Técnicas a través de las cuales células procariontes o

eucariontes crecen en condiciones de laboratorio

controladas.
Cultivos Celulares Primarios: cultivos celulares obtenidos
a partir de tejidos normales o patológicos mediante
disgregación o explantes de tejidos u órganos.

Cultivos Celulares Secundarios: Las células suelen crecer

hasta cubrir la superficie del recipiente de cultivo.
-Contacto entre las células se detiene temporalmente su
proliferación.
Cultivos celulares estables CONTINUOS:
Cultivos celulares obtenidos a partir de líneas celulares primarias,
que hayan sufrido un fenómeno de transformación.
Células humanas o animales, derivadas de un cultivo primario que
se utilizan para estudiar sus propiedades y respuestas a estímulos.

Cuando se pueden propagar de forma indefinida en sub-cultivos in

vitro, se denominan líneas establecidas.

Presentan una capacidad indefinida de crecimiento.

Son un excelente material para estudiar diferentes aspectos de la

biología celular.
Líneas Celulares Humanas

HeLa (cáncer cervical)

Hep-G2 (cáncer de hígado)
DU145 (cáncer de próstata)
Lncap (cáncer de próstata)
MCF-7 (cáncer de mama)
MDA-MB-438 (cáncer de mama)
PC3 (cáncer de próstata)
T47D (cáncer de mama)
THP-1 (leucemia mieloide aguda)
Virus HeLa
Líneas celulares de Primates

•Vero (células epiteliales de riñón de mono verde

Africano Chlorocebus.

Líneas celulares de tumor de Rata

•GH3 (tumor de hipófisis)

•PC12 (feocromocitoma)

Líneas celulares de ratón

•MC3T3 (embrionaria craneal)

Es posible incorporar ADN a las células en un cultivo, para que
ocurra el proceso de transfección.

Electroporación: Formación de poros en superficie celular.

Biobalística: Disparo de micro proyectiles recubiertos de ADN

dentro de la célula.

Transfección Viral: Incorporación de ADN a través de virus.

Bacteriófago

Biobalistica…
Las células cultivadas en laboratorio también pueden utilizarse
para generar hibridomas.

Esta fusión se estimula por compuestos que aumentan la

permeabilidad de las membranas plasmáticas.

Los hibridomas son muy útiles en la generación de anticuerpos

monoclonales.
Son anticuerpos homogéneos, producido por
una célula híbrida, producto de la fusión de
un clon de linfocitos B, descendiente de una
sola y única célula madre y una célula
plasmática tumoral.
Se utilizan anticuerpos para localizar proteínas dentro de un
tejido o célula.

Una técnica usada ampliamente para localizar una proteína

corresponde a la inmunolocalización.

Se utilizan anticuerpos monoclonales por su especificidad , al

reconocer un único lugar antígeno.
1.- Inmunización: Se inyecta la proteína a estudiar en el organismo.
Se activan linfocitos B.

2.- Producción de hibridomas: Se fusionan células plasmáticas con

células tumorales de mieloma.
Hibridomas resultantes tienen la capacidad de producir
anticuerpos requeridos y multiplicarse rápidamente.
3.- Selección de células híbridas: Los hibridomas son cultivados
en un medio especial denominado HAT.
Se eliminan las células tumorales y las células plasmáticas
no fusionadas.

4.- Identificación de célula productoras de anticuerpos: No

todas la células sobrevivientes producen anticuerpos contra la
proteína en cuestión.
Se utilizan pruebas bioquimicas.
Se aíslan las células y se mantienen en condiciones que
les permitan dividirse y generar clones de hibridomas que
producen todos el mismo anticuerpo.
Así, es posible usar los hibridomas para
producir los anticuerpos contra la proteína en
estudio.

Los anticuerpos son aíslados y marcados para

poder ser detectados en la proteína buscada.