MONITOREO

MICROBIOLÓGICO DE
ÁREAS ASÉPTICAS Y NO
ASEPTICAS DE
MICROBIOLOGÍA, ÁREA DE
MUESTREO Y PRODUCCIÓN
HUMANOS
 OBJETIVO

Establecer los pasos a seguir para realizar la evaluación microbiológica de las áreas asépticas y no
asépticas, equipos y el personal involucrado en la manufactura a través de un muestreo
representativo, que permita demostrar que la calidad microbiológica de las áreas se encuentra dentro
de los límites exigidos por las Buenas Prácticas de Manufactura.

ALCANCE

El procedimiento aplica para el monitoreo microbiológico de ambientes, superficies, equipos y

personal de todas las áreas asépticas y no asépticas de Producción Humanos, Microbiología y Área
de Muestreo de James Brown Pharma Pifo
 RESPONSABILIDADES

▰ Jefe de Control de Calidad: Responsable de aprobar, cumplir y hacer cumplir el POE.

▰ Analista de Microbiología: Responsable de elaborar, difundir y mantener actualizado y

cumplir el presente POE. Responsables de leer resultados y elaborar los respectivos
informes. 

▰ Ayudantes de Microbiología: Responsables de realizar el monitoreo al personal,

ambiente (equipo MAS 100)y superficies de las diferentes áreas.   

▰ Personal de Producción: Responsables de solicitar al área de Microbiología las cajas

con Agar Tripticasa de Soja (TSA) y con agar Sabouraud Dextrosa (SAB) con el
formato correspondiente al área a monitorear. Son los responsables de entregar las Cajas
Petri y los formatos correctamente llenos al área de Microbiología.
 DEFINICIONES

▰ Estéril: Ausencia total de microorganismos viables u organismos con potencial de reproducción.

▰ Aséptico: Se refiere a la ausencia de microorganismos. En el procesamiento aséptico, se refiere a

métodos y operaciones que minimizan la contaminación microbiana en ambientes donde se llenan
y/o ensamblan productos y componentes esterilizados.

▰ Cuarto limpio: Un cuarto dónde se controla la concentración de partículas del aire para que cumpla
con una Clase específica de limpieza del aire con respecto a partículas. Además, se monitorea la
concentración de microorganismos en el ambiente.

▰ Plan de muestreo: Plan documentado que describe los procedimientos y métodos para muestrear un
ambiente controlado, identifica los sitios de muestreo, la frecuencia de muestreo y el número de
muestras, y describe el método de análisis y cómo interpretar los resultados.
▰ Sitios de muestreo: Ubicación geográfica documentada, dentro de un ambiente controlado, donde se hace el muestreo
para evaluación microbiológica. En general, los sitios de muestreo se seleccionan según su potencial de entrar en
contacto con el producto/envase/cierre.

▰ Zona crítica: Por lo general, el área completa donde el producto, así como los envases y cierres están expuestos en el
procesamiento aséptico.

▰ Hisopos para muestreo microbiológico: Dispositivos usados para retirar microorganismos de superficies irregulares o
regulares para su posterior cultivo e identificación de población microbiana dicha superficie.

▰ Equipo MAS 100: El muestreador de aire es un instrumento de alto rendimiento el cual aspira aire a través de una
placa perforada, este equipo opera con un dispositivo de succión el mismo que permite monitorear continuamente el
volumen de aire aspirado.
 
▰ Método sedimentación: Método pasivo empleado para la evaluación microbiológica del ambiente, para lo cual se
emplean placas de Petri con un medio de cultivo sólido adecuado (Agar Tripticasa Soya, Agar Sabouraud Dextrosa)
exponiendo las mismas en el ambiente a evaluar de manera que los microorganismos presentes en el área se depositen
sobre la superficie por efecto de la gravedad durante un tiempo.
IDENTIFICACIÓN DE LAS CAJAS UTILIZADAS PARA EL
MONITOREO DE SUPERFICIES Y EXPOSICION DE
AMBIENTES

▰ Monitoreo de superficies: Agar Neutralizante (NET).

▰ Monitoreo de ambientes con cajas de exposición: Agar Trypticasa de Soya (TSA) y
Agar Sabouraud Dextrosa (SAB).
 IDENTIFICACIÓN DE CAJAS UTILIZADAS
PARA EL MONITOREO DE
PERSONAL

▰ Monitoreo de personal: Agar Nutriente (AN)

 Frecuencia de control de áreas

Cada vez que haya

Áreas asépticas
Monitoreo de superficies, producción
ambientes, aire (equipo MAS 100)
y personal
Áreas no asépticas Dos veces por semana

Monitoreo de ambientes con cajas Áreas asépticas y no Todos los días en que haya
de exposición asépticas producción

Pasillos, oficinas, áreas de lavado y

Monitoreo de aires con equipo Una vez al mes
áreas de almacenamiento de equipos
MAS 100
limpios de producción
Monitoreo de superficies
y aire con equipo MAS Baños de producción Una vez al mes
100

áreas asépticas y no
Monitoreo de superficies
asépticas, área de Tres días consecutivos
y aire con equipo MAS
muestreo y de al inicio del año
100
microbiología
 Monitoreo en áreas asépticas y no asépticas
El ayudante de Microbiología puede ingresar a las diferentes áreas productivas en cualquier momento
(inicio, medio, final) de la preparación o envase de productos para realizar el monitoreo de aires,
superficies y personal.

Monitoreo superficies

Técnica de hisopado para

superficies irregulares o de
difícil acceso

Técnica de contacto con

placas (Rodac) para
superficies planas
 Monitoreo de ambientes con cajas
de exposición
▰ Los operarios deben solicitar las cajas y el formato al área de Microbiología.
▰ En cada formato se detalla el número de cajas y puntos que se deben monitorear.
▰ Identificar las cajas Petri

▰ En caso de que al operario por accidente se le rompa o abra alguna caja debe solicitar
una nueva caja.
▰ Colocar las cajas Petri abiertas en los sitios indicados en el formato del área que
se esta evaluando.
▰ Dejar expuestas de 4-5 horas. Si el proceso de trabajo es muy corto dejar las
cajas expuestas durante todo el proceso de manufactura.
▰ Si el proceso de trabajo sobrepasa las 5 horas debe solicitar al área de
Microbiología nuevas cajas.
▰ Una vez concluido el período de exposición, volver a tapar las cajas Petri
teniendo cuidado de no tocar el Agar.
▰ Enviar las cajas identificadas y el formato de exposición del área correctamente lleno al área de
Microbiología.

▰ Si existe alguna novedad durante el monitoreo del área registrar en observaciones en el

respectivo formato.
Gráfico del área Puntos que deben ser monitoreados
Monitoreo de ambientes con
muestreador de aire MAS 100
 Monitoreo de personal en áreas
asépticas y no asépticas
▰ El monitoreo del personal debe incluir a todas las personas que se encuentren en
el proceso de producción incluido el ayudante de Microbiología que realiza el
proceso.
▰ El muestreo se realiza por la técnica de hisopado en los siguientes puntos:
  PUNTOS DE MUESTREO
1 Escafandra
2 Cierre
3 Pliegues del codo derecho

4 Pliegues del codo izquierdo

5 Muñeca derecha

6 Muñeca izquierda

7 Guante mano derecha

8 Guante mano izquierda

▰ Identificar las cajas Petri con Agar Nutritivo
▰ Sacar el hisopo estéril cuidadosamente, remojarlo en caldo LPT y presionarlo contra las paredes
internas del frasco con movimientos de rotación para remover el exceso de medio de cultivo (Para
cada punto de muestreo se debe utilizar un hisopo diferente).
▰ Frotar lentamente, en un cuadrado de 25 cm2 de la superficie a muestrear, haciendo trazos en
sentido horizontal, vertical y diagonal.
▰ Con el hisopo realizar sobre la caja de Agar Nutritivo un estriado como se indica en la figura 1

▰ Una vez tomada la muestra, desinfectar los puntos de muestreo con alcohol etílico al 70%.
▰ Se debe llevar las cajas Petri correctamente identificadas al área de Microbiología
 Evaluación de los resultados obtenidos

▰ Los límites de alerta se determinaron tomando como base el 50% del límite de especificación
establecida.
▰ Los límites de acción se estableció que son iguales a los límites de especificación establecidos
para el monitoreo de las diferentes áreas, y personal, estos parámetros están indicados en el formato
de cada área.
Cuando los resultados de los monitoreos se encuentren en el nivel de alerta se debe comunicar al
Jefe de Producción vía telefónica y por correo electrónico para que se tomen las medidas de control
de cada área.
 RECOMENDACIONES

▰ El monitoreo de superficies que entran en contacto directo con partes o productos estériles se
lo debe llevar a cabo únicamente después de haber completado las operaciones de producción
▰  Una vez concluido el monitoreo de ambiente con cajas de exposición el operario responsable
de cada área debe entregar inmediatamente las cajas Petri con TSA y SAB al área de
Microbiología para su posterior incubación. Esto no aplica para procesos productivos que estén
fuera de la jornada de 8 horas en cuyo caso las cajas deben ser entregadas al siguiente día a
primera hora.
▰ En el caso de que se terminen las cajas de exposición con medio de cultivo TSA y SAB, como
medida alternativa se utilizarán cajas con medio de cultivo AN (Agar Nutritivo). 
▰ Las muestras de superficies, así como también las muestras de personal se tomarán por
duplicado, en Placas Rodac con Agar Neutralizante y cajas Petri con Agar Nutritivo.
gracias

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