Está en la página 1de 6

Universidad Abierta y a Distancia de México

Docente: Jorge Alberto Alvarado castro

Materia: Biología Molecular II

Grupo: BI-BBM2-1802-B1-001

Nombre del alumno: Mayra Esthela Armenta Ponce

Numero de Matricula: ES1521207497

Actividad 1: Foro de construcción del conocimiento U1.

Correo Institucional: JH2308me76@ nube.Unadmexico.mx

Correo Personal: mayra2377@hotmail.com

03 Julio 2018
¿Cuáles son las técnicas de biología molecular para la extracción,
purificación y amplificación de ácidos nucleicos?

En las técnicas de biología molecular, existen múltiples métodos para la extracción


y purificación de los ácidos nucleicos (DNA, RNA total, RNA mensajero), la fuente
del DNA (sangre completa, tejido fresco o congelado, tejido en parafina, hueso,
etc.) y la utilización final (PCR, blotting, rtPCR). Independientemente del tipo de
DNA y de la muestra que vayamos a emplear, la técnica de extracción de ácidos
nucleicos debe incluir las siguientes fases:

1. Lisis celular: usualmente se consigue mediante mecanismos de


desnaturalización (uso de detergentes, medios hipotónicos o calentamiento
a 80-100º, que no afectan la estabilidad de los ácidos nucleicos).

2. Inactivación de las nucleasas: las condiciones desnaturalizantes


usualmente también alteran las proteínas y producen inactivación de las
nucleasas. Si quiere obtenerse RNA, se someterá la muestra a DNAsas
libres de RNAsas, que pueden obtenerse comercialmente.

3. Separación y purificación: una vez lisadas las células se mezcla la


preparación con fenol-cloroformo. El fenol diluye las proteínas (el
cloroformo diluye a su vez el fenol) por ser hidrófobas. Como los ácidos
nucleicos, por su contenido en fosfato, son hidrófilos, van a diluirse en la
fase acuosa formándose estas dos fases tras la centrifugación de la
muestra, finalmente la fase acuosa se pasa a otro tubo donde se mezcla
con etanol absoluto produciéndose un precipitado blanquecino (ácido
nucleico), que se extrae mediante una pipeta Pasteur.
Técnicas en biología molecular

 Extracción de DNA
 Extracción de RNA
 Análisis y cuantificación de los ácidos nucleicos
 Amplificación del DNA
 Reacción en cadena de la polimerasa( PCR)
 Existen otros métodos que son rápidos para purificar DNA y esto implica el
uso de kits comerciales, que si bien son caros, son altamente efectivos, y
estos contienen todo lo necesario para llevar a cabo el proceso completo y
solo es cuestión de seguir el protocolo incluido.

¿Qué aplicaciones tienen estas técnicas de biología molecular?


Tiene muchas aplicaciones generalmente se usa en el diagnóstico de
enfermedades hereditarias, búsqueda de alelos más o menos frecuentes, en el
diagnostico viral (HIV, Hepatitis C y otros) identidad forense, paternidad, plantas.
PCR, marcadores moleculares, etc.

Bibliografía consultada

Iglesias, G. Blog educativo y de divulgación de genética. Técnicas de biología


molecular. Recuperado de: https://genmolecular.com/tecnicas-de-biologia-
molecular/

Jiménez, A. (2003). Manual de neurogenética. Edición Díaz de santo. Madrid.


Cap. (2). 23- 25. Extraído el 03 Julio de 2018 desde:
https://books.google.com.mx/books?isbn=8499699979

Biología molecular II. Biología molecular de ácidos nucleicos.


https://unadmexico.blackboard.com/bbcswebdav/institution/DCSBA/Bloque
%201/BT/06/BBM2/U1/Unidad1.Biologiamoleculardeacidosnucleicos_131216.pdf