTOCISTO TEMPRANO 7 - 7.5 5
BLASTOCITO INTERMEDIO 7.5 – 8 6
BLAST. TARDIO O EXPAND. 8 – 8.5 7
BLAST. ECLOSIONANDO 8.5 - 9 8
 Pró-núcleos
Zona
Pelúcida

Código 1:
1-célula
Células (dia 1)
Oócito
(dia 0-1) da granulosa

Código 2: Código 2: Código 3: Código 4: Código 5:

2-células 4-células Mórula inicial Mórula Blastocito inicial
(dia 2) (dia 3) (dia 5 - 6) (dia 6) (dia 7)

Código 6: Código 7:
Blastocisto Blastocisto Código 9:
(dia 7 - 8) Código 8:
expandido Blastocisto Blastocisto eclosionado/
(dia 8 - 9) eclosionado expandido
(dia 9) (dia 9 - 10)

Representacao esquemática de los estádios de desarrollo embrionário en bovinos, considerandose los

códigos recomendados por la IETS (1998)
Desarrollo Embrionario
• Embriones
Bovinos.
• Ejemplos de
estado de
desarrollo y
calidad
• Embriones y
Calidad
 ESTRUCTURAS ENCONTRABLES

Las fotos corresponden a un solo grupo de embriones encontrados de

clasificación 4-1. (estadio 4, calidad 1)
 ESTRUCTURAS ENCONTRABLES

Las estructuras señaladas con flecha corresponden a

embriones 4-2 (estadio 4, calidad 2).
 ESTRUCTURAS ENCONTRABLES

La flecha sencilla indica embriones 5-1

La flecha doble indica embriones 6-1
La flecha triple indica un embrión 4-1
 ESTRUCTURAS ENCONTRABLES

La flecha simple indica un embrión 4-2

La flecha doble indica un embrión 4-1
La flecha triple indica una estructura sin fertilizar (oocito sin fertilizar)
 ESTRUCTURAS ENCONTRABLES

Las fotos presentes pertenecen a un mismo grupo de embriones tomado con

diferentes tipos de iluminación. Las estructuras señaladas con flecha
pertenecen a clasificación 4-3, los demás son embriones degenerados.
 SELECCION DE ESTRUCTURAS

• Después de terminada la búsqueda en la placa de

petri grillada, todas las estructuras se depositan en
una placa de petri de 33mm con pbs + 10% SFB para
llevar luego a cabo la selección de las estructuras
buenas (embriones congelables) y descartar las
estructuras sin fertilizar y las degeneradas.
SELECCION DE ESTRUCUTURAS

La fotografía incluye estructuras buenas,

degeneradas y sin fertilizar
 LAVADO DE EMBRIONES

• Este se lleva a cabo en una placa de lavado de 12 wells en la

cual se depositan los embriones en 3 gotas de pbs sin calcio
(Ca) y sin magnesio (Mg), luego pasan por 2 gotas de tripsina
en la cual deben permanecer 45 segundos por gota y 5 gotas
de pbs + 10% de sfb teniendo en cuenta que cada gota es de
900 µl y estos medios deben estar temperados a 37 grados
centígrados.
 TEMPERADO DE MEDIOS

Platina de temperado de medios con

medidor de temperatura a 37 grados
centígrados.
TEMPERADO DE MEDIOS
 LAVADO DE EMBRIONES
TRIPSINA
(900µl por well)

PBS sin calcio y PBS con 10% de

sin magnesio Suero Fetal Bovino
(900µl por well) (900µl por well)

PLACA DE LAVADO DE 12 WELLS

LAVADO DE EMBRIONES