TECNICAS MODERNAS

DE
FRACCIONAMIENTO
DE LA SANGRE
 Datos históricos
Transfusión directa

1795- Transfusión hombre a hombre 1667-Transfusión animal a hombre

1908 Anastomosis
arterial-venosa
• 1835 Bischoff propone la desfibrinación.

• 1850 Brown-Sequard experimentaron con la

desfibrinación agitando la sangre, removiendo el
coagulo y transfundiendo el el fluido restante.

• 1860 Neudorfer recomienda el bicarbonato de sodio

como anticoagulante.

• 1913- Aparato de Kimpton-Brown, tubo cubierto de

parafina, con dispositivo de succión.
• 1914 – 1918 Primera Guerra Mundial

• 1915 R. Lewisohn usa citrato como anticoagulante

transformando la transfusión directa a indirecta.
Weil nota que la sangre citratada podía ser
guardada en refrigeración varios días.

• 1916 Francis Rous y J.R. Turner introducen una

solución de citrato-glucosa que permite almacenar
sangre varios días después de la colección.
Gracias este descubrimiento se establece el primer
depósito de sangre Británico durante la Primera
Guerra Mundial. Oswald Robertson es acreditado
como el creador de los depósitos de sangre.
• 1932 Se establece el primer Banco de Sangre en un
Hospital de Leningrado. (transfusión cadavérica)

• 1937 Bernard Fantus, crea funda el primer banco de

sangre en Estados Unidos, con capacidad para
preservar y almacenar sangre de donador.

• 1939 Inicia la Segunda Guerra Mundial.

• 1940 Edwin Cohn, desarrolla el fraccionamiento con

etanol frío, para separar el plasma en sus
componentes y productos; albúmina, gamma-
globulina y fibrinógeno y son dispuestos para uso
clínico. La eficacia de la albúmina en transfusiones
es demostrada por John Elliott.
• 1940 El gobierno de Estados Unidos establece el
programa nacional para la recolección de sangre.
Charles R. Drew desarrolla el programa “Plasma
para Bretaña”, participa la cruz roja, se recolectaron
13 millones de unidades al final de la “Segunda
Guerra Mundial”

• 1941 Isodor Ravdin, da tratamiento con la albúmina

de Cohn a victimas en shock durante el ataque a
Pearl Harbor.

• 1943 J.F. Loutit y Patrick L. Mollison introducen la

solución de citratro ácido dextrosa (ACD),
reduciendo el volumen de anticoagulante, y
permitiendo la transfusión de grandes volúmenes de
sangre. El tiempo de almacenamiento se prolonga.
• 1950 Carl Walter y W.P. Murphy, Jr., introducen las
bolsas de plástico, mas seguras que los frascos de
vidrio. Se inicia la preparación de múltiples
componentes a partir un solo donador.
El desarrollo de la centrífuga refrigerada en 1953
facilita la Terapia de componentes.

• 1961 Se reconoce que los concentrados de

plaquetas reducen la mortalidad por hemorragia en
pacientes con cáncer.

• 1962 Se obtiene por fraccionamiento el primer

concentrado de factor antihemofílico por
fraccionamiento.
• 1964 Introducción de la Plasmaféresis para
recolectar plasma para su fraccionamiento por
destilación, cristalización, y otros procesos.

• 1965 Judith G. Pool y Angela E. Shannon reportan

un método para producir crioprecipitados para el
tratamiento de la hemofilia.

• 1969 S. Murphy y F. Gardner demuestran la

posibilidad de almacenar las plaquetas a
temperatura ambiente.

• 1972 La aféresis es usada para extraer un

componente celular, regresando el resto de la
sangre al donador.
• 1979 Se introduce un nuevo anticoagulante
preservador el CPDA-1, que extiende la vida
media de la sangre completa y los concentrados
de eritrocitos a 35 días.

• 1980 Al comienzo de la década de los 80’s con los

avances de la terapia de componentes inicia la
era de la Medicina Transfusional

• 1983 Surgen soluciones aditivas que extienden la

vida media del eritrocito preservado a 42 días.
 Avances en la preparación de
componentes sanguíneos

• Anticoagulación
• Preservación
• Obtención de plasma a partir de sangre
completa
• Obtención de componentes sanguíneos y su
aplicación en la Hemoterapia selectiva o
Terapia de componentes
 Avances en la preparación de
componentes sanguíneos

• Almacenamiento
• Automatización
• Mejoras en la calidad de los componentes
sanguíneos:
- Técnicas de leucorreducción
- Inactivación de microorganismos
Proceso mediante el cual se
separa la sangre
completa en sus partes
componentes.
 Componentes de la sangre:
Fracciones separadas de una unidad de
sangre, u obtenidas por aféresis.
• Concentrado de • Plasma envejecido
eritrocitos. • Plasma desprovisto de
• Concentrado de eritrocitos crioprecipitado
pobre en leucocitos. • Plasma fresco
• Concentrado de eritrocitos • Plasma fresco congelado
lavados • Crioprecipitado
• Concentrado de eritrocitos • Plasmaféresis
congelados
• Plaquetaféresis
• Concentrado de leucocitos
• Leucoféresis
• Concentrado de plaquetas

NOM-003-SSA2-1993
Principios de separación de la
sangre
El gradiente de sedimentación de las células de la
sangre está determinado por
• tamaño
• diferencias entre las células y el fluido en que
las rodea.
• viscosidad del medio
• flexibilidad de las células dependientes de la
temperatura.
Densidad
Elemento
media (g/ml)
Plasma 1.026
La temperatura óptima
Plaquetas 1.058
con respecto a esos Monocitos 1.062
factores es de 20ºC o mayor. Linfocitos 1.070
Neutrofilos 1.082
eritrocitos 1.100
 Centrifugación diferencial

• Los componentes de la
sangre tienen diferentes
pesos.
• Usando la centrifugación
diferencial los componentes
se separan encapas dentro
de la bolsa original.
• Los eritrocitos y leucocitos se sedimentan mas
rápido. Se depositan en la mitad inferior de la bolsa. -
• La mitad superior contiene Plasma rico en
plaquetas.
• Las plaquetas empiezan a sedimentar.
• La masa celular de los eritrocitos es mas abundante
y densa, empuja los leucocitos hacia arriba.
Al finalizar la centrifugación:
• Plasma libre de células en la parte superior de la
bolsa y eritrocitos en el fondo.
• Los leucocitos se acumulan en los 10 ml
superiores de la masa eritrocitaria +
• Las plaquetas se acumulan encima de la Tiempo y
velocidad de
capa leucocitaria. centrifugación
Otros principios de separación
Centrifugación Zonal
• La sedimentación de las células sanguíneas
se logra cuando se ejerce una fuerza
centrífuga mas o menos perpendicular a la
dirección del flujo de la. La eficiencia de la
separación depende del radio entre la fuerza
centrífuga y la velocidad de flujo. Una relación
alta produce plasma pobre en plaquetas, una
relación baja produce plasma rico en
plaquetas.
• Algunas máquinas de aféresis se aplica este
principio.
Centrifugación de densidad flotante
• Es generalmente aplicable para
separaciones que se basan en
diferencias de densidad entre las
células.
• Con este principio las células de Médula
ósea o del Buffy- coat con densidad de
1.077 g/ml producen una capa de
células mononucleares flotantes en la
interfase, y un conglomerado de
eritrocitos y granulocitos.
Centrifugación contra corriente
• Las células sometidas simultáneamente a un
flujo líquido y a una fuerza centrífuga en
direcciones opuestas tienden a ser
separadas de acuerdo a su tamaño. Esta
propiedad ha sido aplicada en separadores
celulares para colectar concentrados de
plaquetas por aféresis con un contenido
mínimo de leucocitos, < 106
leucocitos/unidad.
• También se utiliza para separar
subpoblaciones de células mononucleares
obtenidas de médula ósea.
Consideraciones para los protocolos de
centrifugación
• Proporcionar el máximo rendimiento del
producto
• En el menor tiempo posible
• A la menor velocidad posible para evitar
danos traumáticos a los componentes
celulares
• Temperaturas optimas para la viabilidad de
los componentes.
Protocolos de centrifugación

• Componentes que se desea obtener

• Método de preparación
 Bolsas o contenedores
• Bolsa primaria, bolsas satélites, sistema de
tubería con sellos internos, solución
anticoagulante/ preservativo. Pueden contener
filtros leucorreductores en línea.

La selección del tipo de bolsa depende de las

fracciones que se deseen obtener, y del método
de fraccionamiento
 NOMBRE MARCA SUSTAN- CARACTERISTICA
COMERCIAL DEL CIA
PRODUC- ACTIVA
TO

Bolsas Fenwal bolsang CPDA-1 y Plástico resistente a la centrifugación, aguja de calibre 16 g que facilita la
Bolsa Sencilla x PL 146 venopunción y el flujo sanguíneo,   agilizando el procedimiento. Para   obtención de
450 mL sangre total .

Bolsas Fenwal bolsang CPDA-1 y Plástico resistente a la centrifugación, aguja de calibre 16 g que facilita  la
BolsangDoble PL 146 venopunción y el flujo sanguíneo,   agilizando el procedimiento. Para obtener
concentrado de glóbulos rojos y plasma

Bolsas Fenwal bolsang CPDA-1 y Plástico resistente a la centrifugación, aguja de calibre 16 g que que facilita  la
BolsangTriples PL 146 venopunción y el flujo sanguíneo,   agilizando el procedimiento. Para obtener
concentrado de glóbulos rojos, plasma y plaquetas por 3 días

Bolsas Fenwal bolsang CPDA-1 y Plástico resistente a la centrifugación, aguja de calibre 16 g que facilita  la
Bolsang PL 146 venopunción y el flujo sanguíneo,   agilizando el procedimiento. Para obtener
Cuádruples concentrado de glóbulos rojos, plasma y plaquetas (3 días ) y crioprecipitado.

Bolsas Fenwal bolsang CPDA-1 y Plástico resistente a la centrifugación, aguja de calibre 16 g que facilita  la
Bolsang triples PL 146 y venopunción y el flujo sanguíneo,   agilizando el procedimiento. Para obtener
con Satélite PL 1240 concentrado de glóbulos rojos, plasma y plaquetas por 5 días
PL1240

Bolsa Optisystem CPD , Plástico resistente a la centrifugación, aguja de calibre 16 g que facilita  la
Optisystem ADSOL y venopunción y el flujo sanguíneo,   agilizando el procedimiento. Para obtener
Triple PL 146 concentrado de glóbulos rojos y plasma leucorreducidos. Con salida superior e
inferior

Bolsa Optisystem CPD , Plástico resistente a la centrifugación, aguja de calibre 16 g que facilita  la
Optisystem ADSOL y venopunción y el flujo sanguíneo,   agilizando el procedimiento. Para obtener
Cuádruple PL 146y concentrado de glóbulos rojos, plasma y plaquetas de 5 días leucorreducidos. Con
PL 1240 salida superior.
 Fraccionamiento
Dependiendo del soporte tecnológico la
sangre se puede fraccionar por:

• Método tradicional o manual

• Semiautomático

• Automatizado
 Plasma rico en plaquetas

plaquetas
Plasma pobre en
CR

CL CE CP

Precipitación
PDC CRIOP en frío

Sangre
completa
 Características
• Accesible
• Requiere un mínimo de soporte tecnológico
• Centrífugas refrigeradas, campana de flujo
laminar balanza, prensas manuales, sellador
• Los productos sanguíneos obtenidos son de
buena calidad si se aplican las prácticas
adecuadas
• Se pueden requerir procedimientos adicionales
como la filtración posterior de los productos.
 Bolsa
primaria
CPD

Bolsa
secundaria Plaquetas
(seca) 5 días (seca)

Bolsa
secundaria
SAG-M
 Características
• La ventaja de eliminar el Buffy- coat
(leucorreducción 80% aprox.) es que se
previene la liberación de citocinas de los
leucocitos durante el almacenamiento, con las
ventajas inherentes para el receptor.

• Los eritrocitos con anticoagulante son

transferidos a una bolsa que contiene una
solución preservativa, por ejemplo salina-
adenina-glucosa-manitol (SAGM), en otros
métodos se pierde más de la mitad de la
sustancia preservativa al separar el plasma.
AFÉRESIS
Fabricante Máquina Tipo

Baxter Healthcare CS 3000 Plus® Centrifugación/ Flujo continuo

Corporation, (Flujo discintinuo para
procedimientos de 1 aguja)
Fenwal Division
Amicus® Centrifugación/ Flujo continuo
AutopheresisC® Membrana/ Flujo discontinuo

Fresenius AS 104 Centrifugación/ Flujo continuo

Hemocare, Inc

Gambro BCT Inc COBE® Spectra™ Centrifugación/ Flujo continuo

(Flujo discontinuo para
procedimientos de 1 aguja)

COBE® Trima™ Centrifugación/ Flujo

discontinuo

Haemonetics V-50 Centrifugación/ Flujo

discontinuo
MCS®, MCS/Plus® Centrifugación/ Flujo
discontinuo
PCS® Centrifugación/ Flujo
discontinuo
 Características

• Requiere un equipo de profesionales

especializados.
• Requiere infraestructura costosa y soporte
tecnológico por parte del fabricante del sistema.
• Permite la separación de un componente
sanguíneo específico.
• Se puede donar con mayor frecuencia que con
otros métodos.
• Los productos obtenidos son de alta calidad.
 Nuevas tecnologías
• El sistema ALIX colecta dos unidades de
concentrados eritrocitarios de un solo donador en
un tiempo promedio de donación de 27 minutos.
• Incluye un sistema de leucorreducción automático
adicional.
• Su utilidad está enfocada a donadores con grupos
sanguíneos específicos, o donadores con fenotipos
sanguíneos raros.
• Sistema OrbiSac BC automáticamente:
• Une y depura hasta seis capas
leucoplaquetarias.
• Centrifuga las capas leucoplaquetarias unidas.
• Extrae los concentrados de plaquetas mediante
un filtro de leucoreducción integrado en el
proceso.
• Sella el producto para su almacenamiento.
AUTOPHERESIS-C System: instrumento para
plasmaféresis. Para recolección de plasma
por filtración de membrana, con programa
totalmente automatizado. Colecta un volumen
predeterminado de plasma.
• Utiliza una proporción mínima de
anticoagulante y un reducido volumen
extracorpóreo
INTERCEPT
 Calidad

Los productos sanguíneos deben

cumplir con las especificaciones
pre- establecidas en la NOM o los
estándares vigentes.
Los productos sanguíneos deben mantener su:

Potencia: habilidad específica de un componente

para producir un efecto dado por la
administración de dicho producto de la manera
indicada.

Seguridad: libre de efectos dañinos.

Pureza: relativamente libre de sustancias

extrañas en el producto final, sean o no dañinas
para el receptor o deletéreos para el producto.

Identidad: Debe contener las propiedades y

soluciones indicadas en las etiquetas
Lugar de elaboración

• Espacio adecuado

• Medidas de seguridad

• Limpio, con medidas sanitarias

• Programa de disposición de
desechos biológicos
Equipo

• Apropiado

• Calibrado/ validado: calibración de

centrífugas, balanzas…

• Programa de mantenimiento preventivo:

Selladores, refrigeradores…
Personal
• Calificado, entrenado

• Coordinador de producción, Coordinador

del Aseguramiento de la calidad, Medico
especialista, enfermeras, químicos
técnicos auxiliares…

• Organigrama

• Descripción de labores
 Procedimientos

• Actuales

• Aprobados

• Revisión periódica
 Control de puntos críticos
• Confirmación de la identidad del donador al
etiquetar las bolsas y muestras
• Desinfección adecuada del sitio de
venopunción
• Mezcla adecuada de la sangre con el
anticoagulante
• Volumen adecuado de sangre colectada
• Etiquetado
• Almacenamiento
• Control de calidad de los componentes
sanguíneos
Conclusiones
• Existen varios métodos para la obtención de
componentes de la sangre

• El procesamiento requiere manipulación de la

sangre, por lo tanto se debe realizar con
buenas prácticas de manufactura.

• Los productos finales deben ser de alta

calidad, seguros, efectivos y consistentes.

• Las actividades deben estar bien controladas

y completamente documentadas
GRACIASPOR SU ATENCION