Práctica No.

6
DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ANTIOXIDANTE DE JUGOS DE FRUTAS Y VEGETALES POR EL
MÉTODO MACROMÉTRICO DEL DPPH
______________________________________________________________
1
Departamento de Bioquímica, Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia, Universidad de San Carlos
de Guatemala, Carrera de Química Biológica.

CUESTIONARIO
1. ¿Cuál es la función fisiológica (normal) de los radicales libres en la célula
eucariota?
 Puede luchar contra bacterias y virus
 Regulan la estructura y función de las proteínas modificando residuos de
cisteína específicos
 Controla el tono muscular liso
(Páez, 2011)

2. ¿Qué es el DPPH? ¿Cómo se descarta de manera segura y amigable para el

ambiente?
El DPPH= 2,2-Difenil-I-Picrilhidrazilo, es una técnica que sirve para evaluar la
capacidad antioxidantes de alimentos y plantas medicinales ( Guija, Inocente,
Ponce y Zarzosa, 2015)

Se debe evitar o minimizar la generación de desechos cuando sea posible. Los

envases residuales deben reciclarse. Sólo se deben contemplar la incineración o
el enterramiento cuando el reciclaje no sea factible (CALBIOCHEM, 2010)

3. ¿Qué otros métodos de laboratorio se utilizan para determinar la capacidad

antioxidante de un producto natural? Mencione dos.
 Ensayo ORAC
 Ensayo FRAP
(Pérez, 2007)

4. Mencione una limitación del método del DPPH como metodología para
determinar la capacidad antioxidante de un producto natural.
Que las concentraciones del DPPH , no siempre se usan las mismas por lo que no
permite realizar una evaluación precisa, considerando especialmente que los
resultados experimentales se expresan con el valor de IC50, es decir que la
concentración de la muestra problema que produce una inhibición del 50% del radical
libre DPH ( Guija, Inocente, Ponce y Zarzosa, 2015)

5. Utilizando la información contenida en el capítulo 24 de la Bioquímica básica de

Marks (Smith, Marks & Lieberman, 2005) describa brevemente el mecanismo de
acción antioxidante de las siguientes vitaminas y flavonoides:

a. Vitamina E: va donar un electrón a un lípido peroxi radical, el cual se convierte

en una forma radical libre que es estabilizados por resonancia en donde se
convierte en tocoferilquinona completamente oxidada

b. Vitamina C: se dona los electrones individuales a los radicales libres o disulfuros

en dos paso a media que se oxida ácido deshidro-L-ascórbico.
 El ascorbato reducido puede regenerar la forma reducida de vitamina E mediante
la donación de sus electrones en un ciclo oxido-reducción

c. Carotenoides: estos compuestos pueden ejercer efectos antioxidantes, así

como apagar singlete O2
d. Flavonoides: Algunos flavonoides inhiben las enzimas responsables de la
producción del anión superóxido, como la xantina y oxidasa.
(Smith, Marks & Lieberman, 2005)

6. ¿Qué características estructurales en común tienen todos estos antioxidantes?

Tiene anillos, y dobles enlaces que son los polifenoles (Smith, Marks &
Lieberman, 2005)

7. ¿Cuáles son los principales antioxidantes presentes en un refresco de frutas o

vegetales naturales? ¿Y en los refrescos artificiales?
Las verduras y frutas, tiene los siguientes antioxidantes: vitamina C y Vitamina E, es
lo que comúnmente encontramos en los frescos naturales.

En el caso de los jugos artificiales como por ejemplo Yuzu, contiene vitamina C, ya
que el limón es rico en antioxidantes del tipo flavonoide y además tiene Vitamina P
(Clemente, 2013 & Sies y Stahl,1995)

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS.

Clemente, E. (2013). El yuzu, aroma cítrico asiático en estado puro. Recuperado de

https://www.directoalpaladar.com/ingredientes-y-alimentos/el-yuzu-aroma-citrico-
asiatico-en-estado- puro#:~:text=Propiedades%20nutricionales%20y
%20saludables,m%C3%A1lico%2 0y%20el%20%C3%A1cido%20c%C3%ADtrico.
Guija, E., Inocente, A., Ponce, J, y Zarzosa, E. Evaluacion de la técnica de 2,2-Difenil-1-
Picrilhidrazilo (DPPH) para determinar capacidad antioxidante. Scielo15.1:
(2015):57-60

Páez, D. (2011). Funciones de los radicales libres. Recuperado de

https://doctorapaez.com/2011/12/funciones-de-los-radicales-
libres/#:~:text=Los%20radicales%20libres%20no%20son,de%20los%20m%C3%B
Asculos%2 0lisos%2C%20etc.

Pérez, J. (2007).METODOLOGÍA PARA LA EVALUACIÓN DE INGREDIENTES

FUNCIONALES ANTIOXIDANTES. Efecto de Fibra Antioxidante de Uva en
status antioxidante y parámetros de riesgo cardiovascular en humanos.
Universidad Autónoma de Madrid

Sies, H. & Stahl, W. (1995). Vitamins E and C, β-carotene, and other carotenoids as
antioxidants.American Journal of Clinical Nutrion. 62.1(1995):21-110

CALBIOCHEM (2010) Ficha de datos de seguridad: DPPH, Free Radical. Recuperado de

https://www.merckmillipore.com/INTERSHOP/web/WFS/Merck-DE-
Site/en_US/-/EUR/ShowDocument-File?ProductSKU=EMD_BIO-
 300267&DocumentId=300267Spanish.pdf&DocumentType=MSD&Language=ES&
Country=ES&Origin=PDP.

Diagrama de Flujo