BIORREACTORES Y CAMBIO DE ESCALA

BIORREACTORES
Los biorreactores son recipientes donde se realizan las reacciones bioqumicas, en los que se crean tcnicamente
las condiciones ptimas (temperatura, pH, sustrato, sales y oxgeno) para el cultivo y multiplicacin de
microorganismos, para la formacin de productos ptimos.
La funcin principal de un biorreactor es la de proporcionar un medio ambiente controlado que permita el
crecimiento eficaz de las clulas y la formacin del producto.
OBJETIVOS PARA EL USO DE UN BIORREACTOR
El objetivo para el uso de un biorreactor es la produccin industrial de clulas o de microorganismos,
los que se resumen en los siguientes propsitos:
Producir las mismas clulas o microorganismos (biomasa) en gran escala.
Producir en gran escala compuestos (intracelulares o extracelulares) resultantes del crecimiento
celular (metabolitos primarios y secundarios).
Producir enzimas industriales.
Tratamiento de aguas residuales.
Entre los metabolitos primarios estn: cido actico, acetona, alcohol, cidos orgnicos, aminocidos,
vitaminas y polisacridos y entre los metabolitos secundarios estn, principalmente, los antibiticos.
Caractersticas que debe reunir un biorreactor
Calidad de mezclado, tiempo de mezcla y patrones de flujo que beneficien la distribucin de la
materia prima en el biorreactor y la conversin a producto.
Altas velocidades de transferencia de masa, momento y calor, con un bajo costo o
econmicamente rentable.
Factibilidad tcnica y econmica en la construccin de unidades de gran volumen.
Bajos costos de operacin y mantenimiento.
Operacin asptica.
Requisitos que debe poseer un biorreactor
Sistema de Mezclado:
- Debe mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de cultivo a fin de
prevenir la sedimentacin o la flotacin
- Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes.
Sistema de Termostatizacin:
- Debe mantener constante y homognea la temperatura.
Sistema de Oxigenacin:
- Debe suministrar oxgeno a una velocidad tal que satisfaga el consumo.
Sistema de Esterilidad:
- El diseo debe ser tal que permita mantener el cultivo puro (acero pulido para reactores de
ms de 100 l o de vidrio para menor volumen).
- Fcil de limpiar y esterilizar (por calor hmedo preferentemente)
- Mantener la asepsia durante el transcurso del cultivo (filtros de aire)
Sistema de Control y Automatizacin:
- Debe garantizar las condiciones estables de pH, O2. Agitacin y temperatura como mnimo,
tambin puede controlarse el volumen por medio de la alimentacin, nivel de espuma, etc.
Diseo de biorreactores
Una de las tareas del Ingeniero cuando est frente a una serie de operaciones que transforman ciertos
insumos o materias primas mediante procesos fsicos y qumicos consiste en el dimensionamiento de
los equipos correspondientes. En las transformaciones bioqumicas de la materia, el corazn del
proceso es el biorreactor, ello debido a que su comportamiento condiciona las operaciones de
acondicionamiento y separacin
Procedimiento general de diseo de un biorreactor
Seleccin de una cepa: medio nutriente, pH, temperatura, aerobio, anaerobio, contaminacin.
Modelizacin: seleccin de la configuracin del biorreactor.
Determinacin de dimensiones y condiciones de operacin.
Dimensionado de la superficie de transmisin de calor y de los dispositivos de mezclado.
Necesidades de potencia y aireacin.
Diseo mecnico: seleccin de materiales y dispositivos para el mantenimiento de condiciones
aspticas, control y factores de seguridad.
Operaciones realizadas por los biorreactores
Las operaciones realizadas por los biorreactores son las siguientes:
Homogenizacin: para mantener temperatura y distribucin de concentracin
uniformes.
Mezcla slido/lquido: para mantener una suspensin con una distribucin de slidos
uniforme.
Procesos lquido/lquido: para dispersar una fase en otra, formar emulsiones y
realizar extracciones.
Procesos gaseoso/lquido: para dispersar el gas en los lquidos, airear el lquido.
Intercambio de calor.
Diseo de un biorreactor
Bsicamente un biorreactor comprende un recipiente o tanque con agitacin con las enzimas o clulas
inmovilizadas, una va de entrada para sustrato y otra de salida para el producto.
TIPOS DE BIORREACTORES
Clasificacin general de biorreactores
Tanques agitados
Columnas de burbujeo
De circulacin (Tiro de aire o Air lift)
Lechos empacados
Lechos fluidizados
Lechos de goteo
Biorreactores de acuerdo al modo de operacin:
De acuerdo a la forma de operacin de los biorreactores se pueden clasificar como:
Discontinuo: Biorreactor de Lote (Batch)
Discontinuo alimentado: Biorreactor de Lote Alimentado (Feed-Bach)
Continuo: Biorreactor continuo
Los modos de operacin por lote, son modos discontinuos de operacin, el modo lote es comnmente
llamado discontinuo, mientras que el modo lote alimentado se conoce como discontinuo alimentado a
intervalos.
Biorreactores de acuerdo al modelo hidrulico:
Biorreactores de flujo en pistn
Biorreactores de mezcla completa
Diferencia entre biorreactores de Agitacin Mecnica y Neumtica
BIORREACTORES ENZIMTICOS
El uso de enzimas se refiere a su aplicacin como biocatalizadores de proceso. Desde el punto de vista
cuantitativo, el uso masivo de enzimas hidrolticas en procesos degradativos contina representando el
mayor aporte de las enzimas en la industria de procesos. Por tratarse de procesos con un valor agregado
ms reducido, la optimizacin de la operacin del biorreactor resulta fundamental para su factibilidad.
Ello implica un riguroso diseo y operacin bajo condiciones controladas y optimizadas.
Fundamentos de diseo
En el diseo y seleccin de un biorreactor enzimtico debern considerarse como aspectos esenciales:
La naturaleza del biocatalizador (enzimtico o celular, libre o inmovilizado)
La cintica de la reaccin (unisustrato, multisustrato, reversible o irreversible, con o sin inhibicin,
sujeta o no a alimentaciones por transferencia de masa)
La naturaleza de sustratos y productos de la reaccin (solubles, insolubles, de alto o bajo peso
molecular)
Las propiedades del biocatalizador (actividad especfica, densidad, tamao de partcula)
Los requerimientos de control (de variables operacionales como pH, temperatura, presin, fuerza
inica, esterilidad).
BIORREACTORES NO CONVENCIONALES
Son biorreactores particularmente adaptados a incrementar la eficacia de los procesos de
fermentacin. Aunque en la mayor parte de los procesos industriales el dispositivo generalmente
empleado es el de tanque agitado en operacin discontinua (RDTA), algunos de los cuales se
encuentran ya implementados a escala industrial. Otros, sin embargo, deben ser propuestos de
acuerdo al tipo de producto que se desee obtener y determinar su viabilidad comercial.
Biorreactores No convencionales de alta eficacia
Un biorreactor de alta eficacia es aqul que logre mejorar sustancialmente la operacin de un determinado
proceso, algunos de estos biorreactores son:

1. Biorreactores de Lecho Fijo

En estos biorreactores se implementa un sistema de retencin, frecuentemente adhesin o inclusin, que permite
aumentar notablemente la concentracin enzimtica o celular en el sistema, pretendindose con ello lograr una
mayor capacidad transformadora. Cuando el sistema opera en continuo, se evita de este modo, el lavado de los
microorganismos o enzimas.
2. Biorreactores Pulsantes
Los sistemas pulsantes han sido aplicados en diferentes procesos biotecnolgicos, tanto en el campo
de la produccin de metabolitos por fermentacin y en reactores enzimticos como en el
tratamiento anaerobio de aguas residuales. Aunque el objetivo buscado no es siempre el mismo, en
general, su aplicacin pretende incrementar la velocidad de transferencia de materia en los equipos,
por aumento de la turbulencia o favoreciendo el contacto entre fases.
3. Biorreactores agitados por fluidos
Los biorreactores en lecho fluidizado suministran al sistema energa de agitacin por la inyeccin
o recirculacin de una fase fluida, lo cual minimiza los esfuerzos cortantes de modo que el
biocatalizador no sufre dao.
4. Biorreactores o fermentadores de membrana
En los biorreactores de membrana se acoplan membranas semipermeables a los biorreactores para
favorecer la retencin celular, suministrar gases o separar productos.
Las membranas pueden ser tiles en sistemas de fermentacin en diferentes aplicaciones: retencin o
inmovilizacin celular, suministro de oxgeno al medio de cultivo, separacin de productos.
5. Fotobiorreactores
Los fotobiorreactores incorporan dispositivos para suministrar energa en forma de luz, resultando de
inters cuando se utilizan microorganismos fotosintticos.
Los organismos fotosintticos (bacterias fotosintticas, cianobacterias y micro algas rojas, verdes o
marrones) pueden transformar el CO en macromolculas constitutivas de la biomasa, mediante la
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utilizacin de una fuente de energa luminosa y un compuesto dador de electrones (H O, H S,
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compuestos orgnicos sencillos).
FOTOBIORREACTORES
Durante la dcada pasada se han usado mltiples diseos de fotobiorreactores para el cultivo de
organismos fotoautotrficos microscpicos como microalgas y cianobacterias. Los avances en el
diseo de estos sistemas han permitido mejorar notablemente la densidad celular, la productividad y
por ende la economa de los cultivos para distintos fines.
Clases de fotobiorreactore
Los fotobiorreactores se pueden agrupar en tres grandes grupos en funcin de su aplicacin:
Produccin de biomasa para consumo en acuicultura como complemento para la alimentacin
humana o animal y como aditivo alimentario (fuente de protenas).
Produccin de metabolitos de alto valor aadido: pigmentos, antioxidantes, cidos grasos,
molculas de inters farmacutico y de polisacridos.
Aplicaciones medioambientales: depuracin (eliminacin de metales pesados, fijacin de CO2, etc.),
inculos para el suelo, produccin de biomasa, regeneracin de la atmsfera en sistemas cerrados,
etc.
Condiciones que debe reunir un fotobiorreactor
Los fotobiorreactores deben reunir unas condiciones adecuadas para favorecer la actividad de los
microorganismos fotosintticos. La velocidad de crecimiento de estos microorganismos, depende de la
eficacia del sistema de iluminacin utilizada
El funcionamiento de un fotobiorreactor depende, para una determinada cepa de microorganismo, de la
velocidad volumtrica mxima de absorcin de la luz en el reactor, por lo que debern proveerse de una
elevada superficie especfica para la transferencia de energa luminosa y una intensidad luminosa incidente
elevada. Por otro lado, la concentracin de biomasa debe ser lo suficientemente elevada para absorber la
totalidad de la radiacin luminosa transferida al seno del biorreactor para evitar problemas de saturacin y
fotoinhibicin que reduciran el rendimiento del sistema
Recomendaciones para el Diseo de Fotobiorreactores
Se proponen varias recomendaciones para el diseo de fotobiorreactores:
1. La trayectoria de la luz debe ser pequea (2,5 cm)
 2. Mantener una alta densidad celular (> 8-15 g/l)
3. Un mezclado vigoroso para asegurar ciclos L/O de alta frecuencia
4. Usar tramos cortos de tubera (20-30 m) para evitar inhibicin del crecimiento por acumulacin de O2.
5. Evitar acumulacin de substancias inhibitorias
6. Mantener temperatura y pH ptimos
CAMBIO DE ESCALA
La finalidad del cambio de escala es la seleccin de las condiciones de diseo y operacin que hagan que el efecto
de las variables sea el mismo en unidades de diferente tamao. Con ello se pueden lograr rendimientos y calidad
de productos similares. Se trata de obtener rendimientos comparables con la misma distribucin de productos

Escalamiento
En la prctica existen muchas definiciones del trmino escalado. Una de las clsicas lo limita al estudio de
los problemas asociados a la transferencia de datos del laboratorio a la planta piloto o, a la produccin
industrial. Laboratorio Planta Piloto Escala Industrial
Escalado de bioprocesos
Los bioprocesos se desarrollan e implementan de diferentes maneras, en sus escalas de laboratorio,
piloto, y manufactura.
El escalado puede definirse como el procedimiento para disear y construir un sistema de GRAN
ESCALA base de los resultados de experimentos con equipamiento de PEQUEA ESCALA.
El desempeo de los bioprocesos es afectado por varios parmetros:
El diseo geomtrico
Las variables de operacin
Propiedades del fluido
Procesos de transporte
Cintica de los organismos
Mtodos ms frecuentemente utilizados
Manteniendo la proporcionalidad geomtrica se mantienen algunas de las siguientes variables:
Agitacin por unidad de volumen
Potencia de agitacin
Velocidad de agitacin
Caudal de alimentacin
Nmero de Reynolds referido al agitador
Coeficiente volumtrico de transferencia de materia
Esfuerzo cortante mximo
Tiempo de mezcla
Etapas del escalamiento
En cada una de las etapas de escalamiento se evalan algunos aspectos del proceso:
1. Escala de laboratorio se llevan a cabo:
- La seleccin de cepas
- Estudios bsicos de cinticas de crecimiento
- Niveles de expresin
- Seleccin del medio, etc.
2. Planta piloto se optimizan las condiciones de operacin
- Forma de operacin
- Flujos, presiones
- Temperaturas
- Velocidades de agitacin, etc.
3. Escala industrial se lleva a cabo la produccin del producto de inters a niveles rentables.
El escalamiento ms difcil es entre la escala de laboratorio y la planta piloto, debido a:
- El diseo de los equipos, dado que el fluido dinmico es diferente en cada escala.
 - Tamao de los electrodos .
Resultados a obtener de un proceso de escalado
- Algoritmos de escalado: permiten determinar las condiciones de proceso a una escala superior.
- Optimizacin de procesos: durante el proceso de escalado se seleccionan las condiciones
ptimas y que aporten mayor viabilidad al proceso.
- Determinacin de condiciones de trabajo a escala industrial.
- Diseo de equipos: el proceso de escalado permite adaptar las condiciones de proceso a un diseo
de equipo preexistente.
- Asistencia en la implantacin industrial: los procesos de escalado son clave para asegurar el xito
en la implantacin industrial de un proceso.
- Optimizacin de procesos por ingeniera inversa. Scale-Down: se pueden disear sistemas a
escala de laboratorio que permitan la optimizacin de procesos ya implantados directamente.

Diferencias en la obtencin de una sustancia en Laboratorio y a gran escala (Industrial

Obtencin de una Sustancia en el Laboratorio

- Se emplean masas o volmenes de reactivos muy pequeos: 1 100 1000 ml

- Los tiempos no importan (muchas veces son largos o estn fraccionados en das)
- Recipientes empleados: los clsicos utilizados en laboratorio
- No se calculan costos
- El producto final tiene una masa en mg o menos
Obtencin de una Sustancia a Gran Escala (Industrial)

- Se emplean masas o volmenes de materias primas en miles de kg o litros

- Los tiempos s importan
- Los ciclos deben durar poco tiempo y son continuos
- Los recipientes son de grandes volmenes
- Los costos s importan!!!
- El producto a obtener es en miles de g o kg
Criterios del escalado
Los ms tpicos son:
- Mantener constante la potencia por volumen utilizada, P/V
- Mantener constante el coeficiente volumtrico de transferencia de masa, kLa
- Mantener constante la velocidad de la punta de las paletas del agitador, n . d
- Mantener constante el tiempo de mezclado
- Mantener constante el nmero de Reynolds, Re
Anlisis general del proceso de cambio de escala
el cambio de escala se entiende como la instalacin y operacin de un equipo a escala industrial, cuyo
diseo y condiciones de operacin se basan en parte en la experimentacin y demostracin a una menor
escala de operacin.
Es bien conocido que en la industria qumica y farmacutica los procesos comerciales se deben basar en
datos experimentales, obtenidos a nivel de laboratorio y planta piloto. En el caso de reacciones bioqumicas
stos datos son an ms necesarios, ya que en general, se trata de procesos ms complejos.
Las distintas metodologas de cambio de escala tienen como objetivo poder anticipar los efectos del cambio
de escala.
Factor de Escala
La complejidad del proceso y el nivel previo de conocimiento del mismo suelen fijar el denominado factor de
escala, que ser tanto mayor cuanta mayor seguridad y experiencia se tenga en el cambio de escala del proceso
estudiado.
 Escala de Laboratorio
Se llevan a cabo:
La seleccin o mejora de cepas.
Se busca nuevos productos.
Se estudia los mecanismos de control.
Estudios bsicos de cintica de crecimiento.
Niveles de expresin.
Seleccin del medio
En Planta Piloto
Se optimizan las condiciones de operacin:
Forma de operacin, flujos y presiones.
Tener presente los efectos de aireacin, temperatura , control de pH y velocidades de agitacin, etc.
Se estudia la dinmica del cultivo, control del sistema de alimentacin para aumentar el Rendimiento y
la productividad
Escala Industrial
En la Escala Industrial se lleva a cabo la produccin del producto de inters a niveles rentables.
NOTA: el escalamiento ms difcil es entre la escala de laboratorio y la planta piloto debido al diseo de los
equipos, dado que la fluidodinmica es diferente en cada escala.
Teora de la similitud
La descripcin cuantitativa de los procesos biolgicos se enfrenta a la dificultad, incluso la imposibilidad, de
plantear y resolver el conjunto de ecuaciones matemticas que se requieren, en especial cuando se quiere hacer a
gran escala de operacin.
Clases de similitud
La similitud se divide en distintas clases, de acuerdo con la naturaleza de las variables que obedecen a la anterior
ecuacin, puede tener:

Similitud geomtrica
Similitud dinmica
Similitud trmica
Similitud msica (concentracin)
Similitud (bio)qumica
Finalidad del cambio de escala
La finalidad del cambio de escala es la seleccin de las condiciones de diseo que aseguren que los efectos de
las distintas variables sobre un proceso es el mismo en unidades de distinto tamao. Con ello se pueden lograr
rendimientos y calidad de productos similares
Consecuencias del cambio de escala de operacin
En teora, una reaccin qumica o bioqumica tiene lugar a una velocidad que es independiente del tamao del
reactor y de su geometra. No obstante, la velocidad de reaccin est afectada por procesos fsicos de transporte
de cantidad de movimiento, materia y energa, que normalmente estn controlados por la estructura y tamao
del reactor.
Algunas consecuencias del cambio de escala son:
1. Influencia en la calidad de los cultivos
2. Influencia en la calidad de los cultivos
Optimizacin de procesos por ingeniera inversa. Scale-Down
Se pueden disear sistemas a escala de laboratorio que permitan la optimizacin de procesos ya implantados a
escala industrial.
Objetivos del scale-down
Proveer un sistema experimental ms pequeo que replique las condiciones que existen en la gran escala.
Imitar o reproducir las instalaciones a una escala ms chica.
Los parmetros pueden ser evaluados mas rpidamente, y a menor costo.
Los clculos usados en scale down son los mismos que para el scale up (gran escala).
Nmero de flujo del impulsor (NQ
es la relacin entre la capacidad de bombeo o caudal (Q) (capacidad de distribucin del fluido o flujo interno del
sistema) entre la velocidad del impulsor y su dimetro. Por lo tanto, la capacidad de bombeo es el flujo generado
por el impulsor, por ende, el total de material descargado o puesto en movimiento por el impulsor