PRUEBA DE MASTITIS
DEFINICIÓN DE LA PRUEBA DE MASTITIS
• La mastitis es un proceso infeccioso de la glándula mamaria con signos
visibles. Se caracteriza por la inflamación o dolor en la ubre, enrojecimiento,
fiebre, cambios en la leche por ejemplo grumos. Consiste en la detección de
grumos, tolondrones, descamaciones, sangre, etc., en la leche
GENERALIDADES DE LA PRUEBA DE MASTITIS
• Mastitis Bovino: La mastitis es una inflamación de la glándula mamaria que
puede ser ocasionada por factores físicos, químicos, mecánicos o infecciosos.
El 80% de los casos de mastitis son ocasionados por la entrada de
microorganismos patógenos específicos a través de los pezones y tejidos de
la ubre; los casos restantes son resultado de lesiones traumáticas, con o sin
invasión de microorganismos. Pero la forma más común de lesión, y que
generalmente es llamada mastitis, es la infección bacteriana de la glándula
mamaria. La mastitis puede ser causada también por hongos o micoplasmas.
La mastitis subclínica: se caracteriza por la presencia de un
microorganismo en combinación con un conteo
elevado de células somáticas en leche, esta puede desarrollar
fácilmente una inflamación y no tener tratamiento.
Este tipo de mastitis no presenta cambios visibles en la leche o ubre.
Apenas se percibe una reducción en el
rendimiento de la leche, siendo alterada su composición por la
presencia de componentes inflamatorios y bacterias.
La mastitis clínica: es definida como una anormalidad en la
glándula mamaria de la vaca o la leche, que puede
ser fácilmente observada. Se caracteriza por la tumefacción
o dolor en la ubre, enrojecimiento de la misma, la leche
puede presentar una apariencia anormal y, en algunos casos,
hay aumento de la temperatura rectal, letargo, anorexia e
incluso la muerte.
EQUIPOS QUE SE UTILIZAN PARA EL MÉTODO DE
PRUEBA DE MASTITIS
• Equipo Foss: Las muestras de leche a una temperatura promedio de 27ºC,
que se logra sumergiendo los tubos con las muestras en baño Maria. Durante
el transporte y hasta antes del conteo celular las muestras se mantienen en
refrigeración entre 5º Y 7º C, por un periodo lo mas breve posible.
• Equipo Fossomatic: es un equipo electrónico automatizado, que tiene la
ventaja de ser muy exacto, además de permitir el análisis de varios cientos
de muestras al día.
REACTIVOS QUE SE NECESITAN PARA EL MÉTODO
DE PRUEBA DE MASTITIS
• El test de California consta de un bote de reactivo y unos pocillos (4 porque
está pensado para su uso en vacuno) para depositar la leche de cada una de
las mamas por separase toma una pequeña cantidad de leche (una
cucharada o unos 2 ml ) de cada mama y se deposita en un pocillo. La
prueba se ha de realizar antes del ordeño y en el de la tarde si se ordeña
dos veces al día.
METODOLOGÍA DEL ANÁLISIS DE LA PRUEBA DE
MASTITIS
• Examen clínico de la ubre (inspección y palpación).
• Composición láctea (lactosa y electrolitos)
• Conductividad eléctrica.
• Concentración y actividad de enzimas (nagasa, anti tripsina, catalasa, etc.)
• Concentración y actividad de enzimas (nagasa, anti tripsina, catalasa, etc.)
• Recuento de células somáticas.
• Wisconsin Mastitis.
• California Mastitis Test.
• CENMAST.
• PB4
PARÁMETROS DE LA NORMA INEN DE LECHE CRUDA
PARA LA PRUEBA DE MASTITIS
Parámetros
Conductividad
6.2 ms/cm o más Leche Anormal
Absoluta
Conductividad
0.5 ms/cm o más Infectada
Diferencial
CONCLUSIONES
• Implementar programas de capacitación tendientes a incrementar el nivel
tecnológico de las fincas y que motiven a la organización de los productores,
será el nuevo reto.
• Todos los productores deben de llevar de forma actualizada los registros de
producción para mejorar la eficiencia en el manejo de los hatos y facilitar
trabajos de investigación.
RECOMENDACIONES
• Teniendo en cuenta la importancia que reviste la Mastitis; así como las
cuantiosas pérdidas que ocasiona en nuestros hatos lecheros SUGIERO:
• Valorar la posibilidad de incluir pruebas diagnósticas para la detección de
Mastitis de todo tipo.
BIBLIOGRAFÍA
• Cepero, O.; Rivero, A.; Herrada, N.; Aguiar, J. (2005). Evaluación de diferentes tratamientos
magnéticos en la conservación de la leche cruda sin refrigerar. III Conferencia Internacional
sobre Desarrollo Agropecuario y Sostenibilidad. Santa Clara, Villa Clara, Cuba.
• FAO. (2006). Conservación de la calidad. Disponible en URL:
http://www.fao.org:80/AG/againfo/subjects/es/dairy/qualitychain.html[Consultado:
07/10/15]
• González, Y. (2004).Evaluación de la calidad microbiológica y de composición de la leche en
la provincia de Sancti Spíritus. Tesis de Diploma. Sancti Spíritus: Centro Universitario Sancti
Spíritus, Cuba.
• Pedersen, L. (2004). Mastitis diagnostic in Denmark. Nordic Meeting on mastitis Diagnostic.
NationalVeterinaryInstitute, Uppsala, Sweden. Disponible en URL:
http://agronomia.uchile.cl/extension/circular_extensiopanimal/[Consultado: 05/09/15]
• Alvarez, E. Mastitis Bovina. Instituto De Medicina Veterinaria. (1986)
PRUEBA DE ANTIBIÓTICOS
DEFINICIÓN DE LA PRUEBA DE ANTIBIÓTICOS
• Existen diferentes métodos que se emplean para detectar residuos en leche, sin embargo, la
implementación de éstos depende del presupuesto con el que cuente ya sea la empresa
privada o el estado; el método microbiológico detecta la presencia o ausencia de un
determinado fármaco y puede incluso cuantificar la concentración del mismo, debido a esto
es usado habitualmente por su costo. Los test rápidos o Snap Test, tales como el BRT, BR-Test,
Copan, Delvotest o Eclipse son algunos de los métodos más utilizados hoy en día y todos ellos
emplean el Geobacillus steraothermophilus var. calidolactis, antes denominado Bacillus
stearothermophilus, como microorganismo de prueba, son utilizados comúnmente para conocer
la presencia o ausencia de determinado fármaco y basándose en el cambio de color para
compararlo posteriormente con una escala
GENERALIDADES
• Según la Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la
Agricultura (FAO) (19), el termino leche se define como la secreción mamaria
normal de animales lecheros, que es obtenida mediante uno o más ordeños,
que no debe sufrir ningún tipo de adición o extracción y será destinada al
consumo en forma de leche líquida o con una elaboración posterior.
¿PARA QUE SIRVE?
• Sirve para determinar las características organolépticas y microrganismo que
puede contener la leche( color, olor, sabor) y efectuar las pruebas físicas(
medición de temperatura, ph, acidez titulable, densidad, estabilidad al
alcohol, estabilidad al color).
EQUIPOS
• Autoclave Cilindros de acero inoxidable 8x6x10 mm
• Balanza analítica Erlenmeyer 50 ml, 100 ml, 250 ml, 500 ml
• Balanza semianalítica Frascos ámbar para reactivos
• Peras de succión Perlas de vidrio Micropipetas automáticas (200 μl, 100 μl, 50 μl,
20 μl)
• Estufa Pipetas aforadas 1ml, 5ml, 10 ml
• Hot Plate Termómetro Tubos de vidrio con tapa rosca 10
ml, 25ml, 70 ml
• Incubadora Pipeteadores Placas Petri Placas Petri 100 d X
15 h
• Refrigeradora Pipetas pasteur Pipetas volumétricas 1 ml, 5
ml, 10 ml
• Puntas de micropipetas
REACTIVOS
• Acido Clorhídrico 0.1 Medio Agar Antibiótico No. 4 (HIMEDIA)
• N Agua destilada Buffer Fosfato pH 6.0 ± 0.1 Medio Agar Antibiótico No. 11 (HIMEDIA)
• Cultivo bacteriano de Micrococcus luteus Medio Agar Antibiótico No. 1 (HIMEDIA)
• Cultivo bacteriano de Staphylococcus aureus Solución salina estéril 0.85 %
• Otros Alcohol etílico Detergente Escalímetro
• Alcohol isopropílico Gorros descartables
• Gabacha Blanca
• Guantes de Látex
• Hielera Hipoclorito de sodio
• Hisopos Mascarillas descartables
• Mecheros
• Tirro
METODOLOGIA
• Las pruebas utilizadas para la determinación de residuos de antibióticos en leche
fueron realizadas a través del método microbiológico establecido por el Manual de
Análisis Bacteriológicos, BAM, por sigla en inglés, respaldado por la Administración
de Alimentos y Medicamentos de Estados Unidos, (FDA) por su sigla en inglés, siendo
el método oficial para la detección cuantitativa de residuos β-lactámicos el método
de cilindro-placa con Micrococcus luteus. Debido a que no existe un método
establecido para la determinación de residuos de tetraciclina en leche, se adaptó el
mismo método antes mencionado para los residuos de tetraciclina
PARÁMETROS NORMAS INEN
• Es el producto de la secreción normal de las glándulas mamarias, obtenida a partir del
ordeño íntegro e higiénico de vacas sanas, sin adición ni sustracción alguna, exento de
calostro y libre de materias extrañas a su naturaleza, destinado al consumo en su forma
natural o a elaboración ulterior
• GENERALIDADES
• La leche cruda se considera no apta para consumo humano cuando:
• No cumple con los requisitos establecidos en el numeral
• Es obtenida de animales cansados, deficientemente alimentados, desnutridos, enfermos o
manipulados por personas afectadas de enfermedades infectocontagiosas.
• Contiene sustancias extrañas ajenas a la naturaleza del producto como: conservantes
(formaldehído, peróxido de hidrógeno, hipocloritos, cloraminas, dicromato de potasio,
lactoperoxidasa adicionada), adulterantes (harinas, almidones, sacarosa, cloruros, suero de
leche, grasa vegetal), neutralizantes, colorantes y antibióticos, en cantidades que superen los
límites indicados en la tabla
• Contiene calostro, sangre, o ha sido obtenida en el período comprendido entre los 12 días
anteriores y los 7 días posteriores al parto.
• Contiene gérmenes patógenos o un contaje microbiano superior al máximo permitido por la
presente norma, toxinas microbianas o residuos de pesticidas, medicamentos veterinarios y
metales pesados en cantidades superiores al máximo permitido.
• La leche cruda después del ordeño debe ser enfriada, almacenada y transportada hasta los
centros de acopio y/o plantas procesadoras en recipientes apropiados autorizados por la
autoridad sanitaria competente.
• En los centros de acopio la leche cruda debe ser filtrada y enfriada, a una temperatura
inferior a 10ºC con agitación constante.
• Los límites máximos de pesticidas serán los que determine el Codex Alimentarius
• Los límites máximos de residuos de medicamentos veterinarios serán los que determine el
Codex Alimentario
CONCLUSIONES
• Para determinar la prueba de antibióticos en leche cruda es necesario utilizar
equipos y materiales adecuados para analizar con mayor exactitud las
muestras tomadas.
• Es necesario conocer los parámetros establecidos por las normas inen para
así poder tener un producto lácteo de alta calidad.
RECOMENDACIONES
• Se recomienda entrar al laboratorio de análisis utilizando la indumentaria
adecuada.
• Utilizar los equipos y reactivos de manera adecuada para un mejor
resultado.
• Tomar las muestras que sean necesarias para examinar con claridad la
prueba de antibióticos en leche cruda.
BIBLIOGRAFÍA
• Amiot, J. 1991. Ciencia y tecnología de la leche: Principios y aplicaciones. Trad. RO Almudí.
Ed. Fondation de Technologie Laitère du Quebec. Zaragoza, ES, Acribia. P. 90-100, 113,116.
• Arias, ML; Antillón, F; Cubillo, Z. 2000?. Residuos de penicilina en leche bovina en Costa Rica.
(En Línea). San José, CR. Consultado 12 mar 2011. Formato pdf. Disponible en:
http://www.binasss.sa.cr/revistas/rccm/v9n2/art3.pdf
• Bonilla, G. 1992. Estadística II. Métodos prácticos de ingeniería estadística. UCA editores. 2
ed. San Salvador, SV, Talleres gráficos UCA. P 11, 86, 92.
• Boggio, JC. 2010. Presencia de antimicrobianos en leche. (En Línea). AR, se. Consultado 18
feb 2012. Formato pdf. Disponible en: http://www.produccion-
animal.com.ar/produccion_bovina_de_leche/leche_subproductos/18-antimicrobianos.pdf