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Generacin de Hibridomas: Las lneas celulares

permanentes que
secretan anticuerpos monoclonales

Christian Gavilnez y Lizbeth Moreno


Anticuerpo Monoclonal
Un anticuerpo monoclonal es un anticuerpo homogneo producido
por una clula hbrida producto de la fusin de un clon de linfocitos
B descendiente de una sola y nica clula madre y una clula
plasmtica tumoral.
Cuando una sustancia extraa penetra o se inyecta en el cuerpo de
un vertebrado, el organismo secreta Anticuerpos a travs de
clulas Plasmticas.
Produccin de anticuerpos monoclonales

Tipo de protena producida en el laboratorio que se


puede unir a sustancias del cuerpo (tumorales)

Muchas clases

Cada anticuerpo monoclonal se elabora para localizar a


una sustancia.

Se usan para tratar algunos tipos de cncer y estn en


estudio para el tratamiento de otros.

Se pueden usar solos o para transportar medicamentos,


toxinas o materiales radiactivos directamente a un
tumor.
Fusionar linfocitos B con clulas de mieloma
(cancerosas) y obtener un hibridoma: una
lnea celular inmortal capaz de producir
anticuerpos especficos (monoclonales).
La vida media de los linfocitos es de dos
meses.

Linfocito B de produccin continua de


anticuerpos poblacin basal de
inmunoglobulinas.

Clula tumoral maligna que nunca muriera +


LB hibridomaque se dividiera
continuamente.
Un Ag.. Como por ejemplo una protena, tiene
varios sitios diferentes que pueden reaccionar a
distintos Acs.
Los Acs monoclonales son Acs que reaccionan solo en un sitio
en un Ag denominado epitope

Extremadamente especificos
Generacin de los Hibridomas

Paso 1: Inmunizacin de ratones y seleccin de los donantes de


ratn Para la generacin de clulas de hibridoma
Los ratones se inmunizan con un antgeno que se prepara para la
inyeccin
En general, los ratones son inmunizados cada 2-3 semanas
Los ratones inmunizados se sacrifican y el bazo extrado para usar
como una fuente de clulas para la fusin con clulas de mieloma.
Paso 2: Proyeccin de ratones para la produccin de anticuerpos
Mediante ensayos inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y
citometra de flujo
Si el ttulo de anticuerpos es alta, la fusin celular se puede realizar.
Si el ttulo es demasiado bajo, los ratones pueden ser impulsadas
hasta que se logra una respuesta adecuada
A continuacin, los ratones son sacrificados y sus bazos extraidos para
la produccin de clulas de hibridoma in vitro
Uso de anticuerpos
monoclonales
Los anticuerpos monoclonales
constituyen una tecnologa que abre
enormes perspectivas tanto en la
investigacin bsica como aplicada.
En todos aquellos procesos en que ya se estaba
utilizando la reaccin antgeno/anticuerpo, los
anticuerpos monoclonales agregan especificidad y
reproducibilidad, con lo que permiten estudiar mejor
el fenmeno.
Diagnostico clnico

1. Diagnstico del embarazo.


2. Identificacin del rotavirus.
3. Diagnstico precoz del cncer.
4. El desarrollo de mtodos diagnsticos no
invasivos.
Anticuerpos Monoclonales en
Teraputica

1. Anticuerpos monoclonales se utilizan en la


terapia de pacientes con leucemia linfoblstica
resistente a la terapia convencional.
2. Uso de anticuerpos monoclonales en el
tratamiento del cncer.
3. Anticuerpos monoclonales para prevenir el
rechazo del trasplante renal.
Los anticuerpos monoclonales se han convertido en una importante herramienta
para el diagnstico y el tratamiento del cncer.
El uso clnico de anticuerpos monoclonales murinos es limitado, ya que el
sistema inmunitario del husped los reconoce como cuerpos extraos y un uso
prolongado provoca la aparicin de anticuerpos antimurinos humanos, que
pueden neutralizar a los anticuerpos monoclonales, incrementar la eliminacin
de estos anticuerpos del organismo y, en algunos casos, provocar alergias.
Aplicaciones en Investigacin
Bsica
En investigacin bsica, el uso de anticuerpos
monoclonales es imposible de resumir y la literatura
cientfica de los ltimos aos est plagada de
publicaciones en que se utilizan anticuerpos monoclonales
con los ms diversos objetivos. Ellos se estn utilizando,
por ejemplo, para caracterizar y purificar nuevas
sustancias biolgicas, como las interleuquinas, la
caquectina, encefalinas, endorfinas, morficeptinas, y
muchas otras que constantemente se estn describiendo.
Otras publicaciones los utilizan como marcadores
celulares, ya sea en embriologa y en diferenciacin
celular.
Del mismo modo, los
anticuerpos monoclonales se
estn utilizando para
identificar antgenos en
algunas clulas del sistema
nervioso con el objeto de
conocer cmo las clulas
nerviosas se interconectan.
Otras investigaciones los
utilizan para estudiar los
mecanismos por los cuales las
clulas se reconocen entre s,
formando estructuras tisulares.
Los anticuerpos monoclonales
han sido utilizados para
bloquear e identificar estas
molculas y as contribuir a
aclarar este desconocido
fenmeno.