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Principalmente basadas en la deteccin de mastitis . La mastitis, es la respuesta inflamatoria de la glndula mamaria normalmente causada por bacterias .

Es probablemente la ms costosa de las enfermedades infecciosas endmicas que afecta a las vacas y otras especies lecheras. Se caracteriza por la entrada de clulas somticas, principalmente neutrofilos polimorfonucleares (PMN), en la glndula mamaria y por un aumento en el contenido de proteasa en la leche.

Observacin y palpacin de la ubre: La infeccin puede provocar inflamacin de uno, varios cuartos o de toda la glndula, aumento de la temperatura en el rea afectada, as como enrojecimiento de la zona y dolor. Cuando se encuentran todos o alguno de los sntomas enumerados se puede interpretar como un caso de mastitis clnica, donde adems se encuentran cambios importantes en la leche que produce el tejido afectado, estos cambios pueden consistir en alteracin del color, aparicin de grumos, cogulos sanguinolentos, cogulos con pus, o una leche ms acuosa, entre otros.

Estas slo son tiles cuando la mastitis ya esta avanzada y no detectan mastitis subclnica. Dentro de estas se encuentran las siguientes: la prueba de la escudilla de ordeo, prueba del pao negro y la taza probadora.

Figura 1. Prueba de la escudilla de ordeo

Figura 2. Prueba del pao negro

Figura 3. Taza probadora

Entre stas se encuentran: la conductividad elctrica de la leche,

papel indicador de mastitis y la prueba de Whiteside y CMT. Conductividad elctrica de la leche


LA PCE) se ha utilizado como un indicador de la mastitis durante la ltima dcada, se basa en el aumento de conductividad elctrica de la leche debido a su mayor contenido electroltico especialmente iones de sodio y de cloro y se ha desarrollado como un mtodo para monitorear el estado de la mastitis en la vaca . Este instrumento proporciona una lectura digital del resultado de la PCE y representa una alternativa a la Prueba de California para Mastitis (CMT) como prueba de monitoreo de la mastitis subclnica al lado de la vaca. Aunque a veces da como resultado un gran nmero de falsos positivos o de falsos negativos, por lo que no es muy confiable.

Papel indicador de mastitis: Este mtodo, consiste en un papel sobre el que se hace caer directamente del pezn algunas gotas de leche, se consideran sospechosas las leches que dan una coloracin correspondiente a un pH igual o superior a 7 (Figura 5). La prueba descubre el 50% de las leches infectadas.

Prueba de Whiteside
La mezcla de leche con una solucin de NaOH al 4% ocasiona que la leche se gelifique formando grumos que son visibles. Los grumos sern ms grandes conforme la leche contenga mayor nmero de clulas somticas. Para hacer ms visible la reaccin es conveniente usar una placa de acrlico negra que puede tener dibujada 4 cuadros de 3cm x 3cm, uno por cada cuarto. Procedimiento: a) Colocar 5 gotas de leche fra en el centro del cuadrito y agregar 2 gotas de la Solucin de NaOH al 4%. b) Mezclar vigorosamente, dispersando la leche en el cuadrito por medio de un palillo. Continuar mezclando por alrededor de 20 segundos y dar lectura al resultado. c) Interpretar de acuerdo al siguiente Cuadro 1:

Prueba

de California para Mastitis (CMT)

La CMT, ha sido empleada durante dcadas y sigue siendo la prueba ms utilizada a nivel de campo para el diagnstico de mastitis en el ganado bovino lechero.
Pasos a seguir para la realizacin de la Prueba de California para Mastitis

1. Se desecha la leche del preordeo.


2. Se ordean uno o dos chorros de leche de cada cuarto en cada una de las placas de la paleta. 3. Se inclina la paleta de modo que se desecha la mayor parte de esta leche. 4. Se aade a la leche un volumen igual de reactivo. 5. Se mezcla el reactivo y se examina en cuanto a la presencia de una reaccin de gelificacin Antes de continuar con la vaca siguiente se debe enjuagar la placa.

Los resultados pueden ser interpretados en cinco clases: Desde el resultado negativo en el que la leche y el reactivo siguen siendo acuosos, hasta el recuento de clulas ms elevado en el que la mezcla de la leche y el reactivo casi se solidifica. Esto se determina en relacin a la reaccin de gelificacin. La prueba consiste en el agregado de un detergente a la leche, el alquilauril sulfonato de sodio, causando la liberacin del ADN de los leucocitos presentes en la ubre y este se convierte en combinacin con agentes proteicos de la leche en una gelatina. A mayor presencia de clulas se libera una mayor concentracin de ADN, por lo tanto mayor ser la formacin de la gelatina, traducindose en nuestra lectura e interpretacin del resultado como el grado ms elevado de inflamacin.

La Prueba de California es un mtodo de diagnstico que posee una sensibilidad del 97% y una especificidad del 93%.

Prueba de Wisconsin para Mastitis (WMT)


La WMT, fue diseada para el uso en el laboratorio, y es utilizada para estimar el contenido de clulas somticas de muestras de leche fresca mezclada o leche de tanques de enfriamiento, as como para muestreo de vacas individuales. Se utiliza una solucin similar a la que se emplea con la prueba de California , pero en contraste con esta ltima, los resultados se miden cuantitativamente dependiendo de la viscosidad, no cualitativamente o de estimarla a ojo de buen cubero como en la CMT. La tcnica consiste en utilizar un tubo graduado en milmetros en donde se depositan 2 ml de leche y una mezcla de 2 ml de reactivo para CMT con agua destilada (1:1) ambas a temperatura ambiente. Enseguida se agita durante 10 segundos, horizontalmente y de izquierda a derecha. Se deja reposar 10 segundos y posteriormente se invierten los tubos durante otros 10 segundos. Una vez transcurrido el tiempo, se procede a realizar la lectura en el tubo por debajo de la espuma que se forma (Figura 12). Los resultados se relacionan con la escala graduada en mililitros del tubo y su valor de clulas somticas, empleando para su interpretacin una tabla especfica para la prueba.

Los anticuerpos brucelares contenidos en la muestra, reaccionan con el antgeno coloreado de brucella formando un complejo antgeno anticuerpo que se adhiere a a los glbulos de grasa de la leche que por su menos densidad ascienden a la superficie del tubo formando una capa de crema a manera de anillo que se colorea de morado podra ser morado intenso( +) o blanco cremoso (-) el cual es indicativo de que la muestra no contiene aglutininas especificas por lo tanto el antgeno no aglutina permaneciendo la columna de leche uniformemente coloreada de lila