Fotosíntesis 1:

La conversión de energía solar en energía

química

1
Irene Baroli Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
¿Cómo transforman las plantas la
energía de la luz solar en alimento?
¿Qué función cumple la clorofila?
¿Qué conexión existe entre la estructura
de los cloroplastos y su función?
¿De donde viene el oxígeno que
respiramos?

2
 Repaso: Las enzimas
Las enzimas aceleran las
reacciones espontáneas
disminuyendo la energía
de activación

Raven Biology of Plants 2013

3
 Las enzimas
Ejemplo de reacción
sustrato: sacarosa
enzimática: hidrólisis de
sacarosa (disacárido) en
sus dos componentes
monosacáridos

productos: glucosa y
fructosa

Raven Biology of Plants 2013

4
 Caminos metabólicos
Varias reacciones enzimáticas operando en serie, cada paso
catalizado por una enzima diferente
El resultado final es la modificación del sustrato
¿Qué ocurre si una enzima deja de funcionar?
Raven Biology of Plants 2013

¿De dónde viene la energía necesaria para que proceda una reacción endergónica?
5
El ATP y el flujo de energía metabólica

Raven Biology of Plants 2013

Acoplamiento de reacciones
endergónicas con reacciones
exergónicas mediante los enlaces
fosfato del ATP
Síntesis e hidrólisis de ATP
6
 FOTOSÍNTESIS
•El proceso que captura la energía del sol para
su uso en toda la biósfera: es la base de la
trama trófica, alimenta la vida en el planeta

•Las reservas de energía fósiles del planeta

(petróleo, carbón) también resultaron de la
fotosíntesis, en tiempos geológicos

•El oxígeno presente en la atmósfera deriva de

la actividad fotosintética de plantas y algas

Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA

 La fotosíntesis en el planeta
Distribución global de la productividad primaria neta
= fotosíntesis menos respiración (Fn=Ft-R)

Responsables: plantas terrestres, (macro)algas, fitoplancton

La mitad de la fotosíntesis del planeta ocurre en los océanos 8
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Reacción global de la fotosíntesis
Experimentos iniciales de fisiología de la fotosíntesis:

• von Helmont (Bélgica, ca. 1600): Las plantas no solo

consumen agua para crecer

• Priestley (Inglaterrra, ca. 1770): Las plantas restauran

el aire viciado

• Ingenhousz (Holanda, ca. 1770): Las plantas restauran

el aire viciado pero solo en presencia de luz

• van Niel, EE.UU., 1930: Las bacterias fotosintéticas no

liberan O2, ¿quién es el dador de electrones?

• Hill, RU, 1937: tilacoides aislados pueden generar O2

en ausencia de CO2 9
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Reacción global de la fotosíntesis

luz

Es una reacción de óxido-reducción (redox) en la que se

utiliza la energía solar para
• extraer electrones de (oxidar) la molécula de H2O y
usarlos para reducir CO2 a hidratos de carbono
• sintetizar ATP (transfiere energía química) y NADPH
(transfiere poder reductor)
Se libera O2 como subproducto de la oxidación del H2O

10
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 La fotosíntesis y la respiración
La fotosíntesis provee de azúcares y oxígeno tanto para la
misma planta (autótrofos) como para los heterótrofos que la
consumen

• Fotosíntesis total
• Respiración
• Fotosíntesis neta
11
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
La escala espacio-temporal de la fotosíntesis

Osmond. Ann. Rev. Plant Biol. 2014

12
¿Dónde ocurre la fotosíntesis?

En una cianobacteria
En un alga uni o multicelular
En una planta vascular

13
Video: Viaje desde la epidermis de la
hoja hacia el tilacoide

https://www.youtube.com/watch?v=pwymX2LxnQs

14
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Ultraestructura de un cloroplasto (18,000x)

membranas interna
y externa estroma

grana
lamelas
estromáticas

15
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Ultraestructura de un cloroplasto a mayor aumento
(50,000x)

tilacoide

grana

estroma

lamelas
estromáticas

16
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Ultraestructura de un cloroplasto
lamelas espacio inter-membrana

Taiz y Zeiger Plant Physiology 2010

estromáticas
membrana membrana
tilacoide externa

grana

tilacoide =
vesícula cerrada
DBBE FCEyN - UBA

tilacoide
estroma
lumen del
tilacoide lamelas
membrana grana estromáticas
interna
Introducción a la Botánica

El estroma es la fase acuosa, contiene todas las enzimas solubles de la fotosíntesis y

otros procesos enzimáticos del cloroplasto
Las membranas tilacoides contienen todos los componentes de captación de la luz y
conversión de energía lumínica en energía química 17
 La fotosíntesis ocurre en dos etapas
1. Etapa fotoquímica: captación y conversión de la
energía lumínica en membranas
• Captación de la energía lumínica por una antena de
pigmentos
• Conversión de esa energía lumínica en energía utilizable
por la materia viva (ATP y poder reductor = NADPH)
• Liberación de O2 como subproducto
2. Etapa bioquímica: reacciones enzimáticas en fase
acuosa
• Reducción de CO2 a hidratos de carbono con el NADPH y
el ATP generados en la etapa fotoquímica
18
Biodiversidad de Vegetales 2014 DBBE FCEyN - UBA
 Dos etapas de la fotosíntesis con separación espacial
DBBE FCEyN - UBA
Introducción a la Botánica

etapa fotoquímica ocurre en etapa bioquímica

los tilacoides ocurre en el estroma
genera ATP , NADPH y O2 consume ATP y NADPH 19
 La fase lumínica:

Propiedades de la luz visible

¿Quién capta la luz?

20
 La luz visible en el espectro electromagnético
La luz tiene naturaleza dual: ONDA (frecuencia, longitud) y PARTÍCULA
(fotones)
La energía de los fotones depende de la inversa de su longitud de onda

DBBE FCEyN - UBA

Introducción a la Botánica
fotones de baja
fotones de alta energía
energía

Relación entre la energía absorbida para excitar la molécula y

la longitud de onda: Ee-Eb=hc/l 21
 Luz reflejada y luz transmitida
¿Qué longitudes de onda vemos cuando un pigmento absorbe luz?

¿Qué moléculas biológicas absorben luz

visible? 22
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Pigmentos que captan la luz en fotosíntesis
clorofilas carotenoides

clorofila b
anillo
porfirínico En la fotosíntesis, los fotones
son absorbidos por pigmentos
Los pigmentos tienen dobles
ligaduras conjugadas
La longitud de onda de la luz
absorbida depende de la
estructura molecular del
pigmento
cadena Los pigmentos fotosintéticos
hidrofóbica están siempre asociados a
de fitol proteínas (que pueden o no
estar embebidas en la
clorofila a membrana) beta-caroteno
23
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Espectro de absorción de luz de los pigmentos
fotosintéticos
carotenoides clorofila b clorofila a
absorción relativa

Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA longitud de onda (nm) 24

 El espectro de absorción de la clorofila en relación con la luz
que llega a la Tierra

25
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
Absorción y transferencia de la energía lumínica de las
moléculas de clorofila
La clorofila se excita al absorber luz: Chl à Chl* y vuelve al nivel basal por:
•fluorescencia
•transferencia de energía a un pigmento cercano (en la antena)
•fotoquímica: liberación de un electrón (sólo en el centro de reacción)
nivel excitación
superior
azul

Introducción a la Botánica
liberación de
calor

longitud de onda (nm)

niveles de energía

nivel excitación
absorción de luz azul

inferior
rojo

DBBE FCEyN - UBA

•fluorescencia
•transferencia
absorción de

•fotoquímica fluorescencia
luz roja

absorción

estado basal 26
Cómo se ven la absorción y la fluorescencia de la Chl

Introducción a la Botánica
DBBE FCEyN - UBA
http://botit.botany.wisc.edu/Resources/Botany/Photosynthesis/Fluorescence.jpg.html
27
 Sensado remoto de la fluorescencia de la Chl
• Por satélites con detectores especializados
• Indica el estado de la vegetación de ecosistemas naturales
o de cultivos

https://nikal.eventsair.com/QuickEventWebsitePortal/flex-2017/esa-2017-meeting

https://agupubs.onlinelibrary.wiley.com/doi/10.1
002/2017GB005744

28
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Sensado remoto de la fluorescencia de la Chl
• Por satélites con detectores especializados
• Indica el estado de la vegetación de ecosistemas naturales
o de cultivos

29
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
Experimento de T. W. Engelmann: El espectro de acción de la
fotosíntesis y los pigmentos accesorios

En 1882

El espectro de acción muestra la respuesta fotosintética a diferentes long. de onda y

permite identificar los pigmentos involucrados en el proceso à La Chl a, Chl b y los
carotenoides cooperan en la absorción de la luz para la actividad fotosintética
medida como producción de O2 Introducción a la Botánica
30
DBBE FCEyN - UBA
 La fase lumínica de la fotosíntesis
• La fase lumínica de la fotosíntesis comienza con la absorción
de fotones por la clorofila (Chl) y otros pigmentos asociados
• La Chl y los otros pigmentos forman parte de complejos de
proteínas llamados fotosistemas que están ubicados de
manera específica en la membrana del tilacoide
• Los fotosistemas están formados por una antena captadora
de luz y un centro de reacción
• La orientación y disposición de los pigmentos determina el
sentido de la transferencia de la energía desde la antena
hacia los centros de reacción donde ocurre la fotoquímica
(liberación de un electrón)

Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA

Organización de las membranas tilacoides
Los componentes están dispuestos en la membrana de una manera
específica que optimiza su interacción y funcionamiento

Raven Biology of Plants 2013

32
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Estructura de los fotosistemas
Los fotosistemas están
embebidos en la membrana
del tilacoide

Están formados por una

antena captadora de luz y un
centro de reacción
responsable de la fotoquímica

Premio Nobel de Química 1988 por la estructura

del fotosistema de bacterias
33
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA Nabors Introducción a la Botánica 2006
 Estructura de los fotosistemas
Vista “desde arriba” fotosistema II (FS II o FS2)
antena móvil:
trímero con 40 Chl
a+b

fotosistema I (FS I o FS1)

dirección de la
transferencia de energía
lumínica

Fotosistema = centro de reacción (core) + antena

Son “complejos” de pigmentos unidos a proteínas, todo embebido en la membrana
tilacoidal
El tamaño de la antena (cuántas subunidades rodean al FS) depende de las
condiciones lumínicas de crecimiento de la planta o alga (menos luz à antena más
34
 Estructura de una proteína de la antena fotosintética
LHCII (Light harvesting
complex II)

Los pigmentos están

dispuestos y orientados de
manera específica dentro
de la proteína y con
respecto al plano de la
membrana
Esa estructura hace
posible su función como
captadores y
transportadores de
energía lumínica
La energía de excitación se
transmite por resonancia
(una molécula absorbe un
fotón y transmite la
energía) 35
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Pigmentos accesorios de cianobacterias y algas rojas

Las cianobacterias y las algas rojas presentan además otros pigmentos

accesorios llamados ficobilinas que absorben en longitudes de onda
donde la Chl a, la Chl b y los carotenoides no absorben luz
36
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Pigmentos accesorios de cianobacterias y algas rojas

cloroplasto de un alga roja con

ficobilisomas
Las ficobilinas están unidas a proteínas formando ficobilisomas, que son proteínas
periféricas (no atraviesan la membrana tilacoide)
La composición de los ficobilisomas está determinada por el ambiente lumínico al que
está expuesta el alga mediante expresión diferencial de genes
37
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 La fase lumínica:

¿Cómo se transforma esa energía

de la luz en energía útil para la
célula?

38
 Captación y transferencia de energía
la c
del lorofila
elec CR ce a exc
En el “corazón” de cada d
se i trón a e un itada
centro de reacción hay de nicia u l acep
t t
un par especial de elec ransfe na cad or y
tron renc ena
moléculas de Chl a es ia d
e

Los pigmentos fotosintéticos están organizados en la membrana del tilacoide de

manera de optimizar la transferencia de energía desde la antena hacia una molécula
de Chl a especial que está en el centro de reacción
39
Taiz y Zeiger, Plant Physiology 2006
Estructura de los centros de reacción

fotosistema II fotosistema I
La reacción fotoquímica (liberación de un electrón de la Chl a) se produce en el
centro de reacción
La disposición de las Chl a y de los otros cofactores favorecen la estabilización de
la separación de cargas entre la Chl a y el aceptor
El par especial de Chl a se denomina P700 en el PSI y P680 en el PSII (por sus
máximos de absorción de luz)
40
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
El fotosistema II extrae electrones del agua
Fotosistema II

e-
PQ

http://en.wikipedia.org/wiki/Photosynthetic_reaction_centre

Del lado interno del tilacoide (lumen) el fotosistema II contiene cuatro átomos de
manganeso en disposición especial que extraen electrones del agua, con los que se re-
reduce al P680 oxidado por efecto de la energía de la luz
Esta reacción es secuencial y como resultado se liberan O2 y protones (H+) en el lumen
del tilacoide
41
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 El fotosistema I produce poder reductor
Fotosistema I
NADPH (dador de electrones soluble)
ferredoxina

cofactores del FS I

El fotosistema I acepta electrones del lado del lumen de una proteína soluble
llamada plastocianina (PC), que re-reduce al P700 oxidado.
Del lado del estroma los electrones pasan a una proteína soluble llamada
ferredoxina (Fdx) que reduce NADP+ a NADPH y de esa manera los electrones se
hacen accesibles para las reacciones de reducción del CO2, que ocurren en el
estroma Introducción a la Botánica
42
DBBE FCEyN - UBA
Dos fotosistemas funcionando en forma cooperativa

Evidencia
experimental

Emerson R (1957). Dependence of

yield of photosynthesis in long wave
red on wavelength and intensity of
supplementary light. Science. 125:
746

Fotosistema I (FSI, P700) absorbe en el rojo lejano

Fotosistema II (FSII, P680) absorbe en el rojo
Efecto cooperativo: Al iluminar con las dos longitudes de onda la tasa
fotosintética es mayor que la suma de las tasas que producen las dos
longitudes de onda por separado (efecto Emerson)
Introducción a la Botánica 43 - UBA
DBBE FCEyN
Los fotosistemas operan en serie: ¿cómo se conectan?
• El complejo proteico citocromo b6f contiene centros redox
• Conecta el FS2 con FS1 oxidando plastoquinol (PQH2) proveniente del FS2
en la membrana y reduciendo plastocianina (PC) en el lumen. La PC va a
donar electrones al FS1
• En el proceso transporta H+ desde el estroma al lumen del tilacoide

Raven Biology of Plants 2013

44
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 El diagrama en Z del transporte de electrones de la
fotosíntesis
P700+
Potencial redox (energía de los electrones)

más

Nabors Introducción a la Botánica 2006

reductor
P680+

Esto es un
diagrama de
energías
más
oxidante potenciales
En cada fotosistema la llegada de energía lumínica al centro de reacción energiza una Chl a que libera un
electrón, que es recibido por un aceptor (=receptor) primario
La cadena de transporte de electrones lleva a la acumulación de protones dentro del lumen tilacoidal45
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
La fase lumínica: Ya creamos poder
reductor y O2

¿Cómo se transforma esa energía

de la luz en energía útil para la
célula?

¿Cómo se genera ATP?

46
La síntesis de ATP requiere la formación de un gradiente de H+ a través
de la membrana del tilacoide
André Jagendorf 1970’s:
• La actividad de la cadena de transporte de electrones (disparada por
la luz) lleva a la acumulación de protones en el lumen tilacoidal
• Gradiente de H+ a través de la membrana à DpH = fuerza protón-
motriz, suficiente para generar ATP

en la oscuridad

Proceso quimiosmótico de fotofosforilación

47
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 Proceso quimiosmótico de síntesis de ATP en la luz
(fotofosforilación)
• En FS2 se
La energía solar se almacena produce la
como gradiente de H+ a través fotólisis del agua,
de la membrana del tilacoide liberando O2 y H+
en el lumen
• La óxido-
reducción de la
plastoquinona
(PQ) también
libera H+ en el
P700
b6f lumen
• Los electrones
Nabors Introducción a la Botánica

P680 provenientes de
agua se usan para
reducir NADP a
NADPH en el PSI
• El gradiente de
H+ generado es
usado por la ATP
sintasa para
producir ATP
48
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
 La ATP sintasa del cloroplasto “convierte” el DpH en
moléculas de ATP
La energía de la luz,
almacenada como DpH
es usada por la ATP sintasa
para generar ATP: Los H+
salen hacia el estroma a
favor del gradiente
generado por la luz, eso
libera energía que la
baja [H+] enzima usa para convertir
pH = 8 ADP+Pi en ATP

DpH generado por la luz

F0

alta [H+] El ATP se sintetiza

pH = 5 en el estroma
49
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
Mecanismo de acción de la ATP sintasa

https://www.youtube.com/watch?v=PjdPTY1wHdQ

50
¿Qué pasaría con la síntesis de ATP si anuláramos el
DpH?
Poniendo un
“desacoplante” que genera
poros en la membrana

P700
b6f ¿Y qué pasa
con el
Nabors Introducción a la Botánica

P680
transporte
de
electrones?

51
Introducción a la Botánica DBBE FCEyN - UBA
El balance global de la fase lumínica de la fotosíntesis
2H2O + 2NADP+ + 3ADP + 3Pi à O2 + 2NADPH + 2H+ + 3ATP

La absorción y transferencia de energía solar lleva a la hidrólisis del

H 2O
àEl O2 se genera como un subproducto
Los electrones del H2O entran en una cadena de transporte
àGeneración de poder reductor (NADPH)

DBBE FCEyN - UBA

àGeneración de un gradiente de protones en el tilacoide
àGeneración de energía química: ATP
luz solar à energía química + poder reductor

Introducción a la Botánica
¿Por qué ocurre en un sistema de membranas y no en la fase
Es un proceso vectorial, la ubicación de los componentes en la
soluble? asegura la direccionalidad del transporte de electrones
membrana
y la generación del gradiente de H+ (DpH) 52
 Transporte cíclico de electrones
• El transporte cíclico de e-
solamente genera ATP, no se
genera poder reductor
• Participa el FS1 y no el FS2 à
no se genera O2
• Ese ATP se suma a lo
Raven Biology of Plants 2013

producido por la cadena

completa de transporte de e-
• La función es aportar energía
adicional al cloroplasto
• Algunas bacterias tienen
solamente un homólogo del
FS1 y hacen este tipo de
transporte de e-

53
 Preguntas de repaso
1. ¿Qué es un fotosistema y por qué está compuesto?
2. ¿Qué tienen en común y en qué difieren las clorofilas y los carotenoides?
3. ¿Cómo se transfiere la energía de un pigmento al otro de la antena de los
fotosistemas?
4. ¿Qué es lo que hace que P700 o P680 puedan diferenciarse funcionalmente de
otras moléculas de clorofila a que tienen exactamente la misma estructura
molecular al estar aisladas?
5. ¿Por qué decimos que el O2 es un subproducto de la fotosíntesis? ¿Cuáles son
los productos de la fase lumínica que serán los sustratos de la fase
bioquímica?
6. ¿Qué evidencias hay de que el FS1 y el FS2 cooperan en la producción de O2?
7. ¿Quiénes son los intermediarios entre los dos tipos de fotosistema?
8. ¿Cómo se almacena en el tilacoide la energía de la luz solar? ¿Por qué se
requiere que la membrana del tilacoide esté intacta para que ocurra la fase
lumínica de la fotosíntesis?
9. ¿Cómo opera la ATP sintasa?
10. ¿Qué es el transporte cíclico de electrones y qué función cumple en el
54
cloroplasto?