Análisis líquido seminal

Grupo 2: Lizeth Aguirre, Mishell Bonifaz, Stalin Flores, Rebeca Martinez, Vanessa Soria, María Fernanda Vaca
¿Qué es el espermograma?

Espermograma

Prueba esencial en análisis

de infertilidad y las
enfermedades genitales
masculinas.

Evaluación de Evaluacion de líquido

espermatozoides y seminal: función de los Presencia de células:
Espermatogenesis espermatozoides y glándulas leucocitos y las bacterias.
sexuales accesorias
Pruebas para evaluar

 Espermatograma básico (evaluar el semen y los espermatozoides)

 Apariencia
 Volúmen
 Número de espermatozoides
 Motilidad
 Morfología
 Vitalidad
 Presencia de leucocitos
 Pruebas inmunológicas
 Anticuerpos contra espermatozoides
 Pruebas funcionales
 Unión del espermatozoide a la zona pelúcida
 Penetración al ovocito
 Cultivo de espermatozoides
 ESPER
MATO
G É NE
SI
S

Proceso de paso de células madres germinales a células hijas espermatozoides.

Espermatogénesis

• Desde una célula diploide (46c XY) se produce 4

células haploides (23c x o y) flageladas.
• Ocurre en los túbulos seminíferos (células de
Sertoli) de los testículos.
• Comienza en la pubertad y perdura toda la vida.

Espermatogenesis dura 60 días

Etapas de la Espermatogenesis

División mitótica de
Espermatocitos Espermatocitos
la espermatogonia División meiótica
primarios (2n) secundarios (1n)
(2n)

Espermatozoides Espermatides (1n)

maduros en las Ciclo de meiosis
células de Sertoli 23 cromosomas
Proceso de espermiogénesis (10 a 15 días)
Espermatozoide

Cabeza: núcleo haploide cubierto por

acrosoma (hialuronidasa y acrosina) un par
de centriolos.
Segmento intermedio o cuerpo: contiene
alta carga mitocondrial contiene ATP para
movilidad.
Cola o fragelo: da movilidad al
espermatozoide.
ESPERMATOGRAM
A

Análisis de semen
Causas para realizar un espermograma
 Entregar una hoja de instructivo con la forma de toma de
Toma de muestra muestra y traslado.

 Se debe entregar la muestra con el nombre del paciente, periodo de abstinencia, fecha y hora de recolección
de muestra.
 Recoger la muestra en 2-7 días de abstinencia.
 Para el análisis de revisa dos muestras, periodo entre de 7 días a 3 meses.
 Recoger la muestra en una dependencia privada cercana al laboratorio para que no interfiera en el análisis.
 La muestra se obtendrá por masturbación, directa al recipiente.
 Si se van a realizar pruebas de espermatozoides es fundamental separar el plasma seminal antes de una hora
de la eyaculación.
Consideraciones

Para un buen estado de la muestra:

 Se recomienda el uso de recipientes estériles de plástico, con boca ancha y tapa rosca.
 Se recomienda el orinar, asear el area y manos antes de la toma de muestra.
 Existen condones especiales para la toma de muestra en casos excepcionales.
 NO recoger por Coitus interruptus.
 La muestra debe ser completa, si no fue recogido en su totalidad no se procesa.
 La muestra debe ser transportada de 20-40°C.
Valores normales
Terminos importantes
ESPERMATOGRAM
A

MACROSCÓPICO
 Licuefacción • El semen se coagula y por PSA en 5-40 min vuelve a licuarse.
• Es necesario para el análisis, si no se da se diluye la muestra con
(significado clínico controvertido) solución salina.

Apariencia
• Homogénea, color blanco opalescente.
• ANORMAL: amarillo- ictericia / rojo - hematospermia

• Normalmente ≥ 2ml, gracias a secreciones glandulares.

Volumen Medido por tubos graduados o pipeta, NUNCA EN JERINGA.

•
• Menos a 2ml: eyaculación retrograda o deficiencia.
• Más a 6ml: varicocele o larga abstinencia.
RESULTADOS
 • Con ayuda de una pipeta se evalua caida libre de las gotas y
la longitud del filamento que forma.
Viscocidad • Normal de 2cm de filamento con gotas pequeñas y definidas,
disminuye en inflamación de prostata y aumenta en Ac.
Antiespermatozoides.

• Debe ser medido en la primera hora con ayuda de papel de

pH.
pH • Normal: 7.2 - 7.8, mayores en infección o problemas de
secrecion, menor a 7 + azoospermia en obstrucción de vias
eyaculatorias o ausencia de vasos deferentes.
ESPERMATOGRAM
A

MÍCROSCÓPICO
Consta de:

MOTILIDAD VITALIDAD RECUENTO

EXAMEN
MORFOLOGÍA
CITOBACTERIOLÓGICO
 Motilidad

 Se observa con 10uL de muestra en

un portaobjetos con AT de 400X-
600X.
TIPOS DE MOTILIDAD DE
ESPERMATOZOIDES

Motilidad “a” Motilidad “b” Motilidad “c” Motilidad “d”

• Rápido y • Motilidad • Motilidad no • Inmóviles

progresivo progresiva progresiva.
• Velocidad ≥ lenta.
25 um/seg. • Velocidad 5-
25 um/seg
 Calcula el porcentaje de los espermatozoides vivos y
Vitalidad muertos.

1. Se mezcla 10-15uL de semen y una gota de

colorante con eosina 0.5% en un portaobjetos.
MÉTODO DE COLORACION CON EOSINA
2. Dejar reposar 30 seg.
3. Contar 200 espermatozoides en AT de 400X.
4. Calcular porcentajes.

VIVOS: no MUERTOS:
coloreados, adquieren la
membrana intacta. coloración.
Recuento

 Se utiliza la cámara Neubauer.

 Contar en el cuadrante central.
 Se diluyen 10uL de líquido seminal con solución salina
 Muestras:
 menos de 10 espermatozoides en el cuadrado central .
 10 – 40 espermatozoides en el cuadrado central se puede contar sólo
en 5 cuadrados pequeños
Recuento
FACTOR DE DILUCIÓN Y CONVERSIÓN

 El resultado final corresponde al número ( en millones) de

espermatozoides por mL de eyaculado
Resultados de recuento:

 Contar sólo los espermatozoides completos con cabeza y cola. Los defectuoso se debe contar aparte e
informar en el resultado

Polizoospermia Oligozoospermia Azoospermia

• Recuentos mayores de 250 • asociado con alteraciones • ausencia de
millones por mL cromosómicas, varicocele, espermatozoides en el
• Se asocia con problemas endocrinos, semen
anormalidades exposición a rayos X, • asociado con falla testicular
cromosómicas, bajo medicamentos y productos severa, resultado de
contenido de ATP, función químicos de origen vasectomía realizada con
acrosomal alterada destructivo éxito
Resultados no concordantes

 Resultados con variación en el contaje: Muestra no homogénea, No se mezclo adecuadamente, Presencia de

grumos

Preparar nueva dilución mezclándola bien o diluyendo más

MORFOLOGÍA

 Evaluación de las anormalidades morfológicas debe incluir los defectos de la cabeza, segmento intermedio,
cola y presencia de gotas citoplasmáticas mayores que 1⁄3 del tamaño de la cabeza normal
 La cabeza debe ser ovalada 4-5 µm
 La región acrosomal debe ocupar entre el 40% y el 70% de la cabeza
 El segmento intermedio debe tener un ancho menor de 1 µm y una longitud aproximada de una cabeza y
media
 La cola debe de ser derecha y uniforme
 Para el recuento morfológico diferencial se debe incluir los espermatozoides con cola, las células inmaduras
no se cuentan pero se deben de informar
 Los espermatozoides se clasifican como normales, defectos de cabeza, segmento medio o defecto en la cola
 Espermatozoide normal

RESULTADOS
DE
MORFOLOGÍA
DEFECTOS DE LOS ESPERMATOZOIDES
 Espermatozoides con defecto de cabeza

Espermatozoide con vacuolas anormal

Espermatozoides con defecto en la cola
Gota citoplasmática anormal
OTROS ELEMENTOS CELULARES

 Identificar leucocitos, formas inmaduras de espermatozoides, células del tracto uretral y de la próstata y
microorganismos
 Presencia de formas inmaduras hace pensar un daño en la espermatogénesis
 Celulas redondas con concentración superior a 2 millones por mL se debe hacer la diferenciación
 Numero elevado de leucocitos sugiere presencia de inflamación o de infección en las glándulas accesorias sexuales,
asociado con mala calidad del semen
 El semen normal debe contener 1 millón de leucocitos por mL
Muestra de liquido seminal
contaminado
Leucocito

Bacterias

Célula germinal
inmadura
AGLUTINACIÓN

 La aglutinación es sugestiva de presencia de anticuerpos antiespermatozoides y se evalua al momento de

determinar la motilidad del espermatozoide
 Se informa en cruces o en escala

ANTICUERPOS ANTIESPERMATOZOIDES
Generalmente son IgA e IgG y rara vez de IgM
• Puede ser producido por trauma testicular, infecciones genitales,
obstrucción de conductos genitales
• Los anticuerpos pueden inducir la aglutinación, inmovilización o lisis
de los espermatozoides
PRUEBAS DE DETECCIÓN DE
ANTICUERPOS

 Técnica de inmunoesferas y la reacción mixta de antiglobulinas (MAR)

 La prueba con inmunoesferas consiste en unas esferas de poliacrilamida que están recubiertas con
antiinmunoglobulinas humanas, que se adhieren a los anticuerpos antiespermatozoides si están presentes en
el semen
ESPERMATOGRAM
A

OTRAS PRUEBAS
Pruebas especializadas

Evalúan la función de los

espermatozoides
Pruebas de penetración

 En el trayecto hacia el ovocito el espermatozoide sufre varios cambios

para lograr penetrarlo.
 Esta prueba aporta buena información sobre varios pasos de
fertilización como son:
 La reacción acrosomal,
 La penetración de la membrana plasmática
 La descondensación de la cromatina.
Cultivo de semen
 Se realiza cuando existe un contaje de
leucocitos mayor a 1000000 por mL.
 Puede indicar la presencia de una
infección en las glándulas accesorias
genitales.
Toma de Muestra
• La muestra debe ser tomada con
mucho cuidado por riesgo de
contaminación
• El paciente debe orinar antes de
recoger la muestra
• Lavarse manos y área genital con
Jabón y secarse
• La muestra se debe recolectar en un
recipiente estéril.
Nota: El cultivo debe realizarse lo más
rápido posible luego de determinar el
volumen del eyaculado.
Cultivo de semen
El semen debe diluirse antes de cultivarse.
Resultados
0,2 mL de semen + 0,2 mL de SS estéril
> 3.000/mL 1000 – <1000/mL
se debe 3000/mL Contaminació
identificar la Limite n
De esta solución de se toman 50uL y se extiende bacteria +
ATB
homogéneamente.

Agar sangre a 37°C durante la noche

Se cuentan las colonias y se multiplica por 40 para

obtener UFC/mL