INFORME PRACTICO

NOMBRE: Yomara Bautista Camacho FECHA: 16/05/14

MATRICULA: 10647
DOCENTE: Andrea Schnorr Vargas
NOTA: MATERIA: Enzimologa y T. de las Fermentaciones
NOMBRE DE LA PRACTICA: ADN de las levaduras
N PRACTICA: 7

OBJETIVOS:
OBJETIVO GENERAL:
Realizar en laboratorio la extraccin del ADN de levaduras.

OBJETIVOS ESPECIFICOS:
Realizar el rompimiento de la pared celular de la levadura.
Disolver el ADN y realizar la desnaturalizacin de la levadura.
Observar la precipitacin del ADN al fondo del vaso.

INTRODUCCION:
La informacin que permite vivir a los seres vivos est contenida en los cidos nuclecos. Estos
son macromolculas compuestas por nucletidos, que tienen en su estructura un azcar (ribosa o
desoxirribosa), una base nitrogenada (adenina, guanina, citosina, timina, uracilo) y un grupo fosfato. En
principio, segn el azcar que forma su esqueleto se distinguen dos tipos de cidos nuclecos: el ADN,
con desoxirribosa y el ARN, con ribosa. El ADN contiene la informacin gentica necesaria para la
sntesis de las protenas que forman los seres vivos y llevan a cabo todos los procesos fisiolgicos de los
seres vivos. El ARN tiene diversas funciones siendo una de las principales el transporte de la
informacin desde el ADN hasta la maquinaria donde se producen las protenas. A nivel estructural
encontramos que mientras el ADN se encuentra mayoritariamente formado por por una doble hlice con
dos hebras complementarias, el ARN est formado por molculas de una sola hebra que se pliegan sobre
s mismas adquiriendo estructuras internas.

En su estructura secundaria, y de acuerdo a los diversos estudios fisicoqumicos, el ADN en solucin
acuosa ha demostrado que se trata de un polmero de elevado peso molecular (5 x 106) y que ofrece una
configuracin ms bien rgida y distendida. Entre las consecuencias de su elevado peso molecular y de la
rigidez de sus molculas se destaca la elevada viscosidad de las soluciones acuosas de ADN. Una
solucin de ADN tiene una densidad mucho mayor que la del agua. Otra consecuencia de las citadas
propiedades de la molcula de ADN es la gran facilidad con que las fuerzas de friccin reducen su peso
molecular por rotura de su cadena. Es prcticamente imposible obtener a partir de material biolgico
ADN sin que tenga cierto grado de friccin, por lo que es muy probable que los pesos moleculares del
ADN aislado tengan poco que ver con el tamao de la molcula del ADN in vivo.

Debido a que el ADN es la molcula que almacena la informacin precisa para que un ser vivo pueda
llevar a cabo todas las funciones que necesita, su aislamiento de clulas y tejidos es el primer paso en
muchas investigaciones en biologa.

El aislamiento del ADN tambin es empleado en diversos campos como la medicina, la biotecnologa o
la criminologa para obtener mejores terapias, mejorar cosechas o identificar individuos. Cuando se
habla del ADN hay que diferenciar el ADN genmico, que se encuentra en el ncleo y contiene la
mayora de los genes, de los ADNs extranucleares, que se encuentran en la mitocondria y el cloroplasto
y contienen la informacin de ciertas protenas necesarias para el funcionamiento de esos orgnulos
celulares.

En el presente informe se muestra un mtodo de extraccin del ADN de levadura en cuatro fases:

1. Rotura de las clulas de levadura.
2. Homogeneizacin del extracto en presencia de detergente.
3. Desnaturalizacin de las protenas ligadas al ADN.
4. Precipitacin del ADN con etanol.


PROCEDIMIENTO DE ANALISIS

ADN de las Levaduras:








Pesar 120 gr de
levadura
Aadir 150ml de agua
fria a la levadura
Aadir una cucharada
de sal
Aadir dos chorros de
limon
Agitar
suavemente
Colar
Repetir filtrado
(conservar la
pulpa)
Preparar 150ml de agua fria + 1
cucharada de sal+ 3 cucharadas de
alcohol + 2 gotas de detergente
Agregar a la
pulpa y mezclar
Revolver
suavemente por
20 minutos
Agregar 3
cucharadas de
sal y agitar 10
minutos
Dejar reposar
Conservar liquido
Diluir el liquido con 3
veces su volumen de
alcohol
Observar el ADN
precipitado en el fondo
del vaso

ANALISIS Y RESULTADOS
N NOMBRE DEL ANALISIS RESULTADOS ANALISIS DE RESULTADOS




1




ADN de las Levaduras






Se observo:
El ADN de las levaduras
en forma de finas hebras
blancas.

El mtodo de extraccin del
ADN de levadura permiti la
obtencin pequeas y finas
hebras blancas.

El primer paso de la extraccin
permiti la ruptura de las clulas
de levadura por un medio de la
adicin de sal y limn. El
detergente permiti la
degradacin de los componentes
celulares para permitir la
liberacin del ADN. Finalmente
la adicin de etanol (un
disolvente con polaridad media)
permite la precipitacin del
ADN.

Este extracto representa en su
mayor parte ADN, sin embargo,
es muy probable que esta
muestra no se encuentre
totalmente pura y que contenga
cantidades considerables de
impurezas como ARN.

Debido a esto el mtodo
presentado en la presente
prctica podra ser utilizado
como un mtodo de extraccin
inicial siendo necesarios otros
procedimientos de purificacin
para obtener un ADN mucho
ms puro.







2





































CONCLUCIONES

Se realiz una prctica de extraccin y caracterizacin de ADN a partir de la levadura.

El primer paso de la extraccin permiti la ruptura de las clulas de levadura por un medio de la adicin de
sal y limn. El detergente permiti la degradacin de los componentes celulares para permitir la liberacin
del ADN. Finalmente la adicin de etanol (un disolvente con polaridad media) permiti la precipitacin del
ADN mediante la desnaturalizacin de la levadura.

El ADN obtenido se presento en forma de finas hebras blancas.


CUESTIONARIO

1. Qu es ADN como est formado y qu funcin cumple?
El ADN es una molcula formada por unidades de nucletidos.
Cada nucletido est formado por:
Un grupo fosfato
Un azcar llamado desoxirribosa
Una base nitrogenada que puede ser adenina, timina, guanina o citosina
Su funcin es guardar y trasmitir la herencia gentica de progenitores a descendientes.

2. Cul es la importancia de ADN en las levaduras de uso alimentario?
Las levaduras transgnicas se usan principalmente en la industria alimentaria, en la produccin de
aditivos alimentarios, aminocidos, pptidos, cidos orgnicos, polisacridos y vitaminas.

3. Cuntas molculas de ADN tienen las levaduras?
Las levaduras en estado haploide tienen 16 cromosomas y por tanto 16 molculas de DNA, pero
tambin existe un estado diploide que tiene 32 cromosomas y por tanto 32 molculas de DNA.

4. Qu utilidad prctica tiene sintetizar en laboratorio los cromosomas de la levadura de la cerveza?
Una de las utilidades practicas que tiene la sntesis de los cromosomas de la levadura de la cerveza,
es incrementar la eficiencia de la levadura eliminando los genes no esenciales. Ya que muchos de sus
genes son prescindibles y suponen un consumo de energa innecesario.