TÍTULO DEL ENCABEZADO

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1. Inmunodeficiencias. Tipos:

Las inmunodeficiencias son enfermedades causadas por un defecto en la inmunidad

específica o innata del individuo caracterizada por mayor susceptibilidad a padecer
infecciones graves y recurrentes.

● Inmunodeficiencias primarias: Trastornos causados por defectos genéticos que

afectan al sistema inmunitario y que se suelen manifestar desde la infancia, suelen
ser hereditarias. Sus manifestaciones clínicas no se identifican con claridad solo se
sospecha de su presencia
➔ Deficiencias del sistema del complemento (trastorno genético autosómico
transmitido de forma recesiva)
➔ Deficiencias de la función fagocítica (menor cantidad de fagocitos)
➔ Deficiencias de anticuerpos (retraso en la síntesis de inmunoglobulinas por
parte del lactante)
➔ Inmunodeficiencias combinadas (defectos en la LT y LB)
● Inmunodeficiencias secundarias: Si presenta disminución en sus defensas se
denomina huésped comprometido
2. Técnicas diagnósticas:
● Deficiencias del sistema del complemento: Técnicas como la determinación sérica
de los sistemas de complemento y la evaluación de la actividad lítica por parte del
complemento
● Función fagocítica
➔ Cuantificación de granulocitos y monocitos
➔ Evaluación de la morfología de dichos granulocitos y monocitos
➔ Evaluación de la actividad enzimática de fagocitos
➔ Evaluación de la producción de anión superóxido
● Respuesta inmunitaria humoral
➔ Recuento de linfocitos B estudiando sus antígenos de diferenciación
linfocitaria
➔ Determinación de la concentración sérica de determinados Ig
➔ Evaluación de la producción de Ig in vitro mediante la estimulación con
mitógenos
● Respuesta inmunitaria celular
➔ Recuento de linfocitos totales
➔ Recuento de linfocitos T gracias al estudio de la expresión de sus antígenos
de diferenciación linfocitaria
➔ Evaluación de la actividad enzimática de linfocitos
➔ Evaluación de la respuesta proliferativa in vitro a la estimulación con
mitógenos
➔ Evaluación de la respuesta proliferativa a la estimulación con antígenos

3. Métodos generales de estudio de poblaciones celulares:

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Para separar y aislar las células inmunes se utilizan los siguientes métodos:

● Métodos físicos: Aislamiento por centrifugación en gradiente de densidad y la

separación por adhesión selectiva de las células inmunitarias
● Estudio de marcadores y antígenos de membrana: Se utilizan técnicas para
diferenciar entre linfocitos B y T, se basan en diferenciar las características
específicas de receptores de membrana que se encuentran en ambas poblaciones
linfocitarias
➔ Linfocitos B: Marcador de inmunoglobulinas, receptores para el fragmento Fc
de la inmunoglobulina y receptores del sistema de complemento, realizamos
pruebas de inmunofluorescencia directa, marcando linfocitos con
anticuerpos monoclonales con fluoresceína
➔ Linfocitos T: Presentan antígenos específicos en la superficie, se utilizan Ac
marcadores con fluoresceína y utilizamos métodos basados en la formación
espontánea de rosetas expuestos a eritrocitos no tratados
4. Técnicas de separación de las células de la respuesta inmune:
● Separación mediante gradientes de densidad: Se mezcla sangre heparinizada con
una solución de dextrano, cuando se sedimenta la muestra a temperatura ambiente
se obtiene un plasma con gran cantidad de neutrófilos, monocitos y linfocitos
● Separación celular inmunomagnética: Se utilizan esferas microscópicas con
propiedades magnéticas, cubiertas por un anticuerpo monoclonal específico para un
antígeno de superficie de las células que queremos separar, obteniendo
preparaciones enriquecidas en determinados tipos de células. Al aplicar el imán las
microesferas se pegan a las paredes del tubo de ensayo recogiendo la suspensión
de células y purificando.
5. Técnicas de separación de linfocitos por centrifugación en gradiente de
densidad con Ficoll:

Se basa en la centrifugación sobre una solución de densidad definida que permite que los
eritrocitos y granulocitos se hundan, haciendo que las moléculas mononucleares floten.

Primero se diluye la muestra, se estima su volumen y se deposita un tercio de volumen en

un tubo de ensayo, se deposita la muestra en una pipeta dejando que caiga Ficoll para que
no se mezclen, tras la centrifugación se observan varias capas de linfocitos plaquetas y
plasma, se separan los linfocitos con PBS, se retira el sobrenadante y se suspenden las
células y se añade el medio para conservar linfocitos

6. Técnicas que valoran la funcionalidad de las células inmunes:

● Se cuantifica inmunoglobulinas, se valora el isótopo IgG que contribuye al
diagnóstico de inmunodeficiencias
● Citometría de flujo valorando marcadores de superficie de expresión diferencial

El recuento se realiza en cámaras de Neubauer para facilitar el recuento

● Ensayos de proliferación (linfocitos aislados por Ficoll, se mide la respuesta celular)

● Reacción linfocitaria mixta (linfocitos proliferan cuando son incubados con Ag