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Actividad Antioxidante en pulpas de frutas:

Revisión a la aplicación del método ABTS.


Presentado por: Katia Marcela Gallego Lengua
Javier Said Petro Nisperuza
Joahn Armando Jiménez Gallego

Diplomado Bioprocesos y Biotecnología

Universidad de Córdoba
Facultad de ciencias básicas
Programa de Química
Montería-2021
1. Objetivos
1.1 Objetivo General

Realizar el estudio de la actividad antioxidante en pulpas de frutas por medio del


método de ABTS, mediante la revisión bibliográfica de la literatura

1.2 Objetivos Específicos

• Describir los procesos que se dan en los estudios para establecer la actividad
antioxidante por medio de ABTS
• Analizar las publicaciones sobre los estudios realizados para la actividad
antioxidante en pulpa de frutas
• Evaluar si las pulpas de frutas estudiadas poseen la actividad antioxidante
esperadas
2. Introducción
Las frutas como alimentos son fuente potencial de antioxidantes y aportan nutrientes como agua,
carbohidratos, minerales y vitaminas necesarios en la dieta.

El consumo elevado de frutas tiene un impacto positivo en la salud, debido a la


presencia de metabolitos capaces de neutralizar especies reactivas del oxígeno
(EROS) (Contreras-Calderón et al., 2010).
Flavonoides Antocianos

Prevención de
enfermedades
Los polifenoles en general presentes en frutas poseen además propiedades antiinflamatorias,
antialérgicas, antitrombóticas, antimicrobianas y antineoplásicas (Ruxton et al., 2006: Groh et al., 2013).

• Método ABTS
(2,2’-azinobis (3-etilbenzotiazolina-6-ácido sulfónico ))

Figura 1: Reacción de oxido - reducción del ABTS (Boligon et al., 2014).

¿Podemos hacer estudios y análisis sobre la actividad


antioxidante en las pulpas de frutas por el método ABTS?
En Colombia
la guayaba ocupa un tercer lugar en
importancia en la comercialización de frutas

Chaveli et al., 2009


3. Actividad Antioxidante por ABTS: Fundamentos

3.1 Estrés oxidativo causante de enfermedades.

Uno de los efectos negativos del oxígeno es que provoca oxidación de los lípidos o rancidez oxidativa.
El estrés oxidativo es uno de los principales factores causantes de muchas enfermedades humanas (Jeong
et al. 2019).

Los antioxidantes tienen acción estabilizadora sobre los radicales libres inhibiendo la peroxidación
lipídica
3.2 Actividad Antioxidante

La capacidad antioxidante de los alimentos está determinada por una mezcla de compuestos
antioxidantes con diferentes mecanismos de acción (Moo et al., 2014, 2015).

La actividad antioxidante denota la capacidad de un compuesto bioactivo para mantener la estructura


y función celular al eliminar de manera efectiva los radicales libres.

Prevención de
enfermedades crónicas

Cáncer Diabetes Enfermedades


cardiovasculares
3.3 Métodos para determinar el contenido de antioxidantes
La capacidad antioxidante depende del microambiente en que se encuentra el compuesto.

• Compuestos cromógenos:

ABTS DPPH DMPD DMPO FRAP

• Se puede medir la actividad de compuestos de naturaleza hidrofílica y lipofílica


• Se fundamenta en la cuantificación de la decoloración del radical ABTS •+
• Longitud de onda: 734 nm
• Los resultados se expresan en Trolox
4. Metodología

4.1. Método ABTS.

Para obtener el radical Formado el radical


ABTS•+

Se obtiene tras la Se diluye con etanol hasta tener


reacción de ABTS un valor de absorbancia entre
(7mM) con persulfato 0,70 (±0,1) a 754 nm
potásico (2,45mM)

Las muestras filtradas


Incubados a temperatura (antocianos) se diluyen con
ambiente (±25ºC) en la etanol hasta una inhibición del
oscuridad 16 h 20 al 80% en comparación con
la absorbancia del blanco

Tomado
Tomado de:
de: (KUSKOSKI
(KUSKOSKI et.,
et., al
al 2004)
2004)
Para determinar la A754 Añadir 20 μL de la muestra. A 980 μL de dilución del radical
a 30ºC
ABTS•+

• Se añade 20 μL de la muestra (dilución de antocianos) y se


Pasado 1 min mide de nuevo la A754

La absorbancia se mide de
forma continua
transcurridos 7 minutos

El antioxidante sintético de referencia, Se hace también con ácido ascórbico


Trolox, se ensaya a una concentración (0-20 mg/100 mL). Los resultados se
de 0-15 μM (concentración final) en expresan en TEAC (actividad
etanol, en las mismas condiciones antioxidante equivalente a Trolox)

Tomado de: (KUSKOSKI et., al 2004)


5. Resultados

5.1 APLICACIÓN DE DIVERSOS MÉTODOS QUÍMICOS PARA DETERMINAR ACTIVIDAD


ANTIOXIDANTE EN PULPA DE FRUTOS.

(KUSKOSKI et., al 2004)


5.2. ESTUDIO DEL CONTENIDO DE FENOLES Y ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE GUAYABA EN
DIFERENTES ESTADOS DE MADUREZ

Tabla 1: Valores de actividad antioxidante en las diferentes variedades de estado de madurez


(Restrepo., Olaya., 2012)
5.3 Polifenoles y Actividad Antioxidante del Fruto de Guayaba Agria (Psidium araca)

Zapata.,Cortes.,Rojano., 2013
6. Conclusiones
Podemos concluir que ciertamente contamos con alimentos como las frutas las cuales nos aportan
metabolitos secundarios de potencial antioxidante, como carotenos, licopenos, flavonoides, entre
otros. Los compuestos Los compuestos con propiedades antioxidantes son sustancias que tienen la
propiedad de neutralizar los radicales libres, disminuir el daño oxidativo y así prevenir o retardar la
aparición de diversas enfermedades de complejo diagnóstico.
Se pudo determinar que el método mas complejo y sencillo para evaluar la actividad antioxidante en
frutos es el método ABTS en donde es generado tras una reacción química, enzimática o también
electroquímica. Por medio de este método se pueden determinar compuestos de naturaleza hidrofílica
y lipofílica, este también a su vez nos presenta una ventaja y es que su espectro presenta distintos
máximos de absorbancia, por medio de este método se pudo analizar y evaluar la actividad
antioxidante en frutas como la guayaba donde nos arrojó datos que nos permite clasificarlos como
fruta con actividad antioxidante para prevenir diferentes enfermedades. Por último es uno de los
métodos más rápidos, originando resultados reproducibles y coherentes
7. Referencias Bibliográficas
• Contreras - Calderon, J., L. Calderon, E. Guerra y B. Garcia, Antioxidant capacity, phenolic content and vitamin C in pulp, peel and
seed from 24 exotic fruits from Colombia, Food Research International: 44 (7), 2047-2053 (2010).
• Groh I.A., Chen, Ch., Lüske, C., Cartus, A.T. y M. Esselen. Plant Polyphenols and Oxidative Metabolites of the Herbal Alkenylbenzene
Methyleugenol Suppress Histone Deacetylase Activity in Human Colon Carcinoma Cells. Journal of Nutrition and Metabolism: Article
ID 821082, 1-10 (2013).
• Chavely.D., Narvaez.C.,Restrepo.L. (3 Julio 2009) extracción de compuestos con actividad antioxidante de frutos de guayaba cultivada
en vélez-santander, colombia .Vol.32,No.6
• Jeong HK, Lee D, Kim HP, y Baek S-Hoon. (2019). Structure analysis and antioxidant activities of an amylopectin-type polysaccharide
isolated from dried fruits of Terminalia chebula, Carbohydrate Polymers.
• Moo-Huchin, V. M., Estrada-Mota, I., Estrada-León, R., Cuevas-Glory, L., Ortiz-Vázquez, E., Vargas, M. de L. V. y Sauri-Duch, E.
(2014). Determination of some physicochemical characteristics, bioactive compounds and antioxidant activity of tropical fruits from
Yucatan, Mexico. Food Chemistry, 152, 508–515. doi:10.1016/j.foodchem.2013.12.013
• Kusuki.E., Asuero.A., Troncoso.A., Mancini.J., (30 septiembre 2004) aplicación de diversos métodos químicos para determinar
actividad antioxidante en pulpa de frutos
• Olaya.J.,Restrepo.L., (2 mayo 2012) estudio del contenido de fenoles y actividad antioxidante de guayaba en diferentes estados de
madurez. Universidad Nacional de Colombia
• Zapata.K., Cortes.F.,Rojano.B., (7 Junio 2013) Polifenoles y Actividad Antioxidante del Fruto de Guayaba Agria (Psidium
araca). Universidad Nacional de Colombia

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