ANALISIS DE

FLUIDO
SEMINAL
TEMA 04
ALUMNOS:
CURSO:
SECCION:
 EL 1
Evaluar el semen y los
espermatozoides

ESPERMOG
RAMA
Evaluación de la función de los órganos genitales
2 masculinos, el estudio de la pareja infértil y la
búsqueda de espermatozoides después de una
vasectomía o de una reversión de una vasectomía.

Tiene sus limitaciones y la mas importante es la

variabilidad de los parámetros en un mismo individuo.
3 Se sugiere hacer al menos dos espermogramas en
muestras diferentes, antes de hacer un diagnostico
definitivo.
En general, el estudio del
semen mide:
 Volumen del semen
 Consistencia del semen
 Concentración de espermatozoides
 Número total de espermatozoides
 Movilidad de los espermatozoides
 Número de espermatozoides normales y
anormales, en relación a su forma y medida
 Coagulación y licuación
 Fructosa
 pH
 Número de espermatozoides inmaduros
 Número de leucocitos
 RECOLECCION
DE LA
MUESTRA Tapado en forma
hermética
OMS y la Sociedad Europea de Embriología y
reproducción Humana, la muestra seminal debe ser
tomada con un periodo de abstinencia sexual de 2 a
7 días.
Marcado con el nombre
del paciente

Deber ser depositada en un recipiente estéril o Transportado a

temperatura
limpio, de boca ancha. corporal( 30°C- 36°C)

Entregado en el laboratorio
hasta una hora después
En caso de perdida de alguna gota de semen, la de tomada la muestra
muestra no debe ser llevada al laboratorio y se debe
repetir el procedimiento con los mismos días de
abstinencia.
 MANIPULACION DE
LA MUESTRA
Las muestras de semen pueden tener agentes
infecciosos peligrosos (VIH, hepatitis, herpes,
gonorrea, sífilis, etc.). La utilización de
vestimenta adecuada, guantes, así como evitar
cualquier contacto directo con la muestra por
parte del personal debe ser de estricto
cumplimiento
 EXAMEN MACROSC
Licuefacción
• Coagulación  inmediato a la eyaculación
• Licuarse  5 a 40 minutos después por
acción del antígeno

• Normal  observar coágulos gelatinosos y

no se asocian a infertilidad.

• La mezcla debe ser tratada con cuidado

antes de tomar una parte para el análisis
 RECUENTO ACERTADO

• NO SE LICUA MUESTRA  agregar

volumen de solución salina o medio de
cultivo
• INFORMAR
 Consistencia o viscosidad
Evaluación  aspirar en pipeta la muestra
 permitir caída libre de gotas y observar
longitud de filamento

Muestra con Muestra con

viscosidad normal viscosidad aumentada

Gotas de mayor
Gotas pequeñas y
densidad
definidas
Filamentos > 2cm
Filamentos <2cm
Inflamación crónica 
alto contenido de moco

La viscosidad puede interferir con  movilidad , concentración, detención de anticuerpos anti

espermatozoides
 Apariencia  color , olor y volumen
Homogénea Hematospermia

Color  entre
Presencia de sangre en semen
blanco y gris claro

Ocasionalmente Causado por

amarilloso 
ictericia
Epididimitis
Prostatitis
Orquitis

Bloqueo por agrandamiento de

próstata
 Volumen 5%  lo constituye el epidídimo y
testículos

46 - 80%  vesículas seminales

Conformado por las secreciones de
diversas glándulas

13 - 33%  próstata
5%  espermatozoides y
testosterona
46 – 80%  enzimas de 2 - 5%  glándulas bulbouretrales y
coagulación de semen y ureterales
fructuosa

13-33%  antígeno específico

de próstata
2 -5%  sustancias lubricantes y
anticuerpos de infertilidad
Volumen Medición  cilindro graduado de base
cónica y con ayuda de una pipeta (5 –
10ml)

Prohibido uso de jeringas plásticas 

alteración

Cantidad : < 1.5 – 2 ml

Hipoespermia  inferior al rango  deficiencia

en secreción de V. seminal
Hiperespermia  supera al rango  asociado a
varicoceles y periodos largos de abstinencia.
pH  depende su valor para indicar posibilidad de
infección

Tiempo • Dentro de la primera hora de

recolección de eyaculación

• Se utiliza una gota de semen

Proceso sobre papel de pH  lectura a
los 30 seg.

Valores
parámetr
• [7.2 –
o 7.8 ] • < 7.8  infección y/o
anormalidad en función
Valores secretora
anormale • > 6.5 o 7  en Azoospermia
s indica obstrucción de vías
eyaculatorias
PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

La muestra a temperatura de 37 °C

Si la muestra no esta bien mezclada dará valores

diferentes

Si el primer análisis no se observa

espermatozoides se procede a centrifugar el
semen.
EXAMEN MICROSCOPICO
La alícuota que se usa para este tipo de estudio debe
proceder de una muestra licuada, homogeneizada, con
filancia inferior a 2 cm y sin moco, coágulos ni grumos.

Una vez preparada la muestra consiste en observar:

Agregaciones Aglutinaciones Movilidad

Anticuerpos anti
Vitalidad espermatozoide
s
 AGREGACION
La adherencia entre espermatozoides
inmóviles o espermatozoides móviles con hilos
de mucus.

Células no espermáticas se considera

agregación no especifica y se registra como tal
AGLUTINACI
TIPOS
ON
A: cabeza-cabeza

B: cola - cola

C: solo punta de la cola

D: cabeza- cabeza
cola – cola

E: maraña de
aglutinación
MOVILIDAD
● Para valorar la movilidad dejar la muestra en reposo 1 minuto a
37°C, y observar al microscopio evaluando la movilidad de 200
espermatozoides por preparación.

Progresiva (PR): lineal o en círculos amplios,

independiente de la velocidad.

No progresiva (NP): se mueve pero no se

desplaza

Inmóviles (IM)
 VITALIDAD

El parámetro que evalúa la vitalidad de los

espermatozoides es útil para saber si los
espermatozoides inmóviles están vivos o
muertos. El porcentaje de espermatozoides
vivos se puede determinar por varios
métodos, siendo la coloración con eosina,
el método mas utilizado.

Se mezcla una gota del semen con una gota del colorante con eosina en una lamina portaobjeto y
se cubre con una laminilla, se deja reposar 30 segundos y procede a contar 200
espermatozoides.
 ANTICUERPOS
ANTIESPERMATOZOIDES

Los anticuerpos antiespermatozoides en el

semen usualmente son del tipo IgA e IgG, y
rara vez de tipo IgM debido a su gran
tamaño.

Su producción puede ser el resultado de un trauma testicular, infecciones

genitales, obstrucción de los conductos genitales. Los anticuerpos
antiespermatozoides pueden inducir la aglutinación, inmovilización o lisis de
los espermatozoides.
ANALISIS CLINICOS
DEL FLUIDO
Un análisis de semen, también llamado recuento espermático, mide la
cantidad y la calidad del semen y los espermatozoides de un hombre.
El semen contiene espermatozoides, las células del hombre que llevan
material genético.
 RECUENTO DE
ESPERMATOZOIDES

El recuento de espermatozoides se
realiza mediante cámaras de recuento
específicas como la cámara de recuento
de glóbulos blancos. El reporte se realiza
por centímetro cúbico o el total de
espermatozoides, que es el producto de
multiplicar el volumen por el número de
espermatozoides por centímetro cúbico.
 MORFOLOGIA

La evaluación de la morfología de los espermatozoides consiste en el examen

detallado de 200 espermatozoides en una placa coloreada con coloración de
Papanicolaou o con coloración de Gram, por duplicado.

Según la OMS, es normal

encontrar sólo el 30% de
los espermatozoides
normales en los individuos
fértiles.
RECUENTO DE OTRAS CELULAS
DIFERENTES A LOS
ESPERMATOZOIDES:
● Células epiteliales de Se cuentan las células en los cuadrados que están
la uretra ubicados en las esquinas del retículo de Thomas
● Leucocitos (Cuadrantes 1,3,7 y 9)
● Células germinales

Las células germinales o células inmaduras

incluyen espermátidas y espermatocitos pero rara
vez incluyen a espermatogonias
MORFOLOGÍA ESPERMATICA:
● ≥4 % de formas normales. Este valor está sujeto
a estudios multicéntricos que realiza la OMS
● Dos o más extendidos deben ser preparados de
la muestra de semen hay que tomar en cuenta
que puede fallar el protocolo de tinción o algún
extendido puede romperse.
● Para valorar la morfología hay que conocer muy
bien las partes de un espermatozoide normal
con sus respectivas dimensiones, al respecto
básicamente el espermatozoide cuenta con una
cabeza, pieza media, pieza principal y pieza final.
MORFOLOGÍA ESPERMATICA:
La cabeza: Cabeza oval de 5µm de largo, 3µm de
ancho y 1,5µm de espesor

Cola: 55 um

○ Pieza Media: 5 μm de longitud

○ Pieza Principal: 45 μm de longitud

(alrededor de 10 veces el tamaño de la
longitud de la cabeza)

○ Pieza Final: 2 a 5 μm de largo y solo 0,1 μm

de grosor
TINCION RAPIDA
Se puede aplicar en muestras que no
superan al 1x106 /mL de células Fijación: Etanol al 70 - 80 % por 1
redondas, debido a que no entrega minuto.
detalles morfológicos que nos
permitan diferenciar claramente entre
leucocitos y células del epitelio
PROTOCOLO SIMPLIFICADO
germinativo
SOLO PARA
ESPERMATOZOIDES.
ESTUDIO BIOQUIMICO DEL FLUIDO
● Elección de los marcadores bioquímicos:

● Las indicaciones más frecuentes de la bioquímica seminal son:

○ Azoospermia
○ Oligozoospermia
○ Un volumen pequeño
○ Una infección genital
○ Una disminución de la movilidad (< al 20%)
○ Otros: viscosidad anormal, preparación de esperma para FIV o ICS.
Determinación de marcadores bioquímicos

● A) Obtención del plasma seminal

● B) Pretratamiento del plasma seminal
● C) Técnica UV a 340nm
● D) Técnicas colorimétricas
Expresión de los resultados
● Los valores normales de los marcadores
seminales varían de un laboratorio a otro,
en función de las técnicas utilizadas.
Cada laboratorio tiene que establecer sus
propios valores usuales. Tienen que ser
establecidos a partir de esperma
procedente de sujetos que ya hayan
procreado. Los resultados se expresan en
concentración o en cantidad por
eyaculado.
ANÁLISIS DE FLUIDO SEMINAL
VASECTOMÍA Y VASOVASOSTOMÍAS.
A. Semen
postvasectomía
Análisis en fresco Análisis sedimento

Si en el análisis en fresco no se observan

Se recomienda que el laboratorio analice las
muestras de semen lo antes posible con un
límite máximo de 4 horas desde la eyaculación.
espermatozoides se transferirá toda la muestra de
semen a un tubo de base cónica y se centrifugará
a 1000 g de FCR durante 10-15 minutos.

Se separará el sobrenadante y se homogeneizará

La muestra se homogeneizará mediante agitación
mecánicamente el sedimento en 100 µl del mismo
suave y se situará una alícuota de 10 µl entre
plasma seminal y se estudia de igual manera a la
portaobjetos y cubreobjetos de 22 x 22 mm y se
descrita cuando se analiza el semen fresco,
examinarán no menos de 20-30 campos con un
señalando la presencia o ausencia de
microscopio en contraste de fases.
espermatozoides y su movilidad.
Semen de
prevasovasostomía
Un análisis de semen pre intervención es
recomendable, ya sea para comprobar la
ausencia de espermatozoides, como para
obtener el volumen de semen de muestra inicial
preoperatorio, ya que un bajo volumen del
semen, indicaría además la necesidad de la
realización de una ecografía antes de la
intervención para localizar obstrucciones
adicionales del tracto urogenital

La recomendación de obtención de muestra y posterior

análisis es igual que el análisis de semen
posvasectomía junto con la medición del volumen del
eyaculado.
Semen
posvasovasostomía
Resultados del semen pre y
posvasovasostomía
A los seis meses de la intervención se
determinarán los parámetros básicos
seminales. En función de los resultados,
En el análisis prevasovasostomía, se
puede ser conveniente realizar
adopta el formato de resultados del
determinaciones de fructosa, ácido análisis de semen posvasectomías
cítrico y maltasa (glucosidasa neutra) ya descrito.
para valorar las secreciones de la
vesícula seminal, próstata y epidídimo.

en cuanto al análisis de semen

posvasovasostomía el informe que el
laboratorio tenga establecido.