BIOPSIA MUSCULAR

DIAGNÓSTICO DIFERENCIAL MIOPATÍAS

CMNO ANATOMÍA PATOLÓGICA
VARGAS R2AP
 ANTECEDENTES

• 1860 Primera biopsia por

Duchenne

• 1970 Métodos de HQ por

Dubowit

• 1980s Métodos de IHQ

• XXI Molecular

C. Sundaram and Megha S. Uppin (2012). Approach to the Interpretation of Muscle Biopsy,
 INTRODUCCIÓN

• Desorden
neuromuscular
• Evaluación y
diagnóstico
- Clínica
- Electromiografía
- Pruebas laboratorio
(CPK) y moleculares

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INDICACIONES & SELECCIÓN SITIO

• Debilidad
cuantificable con
diagnóstico
diferencial extenso
(no descartables
por clínica o sérico)
SELECCIÓN

• Músculo
moderadamente
afectado
Masson No fibras
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 SELECCIÓN MÚSCULO

• MRC grado 4/5

• Electromiografía

• RM o USG

• Deltoides, Biceps y
Cuadriceps

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 TIPO DE BIOPSIA

“Cielo abierto” Trucut

• 100mg

• Preferido pero limitado

• No en multifocales

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 MANEJO DE LA BIOPSIA

• Pruebas bioquímicas 50mg inmediato en nitrógeno

líquido o congelado a – 70ºC

• Microscopia electrónica* 50mg no mas de 2mm

grosor en glutaraldehido 4%

• Resto transportar en gasa húmeda en contenedor

con hielo
- Cortes congelados
- Parafina

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 INTERPRETRACIÓN

Técnica Uso Cantidad Requerimiento

ideal

Corte Morfología de las fibras y 1cm3 Gasa húmeda

congelado enzimas HQ
*Mayor información
Parafina Inflamación y morfología de 0.5x1cm Gasa húmeda
las células inflamatorias

ME Capilares endomisiales, 1 a 2mm Glut 4%

inclusiones, mitocondrias,
miofilamentos, etc.
Bioquímico Depósito o enfermedades 50 a Congelar
Test mitocondriales 550mg inmediato

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Clase Tinción Uso

Morfología Hematoxilina y Eosina Morfología

Tricomico Gomori modificado Mitocondrial, Inclusión

Verhoeff van Gieson Tejido conectivo y elastina

E. Fibras Adenosin trifosfatasa (ATPasa) Tipo de fibra de acuerdo a pH

E. Oxidativas Nicotinamida adenina deshidrogenasa Organización miofibrilar

(NADH) Estructuras intracelulares
Succinato deshidrogenasa (SDH) Patologías mitocondriales

Citocromo oxidasa (COX) Patologías mitocondriales

E. Hidrolíticas Esterasa Fibras denervadas, lisosomas

Fosfatasa ácida Lisosomas, macrófagos

Fosfatasa alcalina Perimisio (Inflamatorias)

Depósito Ácido peryódico Schiff (PAS) Glicogeno

Rojo oleoso o Sudan Negro Lípidos

Anticuerpos Inmunohistoquímica

Proteína Enfermedad
Distrofina Distrofia muscular de Duchenne & Becker
Miotilina Limb Girdle 1A
Caveolina - 3 Limb Girdle 1C
Desmina Limb Girdle1E
Disferlina Limb Girdle2B
Sarcoglican Limb Girdle2C - F
Emerina Distrofia muscular Emery - Dreifuss
Laminina – a2 DM congénita con deficiencia de Merosin
B- DM congénita
Distroglicano
Colágeno VI DMC Ullrich
CMH Clase 1 Miopatías inflamatorias
ESTRUCTURAS NORMALES
 ESTRUCTURAS NORMALES

• Fibra muscular
- Sincitios
- Núcleo excéntrico
- 3 a 5% internos

• Medidas
- Infante 16um
- > 15 años 40 a
60um
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 TIPO DE FIBRAS

• Unidad motora =
Firma metabólica
• Patrón parcheado
• Visible en tinciones
(HQ e IHQ)

• Tipo I “Lentas”
• Tipo II “Rápidas”

IHQ Miosinas rápidas y lentas

 TIPOS DE FIBRAS

TIPO II SUBTIPOS pH 4.6 ATPasa

Tipo IIA Claras
Tipo I B Intermedias*

> Edad y Obesidad

 PATRONES POR ENFERMEDAD
NEUROMUSCULAR

Neurogénico Miopático
• Enfermedades de la • Enfermedades
neurona inervante intrínsecas de la fibra
muscular
- Hereditarias
Patrón sobrepuesto - Adquiridas

Distrofias musculares,
miopatías congénitas,
inflamatorias,
metabólicas o tóxicas.

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 ATROFIA NEUROGÉNICA

• a- motoneurona
• Debilidad e
hipotonia
• Atrofia muscular

Tempranos:
- Pérdida forma
poligonal
- Afecta tipo I y tipo II

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ATROFIA NEUROGÉNICA

Severo Re - inervación
 ATROFIA NEUROGÉNICA

Nuclear “bags” Fibras targetoides

 CAMBIOS MIOPÁTICOS

Variación tamaño Fibras rotas “Split”

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 CAMBIOS MIOPÁTICOS

• Degeneración

• Regeneración
- Pequeñas
- > tam núcleo
- Coloración azulosa
CAMBIOS MIOPÁTICOS CRÓNICOS
Engrosamiento tejido
Internalización nuclear conectivo
 CAMBIOS ESPECÍFICOS

No cambios estructurales Cambios clave

• Miopatías metabólicas • Enfermedades
- Deficiencias carnitin mitocondriales
palmitoil transferasa • Enfermedad central
- Deficiencia de • Miositis
mioadenilato
deaminasa

*Rabdomiolisis

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 CAMBIOS ESPECÍFICOS

Fibra roja “ragged” Vacuolas “Rimmed”

 CAMBIOS HQ

NADH Rojo Oleoso

 ENFERMEDADES
NEUROMUSCUALARES
CATEGORIAS
 CLASIFICACIÓN

Miopatías

Distrofias
Metabólicas Mitocondriales Congénitas Adquiridas
musculares

Depósito Depósito
Inflamatorias Tóxicas
lípidos glucogeno
 DISTROFIA MUSCULAR

Merosin Congénita

Limb Girdle

Duchenne & Becker

Daño

Complejo Distrofina-Glucoproteínas Mionecrosis

 DISTROFIA MUSCULAR
Enfermedad Técnica Hallazgo histológico
PATRON MIOPÁTICO
Duchenne y H&E, TG Necrosis/Miofagocitosis
Becker Distrofina Disminución o ausencia
Limb Girdle H&E
TG & NADH Fibras en anillo
Glicoproteínas D Reducidas o ausentes
Fascio-escalpo- H&E y TG Infiltrado mononuclear
humeral
Oculofaringeal H&E y TG Fibras anguladas con vacuolas
ATPasa Atrofia fibras tipo I
Congénita H&E, TG Fibrosis endomisial aumentada
IHQ Colágeno VI Disminuido (Ullrichs)
Miotonica H&E y TG Internalización nuclear (15%)
Núcleos picnoticos
ATPasa Atrofia fibras tipo I
NADH Fibras en anillo
 DISTROFIA MUSCULAR

Mionecrosis Disminución tinciones

 DISTROFIA MUSCULAR

Mionecrosis Pérdida Fibras

 MIOPATÍAS METABÓLICAS
(ATESORAMIENTO)
Enfermedad Técnica Hallazgos histológicos
GLICÓGENO
Enfermedad Pompe H&E y TG Patrón miopático
(Def. Maltasa ácida) PAS + Diastasa sensible Acumulo en lisosomas
Vacuolización
sarcoplasma
Fosfatasa ácida En vacuolas
Enfermedad Mc Ardles H&E y TG Glucógeno libre asoc.
(Def. miofosforilasa) Membrana
sarcolemica o en
vacuolas
Prueba bioquímica Ausencia
Deficiencia PAS + Diastasa Aumento de glicógeno
fosfofructokinasa resistente libre
Enzima Debrancher PAS + Diastasa sensible Vacuolas
subsarcolemicas
 MIOPATÍAS METABÓLICAS (DEPÓSITO)

Enfermedad Técnica Hallazgos histológicos

LÍPIDOS
Deficiencia de Rojo Oleoso Gotas de lípidos aumentadas
Carnitina
ATPasa Predomina fibra tipo I
Deficiencia de H&E y TG Normal a fibras regeneradas
Carnitina palmitoil
transferasa Normal a leve aumento
Rojo Oleoso
Deficiencia H&E y TG Normal
mioadenilato
deaminasa Test bioquímico Ausencia de reacción
 MIOPATÍAS MITOCONDRIALES

Enfermedad Técnica Hallazgos histopatológicos

Mitocondrial Tricromica de Gomori Fibras rojas ragged
Resalte de miofibrillas
(numerosas mitocondrias)

Rojo Oleoso Aumento en depósito de lípidos

Microscopia Electrónica Inclusiones paracristalinas
intramitocondriales
Cuerpos densos
Aumento de glucógeno
 MIOPATÍAS CONGÉNITAS

Enfermedad Técnica Hallazgo histológico

PATRÓN MIOPÁTICO
Centronuclear/miotu H&E y TG Internalización nuclear (>70%)
bular Aclaramiento perinuclear

ATPasa Predomina fibra tipo I

Nemaline Rod H&E y TG Inclusiones perinucleares o
subsarcolemicas

ATPasa Predomina fibra tipo I

Enfermedad central H&E & NADH - TR Material hipercromático en el
intracelular

ATPasa Exclusivo fibra I

 MIOPATÍAS INFLAMATORIAS
Enfermedad Técnica Hallazgos histológicos
Dermatomiositis H&E y TG Regeneración/Degeneración
Fibras necróticas y microinfartos
Macrófagos y linfocitos perivasculares y
perimisio
NADH-tr Atrofia perifascicular
Miositis de H&E y TG Infiltrado inflamatorio endomisial
cuerpos de Inclusiones eosinofilas citoplasmaticas
inclusión Fibras rojas rotas
Vacuolas autofagicas
COX Fibras negativas
Polimiositis H&E y TG Patrón miopático
Linfocitos y macrófagos invaden fibras no
necróticas
Células plasmáticas y dendriticas endomisial
Miositis H&E y TG Fibras necróticas escasas
necrotizante Edema fibras
autoinmune
 MIOPATÍAS TÓXICAS

Medicamento Técnica Hallazgos histológicos

Amiodarona Tricomico de Gomori Vacuolas autofágicas
Atrofia neurogénica

Nervios Inclusiones
Estatinas H&E y TG Necrosis de las fibras con
fagocitosis
Fibras regeneración

Rojo Oleoso Vacuolas lípidos

Esteroides ATPasa Atrofia fibras tipo II

Rojo Oleoso Lípidos en las fibras tipo I