Anticuerpos monoclonales

Estefany Chavez, Lizete Flores, Belen Rodríguez, Andrea Sánchez | Equipo 4 | Lab. Inmunología| FQ UNAM
 ¿Qué son?

• Son Ig cuyo método de producción

permite la fabricación de cantidades
ilimitadas de un solo anticuerpo frente a
un antígeno especialmente seleccionado.

• Son anticuerpos monoespecíficos que

derivan de una clona única, así todos los
anticuerpos se dirigen contra un
antígenos específico

• Los anticuerpos monoclonales son

glucoproteínas especializadas que hacen
parte del sistema inmune, producidas por
las células B, con la capacidad de
reconocer moléculas específicas
¿Qué son?

• Un anticuerpo monoclonal es aquel que reconoce específicamente una parte

del antígeno, es decir un epítopo concreto, y que es producido por un clon de
linfocitos B.
Tipos

• Anticuerpo monoclonal humanizado (AcHz)

• Anticuerpo monoclonal humano (AcH)

• Anticuerpo monoclonal quimérico (AcQ)

• Anticuerpo monoclonal murino

Tipos

Anticuerpo monoclonal murino: el 100% del anticuerpo procede del ratón.

Anticuerpo monoclonal quimerico: en este tipo de anticuerpos las regiones

variables proceden de ratón y las regiones constantes son humanas
Tipos

• Anticuerpos monoclonales humanizados: en estos anticuerpos solamente las

regiones CDR de las partes variables de los anticuerpos proceden de ratón
siendo el resto del anticuerpo de origen humano.

• Anticuerpos monoclanales humanos: estos anticuerpos son en su totalidad

de origen humano
¿Cómo se producen?

La producción de grandes
cantidades de anticuerpos
monoclonales específicos ha sido
posible mediante la tecnología de
los hibridomas: fusión de células
de mieloma no secretoras (células
malignas B que aportan la
inmortalidad) con linfocitos B
normales (aportan la especificidad
de Ac)
 ¿Cómo se producen?

• Para conseguir Ac monoclonales específicos se le

inyecta a un ratón el Ag diana.

• Posteriormente se le extirpa el bazo y se extraen

las células B.

• Se realiza la fusión de células de mieloma no

secretor defectivas en HPGRT (hipoxantina
guanina fosforribosil transferasa; incapaces de
crecer en ausencia de purinas) con los linfocitos
(incapaces de vivir sin factores de crecimiento).

• Mediante cultivos en medios apropiados solo las

células híbridas son capaces de sobrevivir en
ausencia de purinas y de factores de crecimiento.

• Posteriormente se identifican mediante

enzimoinmunoanálisis las células productoras del
Ac de interés, que se expanden clonalmente para
la obtención de este en grandes cantidades.
 ¿Qué es un Hibridoma?

• Célula híbrida cultivable in vitro, de forma indefinida (inmortal) obtenida

por la fusión in vitro de células plasmáticas tumorales de mieloma
(linfocito B canceroso) que no produce una inmunoglobulina propia, con
células normales productoras de anticuerpos (linfocitos B), obtenidas de
animales, previamente inmunizados, contra un determinado antígeno.

• Posee la capacidad de multiplicarse in vitro de manera indefinida y de

poder producir grandes cantidades de anticuerpos monoclonales en el
medio de cultivo, que pueden ser empleados con fines diagnósticos o
terapéuticos.

1. Inmunización de un ratón
2. Aislamiento de linfocitos B del bazo
3. Cultivo de células de mieloma
4. Fusión de mieloma y células B
5. Separación de las líneas celulares
6. Selección de las líneas celulares que producen
el anticuerpo adecuado (a) y desecho del
resto (b)
7. Proliferación in vitro (a) or in vivo (b)
8. Cosecha
 Cultivo de hibridomas
HAT
• Es un medio selectivo en el cual sólo crecen células
producto de fusión entre linfocitos y células mielómicas
(hibridomas).
Contiene
•Suero fetal bovino al 20%
•Hipoxantina (100 μmol/L)​
•Timidina (16 μmol/L)​
•Amínopterina (0.5 μmol/L)​
 Selección de HAT

Cuando las células tumorales parentales carecen de una

enzima hipoxantina guanina fosforribosil transferasa
(HGPRT) o timidina quinasa (TK), la selección se realiza
cultivando la mezcla de fusión en medio HAT.

La aminopterina bloquea la síntesis de novo del

ADN. Para sobrevivir en el medio HAT, las células deben
producir ADN a través de la llamada vía de rescate, en la
que la hipoxantina y la timidina se incorporan al ADN por
medio de HGPRT y TK, respectivamente.

Por lo tanto, las células tumorales que carecen de

cualquiera de estas enzimas no pueden crecer en medio
HAT , a menos que se fusionen con células normales
provistas de las enzimas requeridas. Así, las únicas
células capaces de crecer en medio HAT.
Anticuerpos humanos generados en ratones
transgénicos mediante la generación de
hibridomas de ratón que produzcan
anticuerpos totalmente humanos
• La generación de anticuerpos
monoclonales humanos mediante la
expresión de fragmentos de Ig como las
fracciones variables del anticuerpo en
bacterias, gracias a las bibliotecas de
bacteriófagos que tienen insertado
dentro de su ADN.
Tecnología del Ribosoma Display
Trabajos citados

• Brekke, O. and Sandlie, I. (2003). Therapeutic antibodies for human diseases at the
dawn of the twenty-first century. Nature Reviews,

• Ruiz Gema, et. al. Anticuerpos monoclonales terapéuticos, Genoma España/FUAM

consultado (28/09/18)
en: https://web.archive.org/web/20120621091802/http://www.gen-
es.org/assets_db/publications/documents/pub_77_d.pdf

• MACHADO N., TÉLLEZ G., CASTAÑO J. (2006). Anticuerpos monoclonales:

desarrollo físico y perspectivas terapéuticas. Asociación colombiana de infectología.

• Guijarro Carlos. (2016) Anticuerpos monoclonales contra PCSK9: de

banco a clínica. Clin Investig Arterioscler; (supl. 2): 14-21. doi: 10.1016 /
S0214-9168 (16) 30166-8.