Presentación 1 Reactores Bioquímicos REPASO

Escuela de Estudios Superiores de Xalostoc
INGENIERÍAS
DISEÑO DE REACTORES BIOQUÍMICOS
AGOSTO-DICIEMBRE 2021
INGENIERÍAS
• El reactor es el corazón del cualquier proceso

de fermentación o conversión enzimática.
• El diseño de biorreactores es una tarea

complicada, basad en principios cientificos y
de ingeniería y en muchas reglas empíricas.
• Los aspectos específicos del reactor y su

operación incluyen varias decisiones críticas.
¿cómo cuales?
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Un biorreactor o fermentador es aquel dispositivo que proporciona un

medio ambiente controlado que permite el crecimiento eficaz de las
células (microorganismos) para la transformación de una materia prima
en un producto. Este medio ambiente, debe tener niveles óptimos de
temperatura, pH, sustrato, sales, y oxígeno.
Los biorreactores son equipos donde se realiza el proceso de cultivo,

sea en estado solido o líquido. Su diseño debe ser tal que se asegure
homogeneidad entre los componentes del sistema y condiciones
óptimas para el crecimiento microbiano y la obtención del producto
deseado.
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Un biorreactor es por tanto un dispositivo biotecnológico que

debe proveer internamente un ambiente controlado que garantice
y maximice la producción y el crecimiento de un cultivo vivo; esa
es la parte biológica. Externamente el biorreactor es la frontera
que protege ese cultivo del ambiente externo: contaminado y no
controlado. El biorreactor debe por tanto suministrar los
controles necesarios para que la operación o proceso
(bioproceso) se lleve a cabo con economía, alto rendimiento
(productividad) y en el menor tiempo posible; esa es la parte
tecnológica.
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DISEÑO BÁSICO DE UN BIOREACTOR
El efecto considerable sobre el rendimiento

global del proceso
El conocimiento de cinética de las reacciones es

esencial para comprender cómo funciona los
reactores biológicos
Los balances de materia y energía, la mezcla, la

transferencia de materia y la transmisión de calor.
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ASPECTOS IMPORTANTES EN UN BIOREACTOR

• Los microorganismos o células realizan su función con gran
eficiencia bajo condiciones óptimas.
• Las condiciones ambientales de un biorreactor tales como flujo
de gases (por ejemplo, oxígeno, nitrógeno, dióxido de carbono,
etc.), temperatura, pH, oxígeno disuelto y velocidad de agitación o
circulación, deben ser cuidadosamente monitoreadas y
controladas.
• La mayoría de los fabricantes industriales de biorreactores usan
recipientes, sensores, controladores y un sistema de control
interconectados para su funcionamiento en el sistema de
biorreacción.
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La propagación celular (fenómeno conocido como Fouling) puede

afectar la esterilidad y eficiencia del biorreactor.
Para evitar esto, el biorreactor debe ser fácilmente limpiable y con

acabados lo más sanitario posible (de ahí sus formas redondeadas).
Se requiere de un intercambiador de calor para mantener el

bioproceso a temperatura constante.
La fermentación biológica es una fuente importante de calor, por lo

que los biorreactores requieren de agua de enfriamiento. Pueden ser
refrigerados con una chaqueta externa o, para recipientes
sumamente grandes, con serpentines internos.
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En un proceso aerobio, la transferencia óptima de oxígeno es tal vez la

tarea más difícil de lograr.
El oxígeno se disuelve poco en agua (y aún menos en caldos

fermentados) y es relativamente escaso en el aire (20,8 %).
La transferencia de oxígeno se facilita por la agitación que se requiere

también para mezclar los nutrientes y mantener la fermentación
homogénea. Sin embargo, existen límites para la velocidad de agitación,
debidos tanto al alto consumo de energía como al daño ocasionado a los
organismos debido a un esfuerzo de corte excesivo.
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En general los dispositivos básicos requeridos

para funcionar en un proceso de fermentación
son:
•Equipo para suministrar aire. ( transferencia de

masa)
•Equipo para generar y controlar la temperatura.

(transferencia de energia)
•Equipo para agitación mecánica. (transferencia

de movimiento)
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Otros equipos o accesorios como bombas, rotámetros, válvulas,

filtros, tuberías, abrazaderas, pHmetros y sus controladores,
deben ser adquiridos aparte, teniendo en claro que el equipo
puede emplearse para realizar una fermentación controlando
manualmente el pH, el oxígeno disuelto y el nivel de espuma.
En el diseño del biorreactor se tiene en cuenta, además del tipo de

proceso microbiológico, el efecto del flujo, el tiempo de residencia,
el pH, la temperatura, la biomasa, la concentración de nutrientes y
la velocidad de agitación para que se desarrolle en forma óptima
la conversión de los lodos .
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CLASIFICACIÓN DE LOS BIORREACTORES
Clasificación operativa Clasificación biológica

Los biorreactores se clasifican biológicamente
Se clasifican de acuerdo al modo de de acuerdo al metabolismo procesal del
operación: discontinuo, semicontinuo, sistema de cultivo: anaeróbico, facultativo y
continuo. aeróbico.
Esta clasificación se aplica a cualquier reactor, Los bioprocesos de cultivo y las fermentaciones
sea químico o biológico. están basados en el metabolismo celular.
En este último, el modo de operación define el El metabolismo define los parámetros y

sistema de cultivo, delimita la clasificación características operativas-biológicas de diseño
procesal-productiva del cultivo y las y de operación del biorreactor, y son las que
características operativas de diseño que intervienen en la parte biológica del sistema y
intervienen en el proceso productivo del tienen que ver con el crecimiento, productividad
sistema. y rendimiento del cultivo.
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Clasificación operativa
Discontinuo(batch):
Por lotes o tandas, sistema cerrado, sin alimentación (F).
Se coloca dentro del biorreactor la carga total de cada proceso

(tanda o lote) de cultivo o fermentación y se dejar que se lleve
a cabo el proceso productivo o la fermentación por el tiempo
que sea necesario, este tiempo se denomina tiempo de
retención.
Son sistemas cerrados que se caracterizan por cambiar las

condiciones fisiológicas y ambientales. No hay entrada ni
salida de medio de cultivo.
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Discontinuo(batch):
o Ventajas:
 Procesamiento de una gran variedad
de sustratos.
 Admite cargas secas y con alta
humedad.
 Trabajo en ciclos para una operación
menos personalizada.
o Desventajas:
 La carga y descarga requiere de una mayor
operación de manera personalizada.
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Semicontinuo (batch alimentado):

Por lotes alimentados, con alimentación de entrada (F).
Se alimenta una línea de entrada (F) para que el sistema de cultivo

tenga un producto con máximo de crecimiento (exponencial) y
aumente la productividad.
Estos sistemas operan adicionando medio fresco, pero sin

remoción del existente.
Son muy útiles cuando se requiere una elevada densidad celular en

la etapa de iniciación del proceso que implica un alto consumo de
nutrientes, especialmente de fuente hidrocarbonada que suele
funcionar como sustrato limitante.
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Semicontinuo (batch alimentado):
Ventajas y Desventajas
o Son muy útiles cuando se necesita una elevada densidad celular
en la etapa de iniciación del proceso que implica un alto consumo
de nutrientes (fuente hidrocarbonada que suele funcionar como
sustrato limitante).
o Consiste en remover, al final de la operación entre un 80 y un 90
% del cultivo y reemplazarlo por medio fresco.
o De esta manera puede satisfacerse sencillamente la necesidad de
contar con inóculos de gran tamaño y a su vez evitar la
esterilización del reactor entre dos ciclos.
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Continuo: por quimioestato.
Se alimenta una línea de entrada F1 o alimentación y se

drena una línea de salida F2o lavado; de manera que los
flujos o caudales de ambas líneas sean iguales y la
producción sea continua.
El caudal de entrada de medio fresco es igual al de

salida de medio utilizado.
Son utilizados en cultivos donde la velocidad de

crecimiento celular es constante por lo que existe un
suministro constante de nutrientes o para la remoción
permanente de producto sobre todo en sistemas
inmovilizados.
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Ventajas:
o Son utilizados en cultivos donde la velocidad de crecimiento celular es constante ya
que hay un constante ingreso de nutrientes o para la remoción permanente de
producto sobre todo en sistemas inmovilizados.
o Para su buena aplicación se requiere minimizar lo que se denomina lavado del
cultivo.
o Una variante es la Perfusión que implica la remoción y suministro de medio dejando
la biomasa ocluída en una malla.
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Desventajas:
 Presenta inconvenientes con respecto al mantenimiento de las condiciones de

asepsia del proceso, y se dificulta debido a la tendencia a formar agregados de
las células vegetales en cultivo, la formación de merengue y el lento crecimiento
celular.
 Para su buena aplicación se requiere del diseño de sistemas que permitan

suplementar continuamente el medio de cultivo evitando la remoción de las
células y así minimizar lo que se denomina lavado del cultivo.
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CLASIFICACIÓN Y DIFERENCIAS EN BIORREACTORES A ESCALA LABORATORIO, PILOTO E INDUSTRIAL

INGENIERÍAS
Clasificación biológica
Los sistemas biológicos deben interaccionar con el ambiente externo

para poder crecer y desarrollarse.
Los biorreactores se clasifican biológicamente de acuerdo al

metabolismo procesal del sistema de cultivo:
• Anaeróbico.
• Facultativo.
• Aeróbico.
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Células y microorganismos anaeróbicos
Bacterias en su gran mayoría, son microorganismos de metabolismo degradativo

(catabólico).
Generalmente unicelulares, estos microorganismos son autónomos y nutricionalmente

independientes (autótrofos).
Sus células (cuerpos) no respiran (no utilizan la glucólisis para la respiración celular), en
cambio, utilizan vías alternas, donde una molécula orgánica, producida durante el proceso
metabólico (catabolismo) es utilizada como aceptor de electrones, en un proceso
bioquímico conocido como respiración oxidativa; esta molécula es reducida a producto
orgánico en un proceso comúnmente denominado fermentación.
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Células y microorganismos anaeróbicos
Cultivos microbianos anaeróbicos - fermentador bacterial (CO2)
Los microorganismos de metabolismo anaeróbico son los más simples de todos,

tan solo necesitan de un medio de cultivo adecuado, agitación vigorosa y cierta
cantidad de CO2 (dióxido de carbono) disuelto (COD) para crecer y multiplicarse.
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Células y microorganismos facultativos
Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre ambientes: aeróbico

(presencia de oxígeno) y anaeróbico (ausencia de oxígeno).
Son microorganismos de metabolismo mixto por lo que, pueden tanto degradar

(catabolismo) como construir (anabolismo) materia orgánica, a partir de diferentes
sustratos (materia prima), tanto orgánicos como inorgánicos.
Pese a su versatilidad, sus mayores representantes son microorganismos que

presentan relaciones parásitas o simbiontes tales como: hongos y levaduras, por lo
que no son muy extensos.
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Células y microorganismos facultativos
Cultivos microbianos facultativos – fermentador bacterial
Los microorganismos facultativos toleran la presencia de oxígeno en bajas

concentraciones y además de un sustrato adecuado, sólo requieren agitación
moderada y un medio de cultivo para crecer y desarrollarse.
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Células y microorganismos aeróbicos
Pertenecen en su mayoría al Reino Eucariota – pero también los hay procariota –

son microorganismos y células que respiran (utilizan la glucólisis como forma de
respiración celular); por lo que su metabolismo es constructivo (anabólico) y deben
obtener sus nutrientes de diferentes fuentes.
Sus principales grupos están representados por: bacterias y microorganismos

aeróbicos, plantas y animales; cuyas células se puedan cultivar en suspensiones
celulares o bien, en diferentes arreglos artificiales o modificadas.
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Células y microorganismos aeróbicos
Cultivos microbianos aeróbicos – fermentador bacterial (O2)
Los microorganismos aeróbicos necesariamente requieren la presencia de

oxígeno (aire) disuelto (OD) para sobrevivir; además, agitación moderada y un
medio de cultivo rico en nutrientes para poder crecer y desarrollarse.
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Composición química de las células
La composición de las células bacterianas depende del tipo de bacteria.

En la tabla 8.1 se muestra la composición en peso de la Escherichia coli.
El carbono es el elemento que representa el mayor porcentaje en peso
de una célula base seca. La célula tiene un alto porcentaje de contenido
de agua, que asciende al 90% del peso total de la misma
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CRECIMIENTO DE BACTERIAS
La mayoría de las bacterias se reproducen por medio de una fisión binaria

(ver Figura 8.4).
El tiempo que tardan en formarse 2 células de
una célula común se llama tiempo de
generación, pero como coincide con el tiempo
en que se duplica el número de células se
denomina también tiempo de duplicación. Este
tiempo varía significativamente según la
especie bacteriana y según las condiciones del
medio de cultivo.
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FACTORES QUE AFECTAN EL CRECIMIENTO Y LA BIODEGRADACIÓN
Nutrientes.
Los nutrientes deben estar disponibles de acuerdo a las necesidades de

crecimiento de las células. Sin embargo, la presencia de nutrientes en cantidad
adecuada no es suficiente, los nutrientes deben estar también en un estado
adecuado para su asimilación.
Los medios de cultivo pueden ser medios sintéticos o complejos. Los medios
sintéticos son aquellos que tienen una composición química bien definida. Los
medios complejos contienen materiales de composición no definida (por
ejemplo, cuando se le agrega extracto de levadura al medio de cultivo).
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PH
Cada organismo tiene un rango de PH dentro del cual es posible el crecimiento y

normalmente posee un PH óptimo muy bien definido.
La mayoría de los ambientes naturales tienen valores de PH de 5.9 y los organismos

con PH equivalentes son los habituales.
Sólo unas pocas especies pueden crecer con un PH inferior a 2 o mayor a 10. Los
que crecen a PH bajos se llaman acidófilos por ejemplo los hongos. Algunos
microorganismos posee PH óptimos de 10-11 y se conocen como alcalófilos.
Debe quedar claro que independiente del PH del ambiente extracelular, el PH
intracelular debe permanecer cercano a la neutralidad, con el objeto de impedir la
destrucción de macromoléculas internas.
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Temperatura.
La temperatura es uno de los factores ambientales más importantes que afectan al

crecimiento y a la supervivencia de los microorganismos.
Las especies bacterianas crecen generalmente bien en rangos estrechos de
temperatura.
Las bacterias mesófilas crecen bien entre 15 y 45°C , siendo el rango óptimo entre 25
y 35 °C. Las psycrófilas se desarrollan adecuadamente debajo de los 20°C. Las
termófilas tienen un buen desarrollo entre 45 y 65 °C.
INGENIERÍAS
Los aumentos de temperatura en una

primera etapa permiten alcanzar
mayores velocidades de degradación
debido a un aumento de la actividad
microbiana, un aumento de la
solubilidad de los nutrientes en agua,
entre otras razones. En general a
temperaturas mayores que 40 °C el
crecimiento de bacterias decae debido
a la desnaturalización de enzimas y
proteínas. A temperaturas cercanas a
los 0°C, el crecimiento se detiene.
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Disponibilidad de agua.
El agua es el componente principal de las células, por lo tanto un suministro de

agua adecuado es indispensable para lograr el mantenimiento y crecimiento
microbiano.
También el agua es el medio de transporte de los sustratos (o contaminantes) hacia
el interior de las células, y también el transporte de los compuestos que se
producen dentro de la célula y que son devueltos al medio de cultivo.
Sin agua la actividad microbiana no es posible.
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Otros factores vinculados a los sustratos
La estructura y origen de los sustratos (o reactivos) tienen un impacto decisivo en la

capacidad de los microorganismos de sobrevivir y en el cumplimiento de la función
que se desea. Cuando alguno de los sustratos presenta una baja solubilidad en agua,
se encuentra poco biodisponible para los microorganismos y la reacción bioquímica
se verá “demorada” por un problema de transferencia de masa.
La concentración de los compuestos (tanto reactivos como productos) también es

muy importante, por ejemplo altas concentraciones de un compuesto pueden ser
tóxicas e inhibir el crecimiento de las bacterias.
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ESTEQUIOMETRÍA DE LAS REACCIONES CELULARES
La estequiometría del crecimiento celular es muy compleja, porque en general

muchos sustratos participan de la reacción.
Consideremos que se conduce una única reacción biológica global y que la biomasa
está caracterizada por un único componente (X). La Figura 8.9 muestra la utilización
de los sustratos para la obtención de los productos de la reacción biológica
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Suponiendo que de la reacción participan tres sustratos y se generan tres productos

la reacción biológica puede expresarse como:
α1S1 + α2S2 + α3S3→ γ X + β1P1 + β2P2+ β3P3
donde, αi, βi, γ= coeficientes estequiométricos, mol.

Si= Sustrato i
Pi= Producto i
X= biomasa
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Clasificación biológica-operativa
Balance general biomasa
Velocidad de Entrada
– Velocidad de Salida
+ Velocidad de Formación
– Velocidad de Consumo
Velocidad de Acumulación
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• El reactor es el corazón del cualquier proceso

• El diseño de biorreactores es una tarea

• Los aspectos específicos del reactor y su

Un biorreactor o fermentador es aquel dispositivo que proporciona un

Los biorreactores son equipos donde se realiza el proceso de cultivo,

Un biorreactor es por tanto un dispositivo biotecnológico que

DISEÑO BÁSICO DE UN BIOREACTOR

El efecto considerable sobre el rendimiento

El conocimiento de cinética de las reacciones es

Los balances de materia y energía, la mezcla, la

ASPECTOS IMPORTANTES EN UN BIOREACTOR

La propagación celular (fenómeno conocido como Fouling) puede

Para evitar esto, el biorreactor debe ser fácilmente limpiable y con

Se requiere de un intercambiador de calor para mantener el

La fermentación biológica es una fuente importante de calor, por lo

En un proceso aerobio, la transferencia óptima de oxígeno es tal vez la

El oxígeno se disuelve poco en agua (y aún menos en caldos

La transferencia de oxígeno se facilita por la agitación que se requiere

En general los dispositivos básicos requeridos

•Equipo para suministrar aire. ( transferencia de

•Equipo para generar y controlar la temperatura.

•Equipo para agitación mecánica. (transferencia

Otros equipos o accesorios como bombas, rotámetros, válvulas,

En el diseño del biorreactor se tiene en cuenta, además del tipo de

CLASIFICACIÓN DE LOS BIORREACTORES

Clasificación operativa Clasificación biológica

En este último, el modo de operación define el El metabolismo define los parámetros y

Por lotes o tandas, sistema cerrado, sin alimentación (F).

Se coloca dentro del biorreactor la carga total de cada proceso

Son sistemas cerrados que se caracterizan por cambiar las

Semicontinuo (batch alimentado):

Se alimenta una línea de entrada (F) para que el sistema de cultivo

Estos sistemas operan adicionando medio fresco, pero sin

Son muy útiles cuando se requiere una elevada densidad celular en

Semicontinuo (batch alimentado):

Se alimenta una línea de entrada F1 o alimentación y se

El caudal de entrada de medio fresco es igual al de

Son utilizados en cultivos donde la velocidad de

Continuo: por quimioestato.

 Presenta inconvenientes con respecto al mantenimiento de las condiciones de

 Para su buena aplicación se requiere del diseño de sistemas que permitan

CLASIFICACIÓN Y DIFERENCIAS EN BIORREACTORES A ESCALA LABORATORIO, PILOTO E INDUSTRIAL

Los sistemas biológicos deben interaccionar con el ambiente externo

Los biorreactores se clasifican biológicamente de acuerdo al

Células y microorganismos anaeróbicos

Bacterias en su gran mayoría, son microorganismos de metabolismo degradativo

Generalmente unicelulares, estos microorganismos son autónomos y nutricionalmente

Células y microorganismos anaeróbicos

Cultivos microbianos anaeróbicos - fermentador bacterial (CO2)

Los microorganismos de metabolismo anaeróbico son los más simples de todos,

Células y microorganismos facultativos

Son ambivalentes, tienen la capacidad de vivir o sobrevivir entre ambientes: aeróbico

Son microorganismos de metabolismo mixto por lo que, pueden tanto degradar

Pese a su versatilidad, sus mayores representantes son microorganismos que

Células y microorganismos facultativos

Cultivos microbianos facultativos – fermentador bacterial

Los microorganismos facultativos toleran la presencia de oxígeno en bajas

Células y microorganismos aeróbicos

Pertenecen en su mayoría al Reino Eucariota – pero también los hay procariota –

Sus principales grupos están representados por: bacterias y microorganismos

Células y microorganismos aeróbicos