ENERGÍAS

RENOVABLES

BIORREACTORES
MODOS DE OPERACIÓN Ing. Brenda
Valenzuela
Braulio Aldair Gutierrez Gutierrez
Carlos Alberto Castro Suzuki 18 de Septiembre de 2022
El biorreactor es el centro de todo proceso biotecnológico. El diseño y
análisis del comportamiento de un biorreactor dependen del
conocimiento de la cinética de las reacciones biológicas y de los
balances de materia y energía. En la practica la metodología se vuelve
compleja debido a la naturaleza de la catálisis biológica y del caldo de
fermentación, los cuales puede tener propiedades que varían con el
tiempo y presentar patrones cinéticos y de flujo muy complejos.
Además se procesos de transferencias de masa y calor añaden
complejidad al problema.

INTRODUCCIÓN
DISCONTINUO (BATCH)
El crecimiento de microorganismo en batch se refiere a que las
células se cultivan en un recipiente con una concentración inicial,
sin que esta sea alterada por nutrientes adicionales o el lavado,
por lo que el volumen permanece constante y solo las condiciones
ambientales del medio (pH, temperatura, velocidad de agitación,
etc) son controladas por el operador. El proceso finaliza cuando
todo el substrato es consumido por la biomasa. Esta forma de
cultivo es simple y se utiliza extensamente tanto en el laboratorio
como a escala industrial.
 Curva
Concentración-Tiempo
 Ventajas
•Bajo costo de inversión ya que no se emplean muchos
dispositivos de control.
•Gran flexibilidad puesto que el biorreactor se usa para la
producción de varias sustancias y especificaciones de
producto.
•Altos niveles de conversión como resultado de un período
de cultivo bien definido.
•Menor riesgo de infecciones y mutación celulares debido
a los períodos relativamente cortos de cultivo.
 Desventajas

•El denominado tiempo muerto.

•Gran desgaste de los instrumentos de medida debido a la
frecuente esterilización.
•Ensuciamiento del reactor debido a la preparación de numerosos
subcultivos para inóculo.
•Altos costos de personal ya que es necesario un control adecuado
y estricto del proceso no estacionario, lo que involucra personal y
equipos apropiados.
•Gran riesgo para el personal de servicio, al estar expuestos al
posible contacto con algunos microorganismos patógenos o
productos tóxicos.
Se caracteriza por la inoculación de un medio
de cultivo estéril con microorganismos, por un
período específico de reacción. Durante este
tiempo, se alteran las concentraciones de
células, sustrato (fuente de carbono, sales,
nutrimentos, vitaminas, etc.) y producto. Una
buena mezcla asegura que no existan
diferencias locales significativas en la
composición y en la temperatura de la mezcla
de reacción. Por otra parte, la reacción no es
estacionaria.
SEMICONTINUO (FED-BATCH)
En estos cultivos, los nutrientes son alimentados al biorreactor de
forma continua o por lote, mientras que no hay efluente en el
sistema. Según sea el objetivo de la operación, la adición
intermitente del sustrato mejora la productividad de la
fermentación manteniendo baja la concentración del substrato. Un
proceso de este tipo esta restringido por la capacidad volumétrica
del reactor.
 Curva
Concentración-Tiempo
Se practican muchas variaciones de este tipo de
proceso. La más popular involucra iniciar el
reactor como si se tratara de un proceso por lotes
y cuando el sustrato que limita el crecimiento
(por lo general la fuente de carbono) se
consuma, se alimenta al reactor de una manera
específica (proceso por lotes con alimentación), o
la concentración del sustrato se mantiene
constante por medio de cultivos extendidos.
Además, se practica frecuentemente la adición
programada de sustrato para la producción de
metabolitos secundarios, en la cual, el
crecimiento celular y la formación de producto
ocurren por lo general en fases separadas.
 Ventajas
•Alto grado de flexibilidad.
•Método de operación semi-estacionario, aun en el caso de
microorganismos con ligero riesgo de mutación e infección.
•Altos rendimientos, como resultado de un tiempo de cultivo bien
definido (en la operación semicontinua no se añaden ni se retiran
células durante el período de cultivo; por esta razón el reactor
opera por lotes siempre y cuando existan los microorganismos de
interés).
•Se pueden optimar las condiciones ambientales de los
microorganismos para mejorar la fase de crecimiento, la fase
productiva y la edad del cultivo.
 Desventajas

•El tiempo muerto
•Los altos costos de operación
•El gran riesgo para el personal de servicio, de contacto
con microorganismos patógenos o productos tóxicos
•El mayor desgaste de los instrumentos por su
esterilización más frecuente.
CONTINUO
Consiste en alimentar con nutrientes y retirar productos
continuamente de un biorreactor. Bajo ciertas condiciones
el cultivo puede alcanzar un estado estacionario, donde no
existe variación con el tiempo del volumen del biorreactor.
De esta manera se puede utilizar para producir sustancias
biológicas a condiciones optimas y para estudios
fisiológicos.
Caracterizada por el hecho que el medio de
cultivo se alimenta continua y homogéneamente
al biorreactor y debe ser constante, si se opera
en estado estacionario; el medio añadido puede
ser estéril o contener los microorganismos que se
van a utilizar. La mezcla reaccionante se extrae
del reactor también de forma continua. Todas las
variables de reacción y los parámetros de control
permanecen constantes a través del tiempo;
como resultado de lo anterior, se establece un
estado estacionario en el reactor seguido por una
productividad y una salida constantes.
 Ventajas
•Grandes posibilidades para la mecanización y la automatización
•Bajos costos
•Menor volumen del reactor, ya que no se presentan períodos de
tiempo no productivos dedicados a la descarga, carga y
esterilización
•La calidad del producto es constante puesto que las condiciones de
operación permanecen invariables
•Menor posibilidad de exposiciones peligrosas del personal de
servicio a microorganismos patógenos o materiales tóxicos, debido a
la mayor mecanización del proceso
•Menor desgaste y maltrato de los instrumentos en la esterilización.
 Desventajas

•Poca versatilidad puesto que sólo es posible efectuar ligeros cambios

en las variables de proceso (homogeneidad, composición del medio,
concentración de oxígeno, temperatura),
•La calidad de las materias primas debe ser uniforme ya que las
condiciones de operación no pueden acondicionarse fácilmente,
•Elevados costos de inversión, debidos principalmente a los equipos de
control y automatización y a la esterilización continua del medio,
•La renovación continua de sustratos sólidos no solubles (como la
paja) puede ser muy costosa,
•Alto riesgo de contaminación y de mutación de los microorganismos
debido a los largos períodos de cultivo.
 Curva Con flujos de entrada y de salida del
Concentración-Tiempo medio de reacción. El reactor se
denomina quimiostato, en aquellos
casos en los cuales la densidad
celular y la concentración
permanecen constantes
TIPOS DE BIORREACTORES CONTINUOS

Tanque Completamente
Agitado(CSTR)

Tubo con Flujo Tapón (PFR)

Bioprocesos Típicos
 Tratamiento Anaeróbico De La Materia Orgánica
A partir de la materia orgánica por los
microorganismos en los ecosistemas naturales
se produce biogás, compuesto por CO2 y CH4.
El metano es el principal componente de los
gases que se producen en los pantanos, en
lagos y sedimentos marinos, plantaciones de
arroz y en los tractos digestivos del hombre y
los animales. Esta transformación se
caracteriza por 4 etapas metabólicas
principales, 2 para la acidogénesis y 2 para la
metanización. Se presentan 5 sustratos, 4 tipos
de biomasas y se obtiene el producto.
Diagrama De Las Etapas De La Reacción
La metanización es un excelente proceso
biológico para el tratamiento de la
contaminación por hidrocarburos. Otro interés
puede ser su valor energético (recuperación y
valoración del metano) y agronómico
(producción de un abono de buena calidad).
Mediante este proceso se obtienen generalmente
mejores resultados que los obtenidos con el
proceso aeróbico convencional. Dentro de sus
aplicaciones se tiene: evaluación de lodos en el
tratamiento de la purificación del agua residual,
procesos de reutilización de desechos urbanos o
de los residuos industriales, entre otros.
 Nitrificación En Procesos De Lodos Activados
Es el proceso de oxidación del amoniaco por organismos especializados llamados
nitrificadores. Su velocidad de crecimiento es mucho mas lenta que la de los organismos
heterotróficos los cuales oxidan carbón orgánico y pueden ser lavados del reactor por
medio del flujo de salida. En un sistema de lodos activados, cuando la carga orgánica es
alta, se requieren altas velocidades de crecimiento de biomasa para que los
microrganismos lleven a cabo la degradación de la materia. La nitrificación podría no ser
posible bajo estas condiciones porque la concentración de nitrificadores seria muy baja.
 ¿A Qué Afecta?
• Transformación de nitrógeno orgánico y amoniacal en nitrógeno gas
inerte y no contaminante.
• Eliminación de la materia orgánica.
• Afecta a la volatilización de amoniaco si no se opera correctamente.
• Reducen los malos olores, o pueden generarse si no se tiene cuidado.
• Se modifica el pH y la alcalinidad

Ventajas
Eliminación de nitrógeno.
Eliminación de materia orgánica sin necesidad de aportar oxigeno
Reducción de emisiones de gases de efecto invernadero
Reducción de los malos olores.
 Con flujos de entrada y de
salida del medio de
reacción. El reactor se
denomina quimiostato, en
aquellos casos en los
cuales la densidad celular
y la concentración
Batch permanecen constantes

Fed-Batch
Continuo
 Fermentación Láctica

La fermentación láctica es un proceso

complicado, que implica el uso de
varios productos y poblaciones
bacterianas, cuyas evoluciones e
interacciones aún no están bien
caracterizadas. Por ejemplo, la leche se
coloca en un lugar caliente hasta su
coagulación resultado, de la producción
del acido láctico por la microflora natural. Durante la conversión de leche a yogur, la
lactosa es la primera en transformarse en la glucosa y la galactosa, esto debido al acido
láctico y al crecimiento simbiótico de 2 bacterias termófilas lácticas.
 Bacterias Termófilas
Estreptocos thermophilus
Lactobacillus bulgaris
El mucílago del café también pueden
encontrarse algunas, por
ejemplo: lactobacillus
acidophilus y L. Fermentum y L.
Plantarum, que producen, junto a
otras, ácido láctico, alcohol, ácido
acético y dióxido de carbono. Estas
BAL se alimentan del azúcar presente
en el mucílago, dando como producto
el ácido láctico.
 Crecimiento de Levaduras
En el crecimiento de levaduras intervienen principalmente fermentaciones
alcohólicas. Este tipo de reacción se caracteriza generalmente por 3 etapas
metabólicas, incluyendo 5 compuestos.
La fermentación en estado sólido en biorreactores continuos ha
sido muy poco estudiada. Este modo de operación puede ser una
oportunidad para resolver los problemas de transferencia de calor
que se presentan en este tipo de fermentación. El objetivo de este
trabajo es analizar el crecimiento de la levadura Candida utilis en
un biorreactor tambor rotatorio continuo a partir de la influencia del
tiempo de residencia de las partículas y del flujo específico de aire.
En este caso fue simulado el crecimiento de la levadura Candida
uitilis sobre bagazo de caña de azúcar. El modelo predice que se
obtienen buenos resultados para un biorreactor de 2 m de diámetro
y 20 m de longitud, con un tiempo de residencia de 10 h y un flujo
específico de aire aproximadamente igual a 2 L/(kg min).
Parámetros
Cinéticos
PARÁMETROS CINÉTICOS

Estos son importantes para la descripción de la evolución de la

población microbiana, ya que el conocimiento del
comportamiento de estos parámetros depende de la modelación
adecuada del sistema
Por ejemplo, uno de los más importantes es la tasa específica de crecimiento o tasa
de crecimiento µ, que se define como la velocidad de crecimiento de la biomasa ()
por unidad de concentración de biomasa ():
𝑟1
µ= (1 )
𝑥

La velocidad de crecimiento de la biomasa (r» a su vez, se define como la cantidad

de biomasa formada por unidad de tiempo y por unidad de volumen de reacción.
Del mismo modo, la velocidad de consumo del sustrato (r» es la cantidad de masa
de sustrato consumido por unidad de tiempo y por unidad de volumen.

𝑟1
γ=
𝑟2
La caracterización matemática de
los parámetros cinéticos es difícil
porque depende generalmente de
numerosas condiciones
extracelulares físicas y químicas.
Por ejemplo, el comportamiento
del crecimiento microbiano y de la
formación de producto esta
influenciado por condiciones
ambientales tales como la
temperatura, pH y la concentración
de oxígeno disuelto. Los efectos de
estos parámetros son los siguientes:
 Temperatura
De acuerdo a su temperatura óptima de crecimiento, los organismos se clasifican en tres grupos:

• Sicrófilos ( Temperatura óptima < 20C )

• Mesófilos ( 20C < Temperatura óptima < 50C )
• Termófilos ( Temperatura óptima ≥ 50C )

La temperatura se va incrementando hasta llegar a la temperatura de crecimiento óptimo y la velocidad

de crecimiento se incrementa aproximadamente el doble por cada 100C que aumenta la temperatura.

Por encima del rango de la temperatura óptima, la velocidad de crecimiento disminuye y puede ocurrir
decaimiento o muerte celular. La temperatura afecta también la formación de producto. Por lo general,
las temperaturas óptimas para el crecimiento microbiano y formación de producto son diferentes. La
temperatura también afecta al coeficiente de rendimiento, como por ejemplo en la producción de
proteínas simples.
 pH
La concentración de iones hidrógeno (pH) afecta
la actividad enzimática y la velocidad de
crecimiento microbiano.

El pH óptimo para el crecimiento puede ser

diferente del requerido para la formación de
producto. Generalmente, el rango de pH
aceptable varia de ±1 a 2 unidades de pH con
referencia al óptimo. Cada organismo tiene su pH
óptimo: el pH óptimo para las bacterias es 3 a 8;
para las levaduras es de 3 a 6, para los mohos es
de 3 a 7; para las células vegetales es de 5 a 6 y
para las células animales es de 6.5 a 7.5.

Cuando el pH no es el óptimo, los requerimientos

de energía de mantenimiento aumentan.
 Oxígeno Disuelto

El oxígeno disuelto (DO) es un sustrato muy importante en las fermentaciones aeróbicas y puede ser
un sustrato limitante debido a que el oxígeno es un gas soluble en el agua. En alta concentración
celular, la tasa de consumo de oxígeno puede exceder a la tasa de suministro. Cuando el oxígeno es un
factor limitante, la tasa específica de crecimiento varía con la concentración de oxígeno disuelto de
acuerdo con la cinética de saturación; por debajo de la concentración crítica, el crecimiento o
respiración se aproxima a una tasa de primer orden dependiente de la concentración de oxígeno
disuelto.

La concentración crítica de oxígeno es de aproximadamente del 5% al 10% de la concentración de

oxígeno disuelto saturado para bacterias y levaduras y de aproximadamente del 10% al 50% de la
concentración de oxígeno disuelto saturado para cultivos de mohos, dependiendo del tamaño de los
pellets de mohos.
MODELOS DE CRECIMIENTO
Durante mucho tiempo se han propuesto diferentes modelos para la tasa de crecimiento,
el más antiguo es el de Verhults, que data de 1938 y expresa la velocidad de crecimiento
como una función de la concentración de la biomasa:

donde es la velocidad máxima de crecimiento y M es una constante.

 El modelo que más comúnmente se ha utilizado se basa en la Ley de Michaelis-Menten,
introducida en 1913 para describir una reacción enzimática. En 1942, esta ley fue
adoptada empíricamente por Monod bajo el supuesto que el crecimiento de la biomasa y
el consumo de sustrato son proporcionales a la concentración de la biomasa, y se
expresa matemáticamente como:

Donde:
Es la concentración de sustrato
Es la constante de saturación

En investigaciones recientes, se considera a la velocidad de crecimiento como un

parámetro variable en el tiempo cuya expresión analítica es desconocida.
MODELO DEL BIORREACTOR
En los reactores tipo tanque
continuamente agitados, se asume
que el proceso se lleva bajo la
condición de mezclado perfecto, lo
que implica que el medio es
homogéneo.
El comportamiento dinámico del crecimiento de una población de microorganismos
en un medio con un solo sustrato limitante lo podemos expresar mediante un balance
de masa de la siguiente manera:

La acumulación neta de biomasa con entrada estéril en el biorreactor es:

donde:

V es el volumen del tanque [l]

x es la concentración de biomasa [mg/l]
r es la velocidad de crecimiento de la biomasa [mg/l-h]
es el caudal o flujo de salida [l/h]
La acumulación neta de sustrato en el biorreactor está dada por:

donde:

x(2) es la concentración de sustrato o nutriente [mg/l]

r2 es la velocidad de consumo de sustrato [mg/l-h]
Qent es el caudal o flujo de entrada [l/h]
es la concentración de sustrato en el efluente [mg/l]

Por último, la variación del volumen es:

 Biorreactor Batch

Como se mencionó anteriormente, un biorreactor batch es un biorreactor en el que no existe flujo de

entrada ni flujo de salida, es decir:

Por lo que las ecuaciones resultan en:

El tanque está inicialmente lleno con una gran cantidad de sustrato y una pequeña cantidad de biomasa
(inóculo). Durante el proceso de fermentación no se incorpora sustrato y este se detiene cuando ha sido
consumido casi en su totalidad, después se extrae la biomasa y los productos (si los hay). El volumen
de cultivo se mantiene constante.
 Biorreactor Fed-Batch

Un biorreactor fed-batch es un biorreactor en el cual no hay flujo de salida, es decir,

Por lo que las ecuaciones resultan en:

El tanque contiene inicialmente una pequeña cantidad de sustrato y biomasa y durante el proceso se
está incorporando sustrato.
1. http://www.arc-cat.net/es/altres/purins/guia/pdf/ficha5.pdf
2. https://tuestecafe.mx/blogs/blog/fermentacion-lactica#:~:text=En%20la%20fermentaci%C3%B3n%20l%C3%
A1ctica%20o,y%20aromas%20de%20ciertos%20alimentos
.
3. https://raco.cat/index.php/afinidad/article/view/305572.
4. http://tesis.uson.mx/digital/tesis/docs/1608/capitulo2.pdf
5. https://biorreactores.tripod.com/Modos.htm