INFORME DE BIOQUIMICA PRÁCTICA #3

PROPIEDADES FÍSICOQUIMICAS DE LOS AMINOÁCIDOS.

PRESENTADO POR:

DIEGO MAURICIO TORO VALENCIA

JUAN NICANOR MARMOLEJOS MARTINEZ

PABLO ANDRES SERNA VELASQUEZ

ALDAIR BANGUERA GONZALES

PROFESORA:

XIOMARA MOSQUERA CASTRO

BIOQUIMICA

MICROBIOLOGIA INDUSTRIAL Y AMBIENTAL

UDEA
 MARCO TEÓRICO

Los aminoácidos son un grupo heterogéneo de moléculas que poseen unas características
estructurales y funcionales comunes. Existen veinte aminoácidos diferentes especificados
en el código genético, aunque hay otros aminoácidos menos frecuentes que se forman por
modificaciones enzimáticas posteriores al proceso de traducción. En las células, estos
veinte aminoácidos se unen mediante enlaces covalentes formando largas cadenas de
combinaciones específicas que producen un gran número de proteínas diferentes. El tamaño
puede ser muy variado, desde péptidos formados por un número pequeño de aminoácidos
hasta polímeros con alta masa molecular.

Además de ser las unidades estructurales de las proteínas, existen aminoácidos que son
intermediaros de ciertas rutas metabólicas, como la citrulina y la ornitina en el metabolismo
de la arginina y la prolina (Feduchi & Elena, 2013)

Los aminoácidos están compuestos por un grupo amino que está unido al carbono α, el
carbono contiguo al grupo carboxilo; de aquí proviene el nombre de aminoácido. Al
carbono α de cada aminoácido también están unidos un átomo de hidrógeno y una cadena
lateral (R). Los distintos aminoácidos se diferencian por sus cadenas laterales

Los 20 aminoácidos contienen, en sus 20 cadenas laterales diferentes, una notable colección
de grupos químicos. Es esta diversidad de los monómeros la que permite a las proteínas
exhibir una variedad tan grande de estructuras y propiedades. Existen varias clases
diferentes de cadenas laterales, que se distinguen por sus características químicas
dominantes. Estás características incluyen el carácter hidrófobo o hidrófilo, la naturaleza
polar o no polar, y la presencia o ausencia de grupos ionizables. Se han propuesto muchas
formas de clasificar los aminoácidos, pero ninguna de ellas resulta totalmente satisfactoria.
(Mathews & Christopher K, 2002)

Cada grupo funcional de un aminoácido muestra todas sus reacciones químicas

características. Para grupos de ácido carboxílico, tales reacciones incluyen la formación de
ésteres, amidas y anhídridos ácidos; en el caso de los grupos amino, comprende acilación,
amidación y esterificación; en tanto que para grupos —OH y —SH, conlleva oxidación y
esterificación. La reacción de mayor importancia de los aminoácidos es la formación de un
enlace péptido (Murray & Robert K., 2013)

Se emplean diferentes tipos de reacciones para determinar los aminoácidos en una muestra.

Unas de las más utilizadas son:

- Reacción de Biuret: detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros

compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición
desconocida. El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y
vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta.
Reacción de Ninhidrina: es utilizada con fines cuantitativos para la determinación de
(Mckee & T, 2003)aminoácidos, Reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se
encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso (púrpura de
Ruhemann). La coloración producida por la ninhidrina es independiente de la coloración
original del aminoácido esta prueba es positiva tanto para proteínas como para
aminoácidos.

- Reacción Xantoproteica: en esta reacción se determinan los aminoácidos aromáticos,

estos reaccionan con ácido
nítrico concentrado y forman nitrocompuestos de color amarillo. (ELAZAR &
CARPIO, 2009)
- Reacción de Adamkiewicz: también conocida como reacción de HopkinsCole en la
cual los derivados del indol dan productos de condensación cuando se tratan con
aldehídos aromáticos en presencia de ácido sulfúrico o clorhídrico, esta es una prueba
específica para el triptófano, al ser el único aminoácido con el grupo indol presente, la
reacción con dicho aminoácido presenta un anillo violeta en la interface.
- Reacción de Tiogrupos: depende de las propiedades del grupo R del aminoácido. El
grupo tiol se compone del grupo funcional sulfhidrilo SH, ya que con frecuencia el
azufre tiende a ocupar el lugar del oxígeno en estructuras orgánicas. En esta reacción se
encuentra la Cisteina y proteínas que la contengan en medio fuertemente alcalino el
radical mercapto de la Cisteina se desprenden como ácido sulfhídrico que se pone en
evidencia añadiendo sales de plomo para que se forme de un precipitado negro de
sulfuro de plomo. (Mckee & T, 2003)
 METODOLOGIA

Rotular 5 series de 8 tubos de ensayo y agregar

Tubo A: 1 ml de agua destilada,

Tubo B: 1 ml de solución de ácido glutámico al 0,5%,

Tubo C: 1 ml de solución de alanina al 0,5%

Tubo D: 1 ml de solución de cisteína 0,5%

Tubo E: 1 ml de solución de tirosina al 0,5%

Tubo F: 1 ml de solución de triptófano al 0,5%

Tubo G: 1 ml de solución de albúmina de huevo al 0,5%

Tubo MP: muestra problema

Posteriormente realizar los siguientes procedimientos.

A. Reacción con Ninhidrina

Seleccionar la primera serie de 8 tubos de ensayo y agregar a cada uno 1 ml de la solución

de Ninhidrina al 0,5% y agitar; luego incubar todos los tubos a 90° por 15 min.

B.​Reacción de Biuret

Seleccionar la segunda serie de 8 tubos y agregarle a cada uno 1ml de la solución

dehidróxido de sodio [NaOH] al 40% y 1 ml de solución de sulfato Cúprico [CuSO4] al 1%

C. Reacción de Adamkiewicz

Seleccionar la tercera serie de 8 tubos y agregarle a cada uno 0,5 ml de formaldehído

[HCOH] al 37%(formol), agitando con mucho cuidado. Volver a agregar lentamente 0,5 ml
de Ácido Sulfúrico [H2SO4] por las paredes del tubo y sin agitación.

D. Reacción de Xantoproteica

Seleccionar la cuarta serie de 8 tubos y agregarle a cada uno 1 ml de solución de ácido

Nítrico [HNO3] al 15% (realizar este proceso con mucho cuidado), colocarlos a 90°C por 5
minutos y observar cualquier cambio. Dejar enfriar completamente los tubos a temperatura
ambiente y añadirle a cada uno 2 ml de solución de Hidróxido de sodio [NaOH] al 40%

E. Reacción de Tiogrupos
Seleccionar la quinta serie de 8 tubos y agregarle a cada uno 1 ml de solución de Hidróxido
de sodio [NaOH] al 40%, luego añadir 5 gotas de solución de acetato de plomo
[CH3COOPb] al 10% y llevar a incubar todos los tubos a 90°C por 30 minutos.
 RESULTADOS

A. Reacción con Nihidrina

Las pruebas realizadas resultaron positivas debido a la presencia de aminoácidos libres

generando un color morado, el agua como indicador negativo en la muestra al no poseer
aminoácidos libres. La cisteína y el Triptófano presentaron una coloración marrón siendo
positivas debido a la alta concentración del compuesto, y la albumina presento una
coagulación

Muestra Agua Acido

Alanina Cisteína Tirosina Triptófano Albúmina
Problema Destilada Glutamico

Positiva Negativa Positiva Positiva Positiva Positiva Positiva Positiva

B. Reacción de Biuret

La falta de enlaces peptídicos impide la reacción en la prueba con el reactivo de Biuret por
lo tanto en la albumina es donde se evidencia una presencia de más de 2 enlaces peptídicos,
aclarando que la cisteína posee un cambio de color pero es negativa.

Muestra Agua Acido

Alanina Cisteína Tirosina Triptófano Albúmina
Problema Destilada Glutamico

Negativa Negativa Negativa Negativa Negativa Negativa Negativa Positiva

C. Reacción de Adamkiewics
 Debido a que el reactivo de Adamkiewics usado en esta prueba permite la identificación del
grupo indol evidenciado como prueba positiva en una coloración café, dado esto el
triptófano es el único positivo en esta prueba.

Muestra Agua Acido

Alanina Cisteína Tirosina Triptófano Albúmina
Problema Destilada Glutamico

Negativa Negativa Negativa Negativa Negativa Negativa Positiva Negativa

D. Reacción Xantoproteica.

El reactivo Xantoproteico permite la detección de grupos fenoles, siendo este positivo con
una coloración amarillosa. En las pruebas con alanina, tirosina, triptófano y albumina se
presento dicha coloración, esto indica la presencia de grupos fenoles en las muestras, al no
haber coloración en las demás muestras se toma como negativo.

Adición de Acido Nítrico [HNO3]

Muestra Agua Acido
Alanina Cisteína Tirosina Triptófano Albúmina
Problema Destilada Glutamico

Negativa Negativa Negativa Negativa Negativa Positiva Positiva Positiva

Adición de Hidroxido de Sodio[NaOH]

Muestra Agua Acido
Alanina Cisteína Tirosina Triptófano Albúmina
Problema Destilada Glutamico
Negativa Negativa Negativa Positiva Negativa Positiva Negativa Positiva

E. Reacción de Tiogrupos

Esta reacción permite determinar la presencia de enlaces de azufre en la reacción con una
coloración café, esta fueron positivas para la cisteína y la albumina, mientras que las demás
pruebas al poseer una coloración trasparente se determinan como pruebas negativas, bajo la
ausencia de enlaces de azufre.

Muestra Agua Acido

Alanina Cisteína Tirosina Triptófano Albúmina
Problema Destilada Glutamico

Negativa Negativa Negativa Negativa Positiva Negativa Negativa Positiva

CONCLUSIÓN
 BIBLIOGRAFÍA

Feduchi, B. R., & Elena, I. C. (2013). Bioquimica conceptos esenciales. Madrid: medica
panamericana.

Mathews, v. H., & Christopher K, K. E. (2002). Bioquimica tercera edicion . Madrid:

Addison Wesley.

Murray, B. B., & Robert K., D. A. (2013). Harper bioquimica ilustrada. Mexico:
McGRAW-HILL.

Mckee, T.,& Mckee, J. R. (2003). Bioquímica La Base Molecular de la Vida primera

edición Madrid: McGraw Hill Interamericana de España, S. A. U.

(ELAZAR & CARPIO, 2009)