GUIA DE PRACTICAS DE BIOLOGIA MOLECULAR MEDICINA HUMANA

PRACTICA N°1: EXTRACCION DE ADN

OBJETIVOS

 Conocer el principio y método de extracción de ADN por columnas de

sílica.
 Extraer ADN a partir de glóbulos blancos
INTRODUCCION:
La extracción de ADN constituye el paso inicial y fundamental de las técnicas
moleculares, la obtención exitosa de datos confiables y reproducibles dependen
en gran medida de la extracción de ADN íntegro y puro.
La extracción de ADN consiste en aislar y purificar la molécula de ADN, se han
diseñado distintos protocolos con el objetivo de obtener la cantidad y calidad de
ADN adecuada, estos métodos de extracción pueden varias desde horas hasta
días; en general la extracción de ADN puede dividirse en cinco etapas:

 Homogenización del tejido

 Lisis Celular
 Separación de proteínas y lípidos
 Precipitación del ADN
 Dilución del ADN

Un paso fundamental para la obtención del ADN es una buena selección del
método de extracción esto va a depender del organismo, del tejido a usar, del
estado de conservación de la muestra, etc.,
Con el fin que los alumnos conozcan las diferentes técnicas para la extracción de
ADN se describen los procedimientos para extraer ADN de diferentes tipos de
muestras.

ALINEAMIENTO DE COMPETENCIAS:

CE 2. Interpreta y analiza los métodos empleados en biología molecular para el

estudio del genoma y la genética humana

MATERIAL Y EQUIPOS

 Alcohol 75%
 Jeringa, liga y aguja
 GeneJET Whole Blood Genomic DNA kit, Thermofisher
 GeneJET Genomic Purificaction Kit

PRIMERA FASE J. SANCHEZ, M. MANRIQUE

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 Vórtex.
 4 juegos de Micropipetas (10, 200, 1000 Ul),
 Centrífuga,
 Microcentrífuga
 Balanza analítica.
 Micro tubos de 1.5mL
 Gradilla
 Tubo con anticoagulante Vacutainer
 Parafilm
 Puntas de micropipetas 0,2-0,5-1 mL

METODO DE COLUMNAS DE SÍLICA: WHOLE BLOOD GENEJET

1. Preparar las soluciones de acuerdo a las instrucciones del fabricante,
marcar con una X las botellas de uso
2. Seguir las indicaciones del manual de uso del kit para sangre entera.
Brevemente los pasos para el kit Whole Blood GeneJET DNA son:

PRIMERA FASE J. SANCHEZ, M. MANRIQUE

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METODO DE COLUMNAS DE SÍLICA: GENOMIC DNA GENEJET

1. Preparar las soluciones de acuerdo a las instrucciones del fabricante,
marcar con una X las botellas de uso
2. Seguir las indicaciones del manual de uso del kit para sangre entera.
Brevemente los pasos para el kit GeneJET Genomic DNA son:

PRIMERA FASE J. SANCHEZ, M. MANRIQUE

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CUESTIONARIO PARA CASA

1. Realice un esquema grafico con los pasos de los protocolos GeneJET

utilizados
2. Haga un esquema con los pasos principales de una extracción de ADN
3. Describa el método de extraccion por fenol-cloroformo

BIBLIOGRAFIA

Bustamante Javier Andrés y Colb (2011) Evaluación de dos métodos de

extracción de adn a partir de biopsias fijadas en formalina y embebidas en
parafina en condiciones no óptimas Acta biol. Colomb., Vol. 16 N.o 2, 2011 83 – 98.

PRIMERA FASE J. SANCHEZ, M. MANRIQUE