Desarrolle todo lo referente a la gran familia coronaviridae

FAMILIA CORONAVIRIDAE
Es una familia de virus ARN con envoltura, con más de doce patógenos específicos de
vertebrados. Se caracterizan en su forma por ser partículas pleomórficas de aproximadamente
100 nm de diámetro (rango entre 60 y 220) con proyecciones con forma de garrote en su
superficie; llevan un ARN de cadena sencilla (monocatenario) de sentido positivo de 27 a 31
kilobases; un cápside de proteína fosforilada unida con el genoma conformando un helix de
ribonucleoproteina; el extremo 5' lleva una caperuza y el 3' una cola poli(A). Se replican en el
citoplasma de células de vertebrados y se transmiten horizontalmente por ruta fecal oral.
Producen enfermedades respiratorias y gastrointestinales.

Características
Son viriones pleomórficos, redondeados en el caso de los coronavirus (60-220 nm), y en forma de rodillo, en el caso de los
torovirus (120-140 nm). En la envoltura se encuentran dos estructuras glicoproteícas virales S y M. La glicoproteína S es
ricamente glicosilada, de alto peso molecular y se ubica en la parte externa de la membrana de la envoltura y es responsable de
las proyecciones abultadas (peplómeros) que caracterizan a los coronaviridae, los cuales usan como ligandos en la fusión de
membrana. La glicoproteína M (proteína matricial) es una molécula transmembrana y se localiza en la parte interna de la
envoltura. Otra importante estructura proteica es la fosfoproteína N o proteína de la nucleocápside (N), difícil de discernir por
microscopía electrónica, con un peso molecular de 50 a 60 kDa,x|​ responsable de la simetría helicoidal de la cápside en cuyo
interior se aloja el ARN genómico (la cápside más el material genético vírico se denominan nucleocápside).
 Clasificación
Los Coronaviridae son una familia de virus, que
incluye las siguientes subfamilias y géneros:
 Subfamilia Orthocoronavirinae (Coronavirus)
 Género Alphacoronavirus
 Género Betacoronavirus
 Género Deltacoronavirus
 Género Gammacoronavirus
 Subfamilia Letovirinae
 Género Alphaletovirus
Patogénesis
Los coronavirus infectan a un amplio rango de mamíferos y
aves mundialmente. Aunque la mayoría de las enfermedades
no son graves, algunas veces causan severas situaciones
agudas en humanos, como por ejemplo la infección de vías
respiratorias: síndrome respiratorio agudo severo (SARS);
que pueden causar infecciones entéricas en bebés; y en raras
ocasiones síndrome neurológico.
El virus tiende a permanecer localizado en el tracto
respiratorio superior activando una pobre respuesta
inmunitaria, cuestionando incluso el papel de la
Inmunoglobulina A (IgA) de mucosas. Establecida la
inmunidad, persiste por pocos años, demostrando una alta
tasa de reinfección. Es probable que el surgimiento de nuevas
cepas sea debido a mutación o recombinación antigénica.
 PRUEBAS DE DIAGNÓSTICO PARA COVID-19

Las pruebas de diagnóstico de COVID-19 se realizan para saber si actualmente estás

infectado con el SARS-CoV-2, el virus que causa la enfermedad por coronavirus 2019
(COVID-19).

La Administración de Alimentos y Medicamentos de los Estados Unidos (FDA, por sus

siglas en inglés) aprobó estos tipos de pruebas para diagnosticar la COVID-19:

 PRUEBA DE REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA.

También conocida como prueba molecular, esta prueba de COVID-19 detecta el material genético del virus mediante una
técnica de laboratorio llamada reacción en cadena de la polimerasa. Se recolecta una muestra de líquido insertando un hisopo
largo (muestra nasofaríngea) en la fosa nasal y extrayendo líquido de la parte posterior de la nariz o usando un hisopo más corto
(muestra del cornete medio) para obtener una muestra.

En algunos casos, se inserta un hisopo largo en la parte posterior de la garganta (muestra bucofaríngea) o puedes escupir en un
tubo para producir una muestra de saliva. Los resultados pueden estar listos en minutos si se analizan de forma interna, o unos
días si se envían a un laboratorio externo, o quizás más tiempo en lugares donde haya demoras en el procesamiento de los
análisis. Las pruebas de reacción en cadena de la polimerasa son muy exactas cuando las realiza de manera adecuada un
profesional de atención médica, pero la prueba rápida puede no detectar algunos casos.
 PRUEBA DE REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA.

También conocida como prueba molecular, esta prueba de COVID-19 detecta el material genético del virus mediante una
técnica de laboratorio llamada reacción en cadena de la polimerasa. Se recolecta una muestra de líquido insertando un hisopo
largo (muestra nasofaríngea) en la fosa nasal y extrayendo líquido de la parte posterior de la nariz o usando un hisopo más corto
(muestra del cornete medio) para obtener una muestra.

En algunos casos, se inserta un hisopo largo en la parte posterior de la garganta (muestra bucofaríngea) o puedes escupir en un
tubo para producir una muestra de saliva. Los resultados pueden estar listos en minutos si se analizan de forma interna, o unos
días si se envían a un laboratorio externo, o quizás más tiempo en lugares donde haya demoras en el procesamiento de los
análisis. Las pruebas de reacción en cadena de la polimerasa son muy exactas cuando las realiza de manera adecuada un
profesional de atención médica, pero la prueba rápida puede no detectar algunos casos.
Describa los medios de cultivo para aislar virus
Existen cuatro métodos de laboratorio fundamentales para el diagnóstico de las enfermedades víricas:
cultivo

 detección de antígenos
 detección del ácido nucleico
 detección de anticuerpos

Cultivos víricos
Los virus necesitan células vivas para replicarse. Muchos virus se replican de forma activa en cultivos celulares.
Los sistemas de cultivo celular son monocapas de células vivas que sostienen el crecimiento de los virus. La
replicación del virus se detecta mediante el efecto citopático que son alteraciones morfológicas visibles
características en una línea susceptible debido a la replicación del virus.
Existen tres sistemas celulares generales:

 primarios
 diploides
 continuos
Líneas celulares primarias: son las que proceden
directamente de tejidos animales o humanos y se preparan
troceando el tejido y tratándolo con tripsina.
Líneas celulares diploides: Son aquellas que
mantienen la infección vírica hasta de 20 a 50
pasadas y proceden de células fetales o de recién
nacidos. Un ejemplo son los fibroblastos humanos
diploides.
Líneas celulares continuas: Son las que proceden Detección de antígenos víricos: Los antígenos del virus
de cánceres humanos o animales o son células pueden detectarse mediante métodos inmunológicos con
transformadas in vitro. Así, estas líneas celulares anticuerpos fluorescentes (inmunofluorescencia directa) o con
continuas tienen un cariotipo heteroploide y pueden sub métodos de inmunoanálisis. Los métodos de
cultivarse de forma indefinida sin que se pierda la inmunofluorescencia directa implica bastante trabajo y la
sensibilidad a la infección por el virus. Las más interpretación de los resultados es subjetiva. Los métodos de
utilizadas son la HeLa y la HEp-2. inmunoanálisis son más objetivos.
Detección del ácido nucleico: Los métodos moleculares permiten detectar el ácido nucleico del virus. La hibridación in situ
permite detectar por medio de sondas marcadas con fluorescencia virus como el del papiloma, el citomegalovirus y los virus del
herpes.
Las técnicas de amplificación de ácidos nucleicos como la PCR o la bADN se emplean para el seguimiento del VIH y del virus
de la hepatitis C. El uso de los métodos moleculares se ha potenciado con la PCR en tiempo real.
Detección de anticuerpos:

Las medidas de los anticuerpos

frente a los virus tienen dos
aplicaciones fundamentales:

 Diagnosticar la infección reciente

y determinar la inmunidad.

 Demostrar la infección actual o

reciente requiere la detección en
el suero de IgM específica del
virus
TÉCNICAS DIAGNÓSTICAS:
Defina que CRISPR Cas y diga cual es su importancia en Biotecnología. Describa el trabajo de Los Ganadores del Premio Nobel
en Química .

CRISPR Cas:

 Instrumento de laboratorio que se usa para cambiar o "editar" piezas del ADN de una célula. CRISPR-Cas9 utiliza una
molécula de ARN con un diseño especial para guiar una enzima, que se llama Cas9, hacia una secuencia particular del ADN.

 Apodada 'tijeras genéticas' y 'corta-pega genético', CRISPR es una herramienta sencilla y barata que permite cortar y pegar
ADN, cortar un gen que causa una enfermedad y cambiarlo por otro que no provoque ese problema.

 Se basa en el mecanismo natural que emplean las bacterias para defenderse de los virus.

Importancia en Biotecnología:

 La tecnología del sistema CRISPR/Cas puede ser una gran herramienta en

el desarrollo de terapias biotecnológicas, su capacidad para realizar
correcciones a nivel genético, generar deleciones y regular la
transcripción o traducción puede emplearse para abordar una serie de
enfermedades a distintos niveles.
Premio Nobel en Química 2020 por el descubrimiento de las tijeras genéticas CRISPR/Cas9.

En 2012, Jennifer Doudna y Emmanuelle Charpentier publicaron en la revista

Science un artículo que dio la vuelta al mundo, titulado "A programmable dual-
RNA-guided DNA endonuclease in adaptive bacterial immunity". En él plantean la
utilización de una suerte de ‘tijeras moleculares’ capaces de cortar, pegar y editar el
ADN. Aquella tecnología tuvo un impacto revolucionario en el mundo de la
medicina, pues permitían, entre otras cosas, desarrollar terapias contra el cáncer, e
incluso soñar con la posibilidad de curar definitivamente enfermedades hereditarias.

El descubrimiento de estas tijeras genéticas se dio casi por casualidad. Durante los estudios de Emmanuelle Charpentier sobre la
bacteria Streptococcus pyogenes, un patógeno que a los humanos puede causar un gran abanico de enfermedades, como faringitis,
otitis o mastitis, descubrió una molécula previamente desconocida llamada ARNtracr. Su trabajo mostró que el ARNtracr es parte
del antiguo sistema inmunológico de las bacterias, CRISPR / Cas, que confería resistencia a patógenos externos, como los virus.
Charpentier publicó su descubrimiento en 2011 y ese mismo año, inició una colaboración con Jennifer Doudna, una bioquímica
experimentada con grandes conocimientos en ARN. Juntas consiguieron recrear las tijeras genéticas de las bacterias en un tubo de
ensayo y simplificaron los componentes moleculares de las tijeras para que pudieran utilizarse con facilidad.
Ambas realizaron después un experimento de gran impacto en la comunidad científica: reprogramaron las tijeras genéticas para
que estas pudieran usarse en cualquier organismos. En su forma natural, las tijeras reconocen el ADN de los virus, pero
Charpentier y Doudna demostraron que podían controlarse para "cortar" cualquier molécula de ADN en un punto determinado, lo
que permite modificar el código genético de cualquier ser vivo, incluido el de nuestra especie.
Defina que es EC (Efecto citopático).
Esquematícelos.

EFECTO CITOPÁTICO

 Se denomina efecto citopático a los cambios bioquímicos y moleculares, morfológicos y de viabilidad

celular, visibles a microscopía óptica, causados durante el ciclo de replicación viral.

 A lo largo del ciclo viral intracelular, desde que un virus reconoce a una célula y penetra en su interior hasta
la lisis o muerte celular, prácticamente todos los componentes y orgánulos celulares sufren alteraciones
drásticas a nivel molecular, muchas de las cuales tienen manifestación morfológica.

 La mayor parte de las observaciones del (EC) se han realizado en células infectadas en cultivo, en las que se
aprecia: pérdida de adherencia al sustrato, inhibición por contacto, agregación celular, redondeamiento
celular, formación de sincitios, cuerpos de inclusión citosólicos, transformación celular, lisis, etc.
 ¿CUÁLES SON LOS EFECTOS CITOPÁTICOS VIRALES?

Los efectos citopáticos virales son los cambios que tienen lugar en una célula después de haber sido infectada por un virus. Estos
cambios solo se pueden ver después de examinar el tejido con un microscopio. Estos cambios pueden involucrar la forma y el
tamaño de la celda. También pueden involucrar una parte de la célula llamada núcleo. El núcleo contiene la mayor parte del
material genético dentro de una célula.

Los cambios que se pueden ver bajo el microscopio incluyen:

 Inclusiones - Estos son pequeños puntos u orificios dentro de la célula o el núcleo de la célula. Las inclusiones pueden verse
claras o pueden tener un color rosa.

 Membrana nuclear irregular - El núcleo está rodeado por una cápsula delgada llamada membrana nuclear. Normalmente la
membrana es lisa pero, en una célula infectada por un virus, puede arrugarse.

 Cambios de cromatina - El material genético dentro del núcleo se llama cromatina. Después de que una célula se infecta con
un virus, la cromatina puede comenzar a verse más oscura de lo normal o puede moverse a la membrana nuclear.

 Células multinucleadas - La mayoría de las células tienen un solo núcleo. Las células infectadas por un virus pueden estar
tan juntas que se convierten en una sola célula grande. Esta gran célula tendrá más de un núcleo. Los patólogos llaman a esto
una célula multinucleada.
Esquematice un SARS COV 2 su mecanismos de infección celular

MECANISMO DE INFECCIÓN Y ENTRADA A LAS CÉLULAS

DEL ORGANISMO
 Adsorción.

 Penetración.

 Decapsidación.

 Síntesis y replicación.

 Ensamblamiento.

 Liberación.
Adsorción. El virus se une a la célula hospedadora e introduce su material genético. Cada virus es muy específico
y únicamente infectan a un determinado tipo de células. En el caso del SARS-CoV-2 se una a la proteína ECA-2,
que está presente en diversos tejidos del cuerpo humano, particularmente en la mucosa oral, considerada la
principal vía de entrada a nuestro organismo.
Penetración. La membrana de estos virus es de la misma naturaleza que la membrana celular, por lo que puede
ocurrir una fusión de membranas, y entra sólo la cápside. O, puede entrar por endocitosis, y la envuelta del virus se
fusiona con el lisosoma.
Decapsidación. El material genético queda libre en el citoplasma a través de diferentes encimas que degradan las
proteínas víricas.
Síntesis y replicación. En el SARS-CoV-2, al ser un virus con ARN, esta fase ocurre en el citoplasma. El virus
utiliza la maquinaria celular para su replicación (creación de copias) del ARN y para la síntesis de las 4 proteínas
que ya hemos comentado.
Ensamblamiento. En este momento, la célula está llena de copias de ARN del virus y de proteínas flotando en el
citoplasma. Por diferentes mecanismos, estas proteínas se van uniendo dejando en su interior una copia del ARN
viral.
Liberación. A través de mecanismos de exocitosis, lo que les facilita rodearse de membrana. Es decir, la
membrana del los virus con envuelta viene de la membrana celular a la que han infectado.
Bibliografía:

 Pruebas de diagnóstico para COVID-19. (n.d.). Mayoclinic.Org. Retrieved November 14, 2021, from https://www.mayoclinic.org/es-es/tests-
procedures/covid-19-diagnostic-test/about/pac-20488900
 Cordova, D. G., Flores, E. N., García, R. R., & Salvador, J. C. R. (n.d.). INFOGRAFÍA: Pruebas para detectar al Coronavirus SARS-CoV-2.
Unam.Mx. Retrieved November 14, 2021, from http://ciencia.unam.mx/contenido/infografia/125/infografia-ventajas-y-desventajas-de-la-
pruebas-para-detectar-coronavirus-sars-cov-2
 Salomón, L., Benasayag, S., & Prodavinci. (2020, August 30). Epidemia a ciegas: ¿Cómo ha fallado el diagnóstico de covid-19 en Venezuela?
Prodavinci.Com. http://factor.prodavinci.com/EpidemiaACiegasEnVenezuela/index.html
 CRISPR/Cas9: las serias advertencias de unos científicos sobre los peligros de la técnica que revolucionó la genética. (2018, July 17). BBC.
https://www.bbc.com/mundo/noticias-44861150
 (N.d.). Uba.Ar. Retrieved November 14, 2021, from https://www.fmed.uba.ar/sites/default/files/2019-04/SEMINARIO%2012.pdf
 Diccionario de cáncer del NCI. (2011, February 2). Cancer.Gov. https://www.cancer.gov/espanol/publicaciones/diccionarios/diccionario-
cancer/def/crispr-cas9
 Coronavirus SARS-CoV-2: estructura, mecanismo de infección y células afectadas. (2021, 5 septiembre). Genotipo.
 Efectos citopáticos virales. (2020, January 3). Mypathologyreport.ca. https://www.mypathologyreport.ca/es/viral-cytopathic-effects/
 Redacción. (2020, October 7). Todo lo que necesitas saber sobre la técnica de edición genética CRISPR. La Vanguardia.
https://www.lavanguardia.com/ciencia/20201007/483917410374/guia-basica-crispr-premio-nobel-quimica.htm
 NCBI - WWW Error Blocked Diagnostic. (s. f.). ncbi. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7151762/
 LABORATORIO DE VIROLOGÍA EN LA PRÁCTICA CLÍNICA. (2015, 1 noviembre). ScienceDirect.
https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0716864015001509
 González de Buitrago, J. M. (2010). Técnicas virológicas y virología clínica. In Técnicas y Métodos de Laboratorio Clínico (pp. 501–510).
Elsevier.