1.

ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE Y ANTIENZIMÁTICA IN VITRO Y

ANTINFLAMATORIA IN VIVO DEL EXTRACTO HIDROALCOHÓLICO DE
Caesalpinia spinosa “TARA”
Determinación de la actividad antioxidante
Se desarrolló aplicando dos métodos. El método de captación del radical 2,2-difenil-
1- picrilhidrazil (DPPH) según Brand-Williams (5), que consiste en preparar una
solución stock de 40 mg/100 mL de (DPPH), 1 mM en metanol y almacenamiento a
4°C protegida de la luz. Se calibra el espectrofotómetro con un blanco que contiene
400 μL del solvente de la muestra y 800 μL de metanol, luego se coloca en un tubo
de ensayo de 400μL de la muestra problema y 800 μL de la solución de trabajo de
DPPH y se agita. Se deja en un reposo durante 30 minutos alejado de la luz y se
lee la absorbancia a 517 ηm. Todos los extractos son medidos por triplicado a
concentraciones de 0; 0,8; 1,6; 3,2; 6,4; 12,4 μg/mL. Se emplea el mismo
procedimiento para la sustancia patrón Trolox®. Con los valores de las
absorbancias obtenidas se determina el porcentaje de captación de radicales libres
(DPPH), mediante la siguiente expresión:
% Inhibición = (AbsDPPH − Absmuestra) x 100
AbsDPPH
El IC50 se determina a partir de la gráfica del porcentaje de inhibición y corresponde
a la concentración en la que se neutraliza el 50% de los radicales libres del DPPH.
El método de captación del radical ácido 2,2'-azinobis(3-etilbenzotiazolin)-6-
sulfónico (ABTS•+), se trabajó in vitro según la metodología descrita por Kuskosqui
(6), el radical ABTS•+ se obtiene por la reacción de ABTS 7 mM con persufato
potásico 2,45 mM mantenidos a 25°C y en la oscuridad durante 16 horas. Una vez
formado el radical ABTS•+ se diluye en agua bidestilada hasta obtener un valor de
absorbancia (A) comprendido entre 0,7±0,02 a longitud máxima de absorción 734
ŋm. Cada extracto se diluye con dos mL de etanol absoluto. A 20 μL de esta solución
se añaden 980 μL de disolución de ABTS•+ y se lee la absorbancia del blanco y del
extracto a los siete minutos. Para reconocer la capacidad antioxidante de los
extractos se Figura 1. Esquema de administración en el edema plantar por
carragenina. -0.5 h Extracto o fármaco 0 h Carragenina 0.5 h 1 h 2 h 3 h 4 h 5 h 6 h
Medir 37 Ciencia e Investigación 2016; 19(1): 35-42 Actividad antioxidante y
antienzimática in vitro y antiinflamatoria in vivo de C. spinosa elaboraron curvas
estándar de Trolox®. El antioxidante de referencia se ensaya a una concentración
de 1,2 a 10 µg/mL (concentración final) en etanol, bajo las mismas condiciones.
Para las curvas a obtenerse, se calcula la regresión lineal. Con los resultados se
determina el IC50 a partir de la gráfica del porcentaje de inhibición en función de la
concentración, y corresponde a la concentración en la que se neutraliza el 50% de
los radicales libres del ABTS•+. Con los valores de la absorbancia se determina el
porcentaje de radicales libres (ABTS•+) de manera semejante al método

CONCLUSIONES
El IC50 se determinó a partir de la gráfica del porcentaje de inhibición y corresponde
a la concentración en la que se neutraliza el 50% de los radicales libres del DPPH.
Por lo tanto, al determinar el porcentaje de inhibición la concentración en la se
neutraliza será el 50% de los radicales libre del DPPH
 2. EVALUACIÓN DE LA CAPACIDAD ANTIOXIDANTE Y METABOLITOS
SECUNDARIOS DE EXTRACTOS DE DIECISÉIS PLANTAS
MEDICINALES

Para ello, se usó el método DPPH

(radical 1,1-difenil-2-picrilhidrazil); además, se realizaron ensayos de
reconocimiento de metabolitos secundarios a fin de obtener
los primeros indicios de compuestos de interés fitoquímico. La actividad captadora
de radicales libres de los extractos se expresó
como valor de IC50 (µg/mL) (cantidad necesaria para inhibir la formación de
radicales DPPH en un 50%). El valor bajo de IC50
refleja mejor acción eliminadora de radicales libres. Aunque la mayoría de las
muestras evaluadas mostraron buena capacidad
antioxidante con este método (DPPH), los ensayos de los extractos hidro-
alcohólicos demuestran que la alcachofa (IC50 9,89 µg/
mL), moringa (IC50 11,4 µg/mL) y borraja (IC50 14,0 µg/mL) presentaron mayor
capacidad antioxidante. Mediante las pruebas
químicas de caracterización, se detectó la presencia de flavonoides, taninos,
triterpenos, alcaloides y saponinas en la mayoría de las
especies analizadas (aproximadamente 56-69%); tan sólo un 20% de las mismas
mostró la presencia de polifenoles, glucósidos cianogénicos, lactonas, cumarinas,
esteroles y antraquinonas. Según los resultados, se podría considerar a estas
plantas como fuentes prometedoras de metabolitos secundarios con actividad
antioxidante.CISÉIS PLANTAS MEDICINALES

CONCLUSIONES
El IC50 se determinó a partir de la gráfica del porcentaje de inhibición y corresponde
a la concentración en la que se neutraliza el 50% de los radicales libres del DPPH.
Por lo tanto, al determinar el porcentaje de inhibición la concentración en la se
neutraliza será el 50% de los radicales libre del DPPH

3. ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL COMPLEJO DE INCLUSIÓN DEL

EXTRACTO DE SEMILLA DE Bixa orellana EN β-CICLODEXTRINA
OBTENIDO POR CO2 SUPERCRÍTICO
La Determinación de la capacidad antioxidante del complejo de inclusión El
complejo obtenido por FSC, fue disuelto en metanol, hasta lograr una concentración
de 2 mg/mL, reportado como concentración de extracto, esto con el fin de realizar
diluciones de 500, 100, 50 y 10 μg/mL como se hizo para los extractos libres (sin
acomplejar) y de esta forma realizar comparaciones de actividad antioxidante entre
el extracto libre y acomplejado en β-ciclodextrina. El procedimiento para determinar
la capacidad antioxidante es el mismo que se reportó para los extractos.
Se evaluó la actividad antioxidante de los extractos obtenidos mediante el método
DPPH,determinando su IC50. Se realizó el complejo de inclusión en β-CD del
extracto que presentó la mayor actividad antioxidante, por el método FSC-CO2, y
fue caracterizado por IR, DSC y RMN. Mediante análisis comparativo de los
espectros de la β-CD, extracto libre y el complejo extracto/β-CD, se verificó el
acomplejamiento, y se evaluó la capacidad antioxidante del complejo de inclusión.
Resultados: el extracto con mayor actividad antioxidante se obtuvo bajo la condición
de extracción IV, con un IC50 de 23,55 μg/mL, seguido del extracto II (28,76 μg/mL),
del extracto III (37,23 μg/mL), del extracto V (81,09 μg/mL) y del extracto I (193,82
μg/mL), los cuales presentaron diferencias significativas (P<0,01). Los espectros
obtenidos por IR, DSC y RMN presentaron desplazamientos propios del proceso de
encapsulamiento.El valor IC50 del complejo extracto/β-CD fue de 104,84 μg/mL,
siendo significativamente mayor al valor obtenido para el extracto puro (23,55
μg/mL). Conclusión: el extracto de Bixa orellana con una actividad
antioxidante mayor se obtuvo por fluido supercrítico a 5076 psi de presión y 45°C
de temperatura. Las variaciones de los espectros IR, DSC y RMN demuestran la
inclusión del extracto en la β-CD, y los valores de IC50 indican el efecto protector
de la β-CD ante la reacción con el radical DPPH.

CONCLUSIONES
El IC50 se determinó a partir de la gráfica del porcentaje de inhibición y corresponde
a la concentración en la que se neutraliza el 50% de los radicales libres del DPPH.
Por lo tanto, al determinar el porcentaje de inhibición la concentración en la se
neutraliza será el 50% de los radicales libre del DPPH
 4. APACIDAD ANTIOXIDANTE DE DOS VARIEDADES DE FRAGARIA X
ANANASSA (WESTON) DUCHESNE (FRESA) SOMETIDAS A VARIACIONES EN
LA NUTRICIÓN VEGETA
la fresa pertenece a la familia Rosaceae, es una fuente de compuestos polifenólicos
con actividad antioxidante, especialmente antocianinas, ácidos fenólicos y vitamina
C; los cuales son protectores de la oxidación de muchosorganelos. Las fresas
poseen mayor actividad antioxidante que muchas frutas como: toronja, naranja, uva
roja, kiwi. Sin embargo, los metabolitos secundarios en fresa se pueden
potencializar haciendo una dosificación controlada de nutrientes en los suelos.
Objetivos: evaluar la actividad antioxidante, el contenido de antocianinas y el
contenido de fenoles totales de dos variedades de fresa (Camarosa y Osogrande)
variando la nutrición de suelos con nitrógeno, potasio, fósforo, azufre,
calcio,magnesio y materia orgánica, para establecer la relación entre los niveles de
fertilización y la respuesta de la capacidad antioxidante. Métodos: se evaluaron las
propiedades antioxidantes y algunos componentes polifenólicos de los extractos
acuosos de muestras de fresas cultivadas en Colombia (Camarosa y Osogrande),
provenientes de Antioquia, Colombia. El contenido de fenoles totales, se determinó
por el método Follin Ciocalteu, las antocianinas por el método diferencial de pH y la
actividad antioxidante usando el ensayo DPPH.
Resultados: la unidad experimental 2-2-1-1 (Camarosa) mostró una actividad
antioxidante de IC50 65,90 mg de fruta seca, contenido de fenoles totales de 984,75
y un contenido de antocianinas entre 83,1892,83; superiores a los encontrados en
zonas templadas. Conclusiones: la unidad experimental 2-1-1 Camarosa, con
niveles superiores de materia orgánica e inferiores de nutrición mineral, presentan
la mayor actividad antioxidante, incrementando sus posibilidades terapéuticas y
conservando un buena respuesta fenotípica.
CONCLUSIONES
El IC50 se determinó a partir de la gráfica del porcentaje de inhibición y corresponde
a la concentración en la que se neutraliza el 50% de los radicales libres del DPPH.
Por lo tanto, al determinar el porcentaje de inhibición la concentración en la se
neutraliza será el 50% de los radicales libre del DPPH
 5. EFECTO COMPARATIVO DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DEL
ÁCIDO GÁLICO Y DIFERENTES ALQUILGALATOS
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE ÁCIDO GÁLICO, ALQUIL
GALATOS PON EL MÉTODO DE DPPH•
La actividad antioxidante se determinó mediante el ensayo de 1,1-difenil-
2picril-hidraziloDPPH•), con algunas modificaciones(Villaño y col.,2007).Se
preparó una solución Madre de 19200 µM de ácido gálico e igualmente con los
alquil galatos,se diluyó con metanol hasta obtener luciones patrones de
concentraciones diferentes (1920; 960; 480; 240; 120;
60;3015;7,5;3,75;1,875µM).Para realiza realiza ensayo se agregaron 100 µL de
cada una de las soluciones madre en distintos tubos de capacidad de 1000 µL,
se agregaron 50µL de la solución de DPPH• a cada uno de los tubos, se
esperaron 30 minutos para que ocurra la reacción entre el DPPH• y el ácido
gálico o los alquil galatos, durante este período se protegió el tubo de la luz.
Luego se procedió a leer en el espectrofotómetro de ELISA usando 517 nm
como longitud de onda máxima absorción. Siendo el control para la
absorbancia de la solución DPPH•100%.
La capacidad de la muestra para eliminar el radical DPPH• se determinó con
la misma fórmula de % de inhibición usada en el método de óxido nítrico.
Donde A0 es la absorbancia del punto de concentración 0 µM de los galatos
(control) y A1 la absorbancia de la muestra.