Inmunosensor fluorescente de

onda evanescente para el control

de la calidad de la leche
SISTEMAS DE CONTROL AUTOMÁTICO
JORGE SEBASTIAN CURA GARCIA 1865177
 Antibióticos: El uso excesivo de antibióticos hace que los residuos de antibióticos
queden en el cuerpo de estos animales y los microorganismos se vuelvan resistentes.

Aditivos ilegales: Principalmente melamina y β-lactamasa, sirven para ocultar los

residuos excesivos de antibióticos en la leche.

Posibles
contaminantes de Biotoxinas: Contaminan la leche a través de la acumulación de toxinas en los animales
y suponen un riesgo para nuestra seguridad biológica.
la leche
Microorganismos: La esterilización inadecuada, así como un procesamiento,
manipulación y envasado deficientes, pueden promover la contaminación de bacterias,
virus, etc. lo que reduce la calidad de los productos lácteos.

Adición ilegal: Los productores de leche a menudo agregan ilegalmente agua a la leche
cruda para aumentar su cantidad.
 La mayoría de estas técnicas implican un
control analítico químico clásico, que se
Métodos basa en técnicas analíticas y de prueba de
convencionales laboratorio a gran escala, como:
utilizados para
monitorear los  La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC).
contaminantes de la  La cromatografía de gases y la espectrometría de
masas.
leche
 La cromatografía líquida y la espectrometría de
masas.
 La espectroscopia de absorción atómica.
 La inmovilización permite la detección continua de
analitos en sistemas que fluyen, como sangre, fluidos de
biorreactores o muestras de agua.
Aplicaciones de
los biosensores en
el seguimiento de El biosensor es reutilizable o puede regenerarse.
los contaminantes
de la leche
El biosensor es capaz de detectar en paralelo múltiples
analitos. La rapidez es una ventaja sobresaliente de los
biosensores en comparación con otros métodos analíticos
convencionales.
Tecnología de inmunosensor fluorescente de onda evanescente

 Los biosensores ópticos han recibido mucha atención durante décadas por su aplicación en seguridad
alimentaria, monitoreo ambiental y diagnóstico en el punto de atención (POC por sus siglas en
ingles).
 Estos biosensores ofrecen ventajas notables, como robustez, inmunidad a interferencias
electromagnéticas, alta sensibilidad y selectividad, fácil integración y portabilidad potencial para
mediciones in situ e in situ.
 Principio de las ondas evanescentes
Cuando un haz de luz se lanza a una guía de ondas en un
medio dieléctrico que exhibe un índice de refracción bajo,
la reflexión interna total, el ángulo de incidencia θ es
mayor que el ángulo crítico θc, que se define por la ley de
Snell de la siguiente manera:
Aquí n1 y n2 son los índices de refracción de la guía de
ondas y el medio de reserva circundante, respectivamente.
No toda la energía del haz se refleja cuando θ> θc; una
pequeña porción de luz todavía penetra en el medio de
índice bajo y su amplitud de campo decae
exponencialmente con la distancia desde la interfaz. La
parte de la onda, es decir, el campo electromagnético, que
se filtra hacia un medio que presenta un índice de
refracción bajo se denomina onda evanescente. La
intensidad I (z) de esta onda evanescente en función de la
distancia z desde la interfaz viene dada por:
Principio de las ondas evanescentes

Donde I0 es la intensidad en la interfaz, z es la El campo evanescente que decae exponencialmente en el

profundidad en el medio de reserva con un índice de medio de bajo índice puede servir como energía de
refracción de n1, yd es una distancia característica que excitación y ofrece un enorme potencial en el diseño y
describe la profundidad de penetración de la onda construcción de varios sensores
evanescente en el medio de reserva y es la distancia
requerida para que la amplitud del campo caiga a 1 / e (=
0.37) de su valor en la interfaz. 26 d es una función de la
longitud de onda incidente (λ), θ y los índices de
refracción de los dos medios y está dada por:
  El transductor de guía de ondas utilizado en la
propagación de la luz generalmente incluye
configuraciones planas y cilíndricas. La
estructura básica de una guía de ondas plana
Configuración del consiste en un medio óptico de alto índice
extendido longitudinalmente, que está rodeado
transductor transversalmente por un medio de bajo índice.
El término "guía de ondas cilíndrica" ​también se
refiere a la fibra óptica en la mayoría de los
casos.
 Fibra óptica

 La fibra óptica es un candidato ideal como transductor de ondas evanescentes porque transmite
luz según el principio de TIR.
 Una fibra óptica es una guía de ondas dieléctrica cilíndrica. Después de retirar el revestimiento del
extremo distal de la fibra, la onda evanescente puede exponerse para formar la región de
detección.
 La fibra sirve simultáneamente como colector de fluorescencia generada en la mayoría de los
casos.
 La señal fluorescente total depende no solo de la excitación de la fluorescencia a través de la onda
evanescente en la superficie de la fibra, sino también de la fracción de la fluorescencia total
emitida que se acopla de nuevo a los modos detectables dentro de la fibra
Aplicaciones del inmunosensor fluorescente de onda evanescente
en el control de contaminantes de la leche

 En los biosensores establecidos para el inmunoensayo competitivo indirecto, varios factores son
críticos para el rendimiento del dispositivo, incluido el tiempo de preincubación del anticuerpo
marcado y el antígeno libre en las muestras, el tiempo de incubación cuando la mezcla
preincubada entra en contacto con la superficie del biosensor y las concentraciones de antígeno
inmovilizado y marcado.
 Entre estos factores, la concentración de anticuerpo marcado es un factor importante en los
inmunoensayos porque afecta fuertemente los LOD y los rangos de trabajo de los inmunosensores.
 Aplicaciones

 El biosensor de ondas evanescentes propuesto, que emplea la guía de ondas plana o la fibra óptica
como transductor, es una plataforma universal utilizada para detectar contaminantes en productos
lácteos. La detección simple y multiplexada de tres contaminantes potenciales en los productos
lácteos se puede realizar debido a la disponibilidad de anticuerpos.
 En la mayoría de los casos todavía se necesita un tratamiento previo adecuado de la muestra al
implementar Tecnologías de biosensores para detectar contaminantes en productos lácteos. Los
pretratamientos populares incluyen la centrifugación a alta velocidad de las muestras de leche
(11000-12000 rpm) durante 5-15 min para eliminar la grasa de la leche, seguido de la dilución de
la capa líquida media con tampón PBS para la prueba. Aunque la identificación de las condiciones
óptimas de medición permite el desarrollo de un biosensor óptico para el análisis simultáneo de
varios parámetros de seguridad y calidad en la leche.
  Se puede lograr un nivel satisfactorio de precisión,
exactitud y estabilidad para la detección de leche
enriquecida y otros productos lácteos. Al utilizar los
formatos de detección simple y multiplexado, los LOD
de biosensores para contaminantes de la leche, como
melamina, sulfadimidina y aflatoxina M1, pueden
cumplir con los niveles máximos estrictos de residuos
establecidos por la UE.
 Además, la plataforma de biosensores propuesta puede
Conclusiones funcionar como una plataforma de inmunoensayo
universal utilizada para detectar contaminantes en
productos lácteos cuando se dispone de acceso a
anticuerpos que demuestren un buen rendimiento.
 El biosensor propuesto también muestra un gran
potencial para el control de la calidad de la leche en el
lugar y se puede operar fuera del laboratorio, por
ejemplo, en granjas, estaciones de recolección de leche,
tiendas o plantas de producción de lácteos.
  Las nuevas tendencias en el control de la calidad de la
leche destacan la necesidad de desarrollar herramientas
para la detección rápida e in situ de contaminantes para
capacitar a los operadores comerciales de lácteos para
que asuman su responsabilidad de monitorear
diariamente su cadena de producción láctea.
Perspectivas  Podemos predecir que en un futuro cercano, habrá dos
cosas una marcada influencia en el desarrollo de
futuras nuevas estrategias basadas en la plataforma de
biosensores establecida. Uno es la nanotecnología y el
otro son materiales funcionales de ácido nucleico. Sin
duda, la nanotecnología puede transformar las
estructuras fotónicas actuales en estructuras
nanofotónicas, que demuestran un rendimiento
excelente.