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UNIVERSIDAD NACIONAL “PEDRO

RUIZ GALLO”
FACULTAD DE MEDICINA
VETERINARIA

INMUNOMODULACIÓN
INMUNODIAGNÓSTICO
Clase – Conferencia 11
César Morante Chavarry
Médico Veterinario
Facultad de Medicina Veterinaria UNPRG

Las citoquinas

Las citoquinas son
proteínas que permiten la
comunicación entre las
células.

La mayor parte de las células producen citoquinas

Además. y actúan sobre las células diana que expresan en su membrana receptores específicos para una citoquina dada.PROPIEDADES GENERALES Y FUNCIONES Las citoquinas son secretadas por varias células implicadas en la respuesta inmune como respuesta a un estímulo. en el suero se han detectado receptores solubles para las distintas . La unión de una citoquina a su receptor de membrana transmite una señal hacia el interior celular que conduce a cambios en la activación y expresión de genes.

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uniéndose a células distantes.Las citoquinas pueden actuar sobre muchos objetivos celulares diferentes. . uniéndose a la misma célula que la secreta. actuando sobre una célula cercana y. c) en algunas ocasiones. con una acción endocrina. b) paracrina. con una acción: a) autocrina.

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Sinérgica o Antagonista. Redundante. . la acción de las citoquinas puede ser: Pleiotrópica.Además.

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Las citoquinas tienen un papel importante en: La reacción inflamatoria La hematopoyesis La respuesta inmune innata La respuesta inmune adquirida .

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Citoquinas de la respuesta inmune específica .

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Citoquina .

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PRINCIPALES CITOQUINAS .

INTERLEUCI NAS .

INTERLEUCI NAS .

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Interleucina – 6 .

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En los macrófagos activa la lisis de los microorganismos fagocitados gracias a la secreción de otras citoquinas que amplifican la estimulación de los  macrófagos.La IL-12 es central en la respuesta inmune. Es producida por macrófagos activados como por células dendríticas. .

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leucocitos y otras células – Necesarias para la hematopoyesis • Estimulan crecimiento y diferenciación de células progenitoras – Reposición de leucocitos consumidos reacciones inflamatorias e inmunes en • Algunas citoquinas se denominan “factores estimuladores de colonias” – CSF .Citoquinas que estimulan la hematopoyesis • Producidas por células estromales de la médula ósea.

Citoquinas que estimulan la
hematopoyesis
• Factor de células troncales (stem cell factor)
– Sintetizado por células estromales de médula ósea
– Hace stem cells sensibles a otras citoquinas

• IL-7  Sintetizada por células estromales de MO
– Estimula la sobrevida y maduración de progenitores linfoides

• IL-3  producida por linfocitos T CD4
– Actúa sobre progenitores inmaduros de médula ósea 
estimula diferenciación a todos los tipos de células maduras

• G-CSF, GM-CSF, M-CSF
– Producidas por LT, MØ, céls endoteliales y estromales de MO
– Aumentan producción de leucocitos inflamatorios

Quimioquinas
• Proteínas que estimulan los movimientos de
leucocitos y regulan la migración de
leucocitos desde la circulación a los tejidos
• Producidas por leucocitos y otras células
• Reclutan células de defensa hacia sitios de
infección  aumento afinidad de integrinas
por ligandos, gradiente química
• Regulan tráfico de linfocitos y otros
leucocitos a través de los tejidos linfoides
periféricos

Rol de las citoquinas en la inmunidad innata e inflamación • Bacterias piógenas  MØ producen TNF. IL-1 y quimioquinas – TNF e IL-1  en endotelio vascular  moléculas adhesión  unión PMN y monocitos – Quimioquinas (MØ y células endoteliales)   extravasación de leucocitos hacia sitio de infección • MØ  IL-12 (bacterias intracelulares y G-)   IFN (NK y LT)  activación MØ para destrucción microorganismos fagocitados – Diferenciación LT a TH1  inmunidad celular contra bacterias intracelulares .

Rol de las citoquinas en la inmunidad innata e inflamación • Reclutamiento y activación leucocitos inducidos por citoquinas  daño a tejidos normales (infecciones) – Manifestaciones sistémicas de la infección • Infecciones virales  células infectadas y MØ secretan IFN tipo I  inhibe replicación e infección • Citoquinas producidas en respuesta a diferentes tipos de infecciones influyen en naturaleza respuestas innatas – Bacterias piógenas  PMN – Bacterias intracelulares  MØ – Virus  células NK .

• Se utilizan Ac específicos para detectar o identificar un antígenos.SEROLOGÍA • Definición: medición de las interacciones antígeno – anticuerpo. • La detección de Ac específicos permite establecer si el animal estuvo expuesto a un antígeno en especial. • Objetivo: diagnóstico. .

Puede congelarse. Se inactiva a 56º C por 30 minutos. Suero de cobayo. • Complemento: Componente normal de los sueros. • Antiglobulinas: • Anticuerpos monoclonales. .REACTIVOS EMPLEADOS EN LAS PRUEBAS SEROLÓGICAS • Suero: puede guardarse congelado.

Suelen ser menos sensibles que las anteriores. . Miden el efecto protector real de los anticuerpos en un animal. Son muy sensibles. • Unión secundaria: miden los resultados de la interacción antígeno – anticuerpo in vitro . • Unión terciaria: son más complejas.TIPOS DE PRUEBAS SEROLÓGICAS • Unión primaria: miden directamente el enlace de antígenos y anticuerpos.

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.PRUEBAS DE UNIÓN PRIMARIA • Se realizan combinando antígenos y anticuerpos. • Se utilizan marcadores: radioisótopos. colorantes fluorescentes o enzimas para identificar uno de los reactivos. • Luego se mide la cantidad de inmunocomplejos formados.

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Radioinmunoanálisis competitivo .

Inmunofluorescencia .

Principio de la prueba de inmunoadsorbente ligado a enzima (ELISA) .

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Electroinmunotransferencia (Western blotting) .

• Avidina – biotina.OTRAS PRUEBAS DE FIJACIÓN PRIMARIA • Inmunoperoxidasa en tejidos fijados. . peroxidasa del rábano picante. galactosidasa beta. • Enzimas utilizadas: fosfatasa alcalina.

. la célula se lisará.PRUEBAS DE UNIÓN SECUNDARIA • La reacción entre antígeno y anticuerpo por lo general va seguida de una segunda reacción. • Si los anticuerpos son particulados los complejos pueden aglutinar. • Si el anticuerpo activa el complemento y el Ag se encuentra en la superficie celular. • Si los anticuerpos son solubles los complejos pueden precipitar.