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Bacterias Microbiologia

9 pag.

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 Introducci—n a la
M I C R O B I O L O G I A

La microbiolog’a es el estudio de organismos microsc—picos (microbios) y como interactuan en el medio mabiente, los
cuales se definen como cualquier organismo vivo que sea una sola cŽlula (unicelular), un grupo celular, o que no tenga
cŽlulas en absoluto (acelular). Esto incluye eucariotas, como hongos y protistas, y procariotas. TambiŽn se estudian virus
y priones, aunque no estrictamente considerados organismos vivos.

Virología En 1667 Antonie Van Leewnhoek

Micología observa microorganismos con una
Bacteriología
MICROBIOLOGIA Ingeniería Genética. lente primitiva.
Parasitología
Inmunología
Biología molecular

Generalidades de la CŽlula Bacteriana

Organismos unicelulares; procariontes porque carecen de nœcleo.

¥ Crecen de org‡nulos intra celulares recubiertos por membrana

como aparato de Golgi, ret’culo endopl‡smico o mitocondrias.
Todas sus actividades metab—licas o bio sintŽticas s se llevan a
cabo en el citoplasma.

Clasificaci—n por tama–o y forma.

La mayor’a de las bacterias miden entre 0.2-2 micras.
a) Cocos b) Bacilos c) Espirilos Estructuras externas en relaci—n con
la pared celular.

¥ Capsula glucocaliz o capa de azœcar.

Secretado por algunas bacterias, es un
pol’mero gelatinoso localizado por fuera
de la pared celular, protege al
microorganismo de la fagocitosis,
promueve la adherencia, impide la
desecaci—n y pude aportar nutrientes.

¥ Flagelos. ApŽndices filamentosos,

relativamente largos, le dan locomoci—n a
la cŽlula. (Taxia) propiedad m—vil de las
bacterias. Puede ser positiva (+) si se
acerca a algo que las atrae o negativa ( - )
si se alejan de algo que las repele.

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 Monotricas y Lofotricas movimiento
lento generalmente en l’nea recta.

Anfitricas y Peritricas Movimiento

r‡pido girando sobre si o saltan de un lugar a otro.

-Las bacterias monotricas tienen un solo flagelo en un polo. -Anfitricas, presenta uno o varios flagelos en cada polo.
-Lofotricas un penacho en un solo polo. -Peritricas, Tienen varios flagelos rodeando la bacteria

¥ Filamentos axiales. Las espiroquetas presentan un endoflagelo (filamento axial o flagelo peripolasmatico).
Los filamentos axiales son similares a lo flagelos, salvo que se enrollan alrededor de la bacteria.

¥ Pili y Fimbrias. Son apŽndices cortos y delgados.

Fimbrias: promueven adherencias a diversas superficies
Pili: unen a las distintas cŽlulas entre si y facilitan la transferencia intercelular de ADN.

¥ Pared celular. Esta rodea a la membrana plasm‡tica y protege a la cŽlula de modificaciones de la presi—n
osm—tica, esta compuesta por peptidoglucano NAG (N-acetil glucosamina) y NAM (acido n Ð acetil muramico) y
cadenas cortas de amino‡cidos.

-PARED CELULAR GRAM (+). Formadas por varias capas de peptidoglucano y ‡cidos teicoicos.

çcidos teicoicos: Est‡n presentes en muchas bacterias Gram-positivas, pero no en todas. Son pol’meros de hasta 30 unidades
de glicerol-fosfato o ribitol-fosfato, unidas entre s’ por enlaces fosfodiŽster, en los que la mayor’a de los grupos -OH est‡n
sustituidos por -H, azœcares, aminoazœcares o D-alanina.

Los ‡cidos teicoicos est‡n unidos covalentemente al peptidoglucano, concretamente al -OH en posici—n 6 del NAM, a travŽs de
una unidad de enlace, variable segœn las especies. (Por ejemplo, en una especie de Micrococcus, el elemento de enlace consiste
en {glicerol-P}3 --NAG-P).

çcidos teicur—nicos: Ciertas bacterias Gram-positivas, cuando se someten a un rŽgimen de limitaci—n de fosfato son incapaces
de sintetizar ‡cidos teicoicos, pero en su lugar producen ‡cidos teicur—nicos. Los teicur—nicos consisten en pol’meros ani—nicos
formados por la alternancia de ‡cidos ur—nicos (que tienen grupos -COOH libres) y aminozœcares como la N-acetil-galactosamina.

çcidos lipoteicoicos: Est‡n presentes en todas las bacterias Gram-positivas, aun en condiciones de carencia de fosfato. Se trata
simplemente de ‡cidos glicerol-teicoicos que se encuentran unidos a la membrana citopl‡smica, concretamente se unen por
enlace fosfodiŽster con glucol’pidos de membrana, mientras que el otro extremo de la cadena queda expuesto al exterior.

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-PARED CELULAR GRAM (-). Formada por una membrana externa de lipopolisacaridos, lipoprote’nas y fosfol’pidos que
rodean una capa muy delgada de peptidoglicano, exclusiva de las bacterias Gram-negativas. Consta de una doble capa
de l’pidos, junto con prote’nas de matriz (estas œltimas atravesando total o parcialmente la bicapa). Los grupos polares
quedan hacia afuera, mientras que los hidr—fobos tienden al interior.

La bicapa es altamente asimŽtrica

-Capa externa: existe un 60% de prote’nas y un 40% de una macromolŽcula exclusiva de esta membrana externa:
el lipopolisac‡rido (LPS)
-Capa interna: no hay LPS, existiendo fosfol’pidos (FL), lipoprote’nas (LPP) y otras prote’nas.

El conjunto es un mosaico fluido que permite el desplazamiento lateral de los fosfol’pidos, del LPS, y de las prote’nas, pero no de
las lipoprote’nas unidas covalentemente al peptidoglucano. Esta fluidez es menor que la de la membrana citopl‡smica.

El enlace entre cadenas polisacar’dicas se realiza normalmente mediante uni—n pept’dica directa entre el grupo carboxilo de la D-
ala terminal y el grupo e-amino del meso-DAP. Ahora bien, en este enlace participan solamente el 50% de los tetrapŽptidos. Los
dem‡s pŽptidos no participan en enlaces, y entre estos œltimos se encuentran incluso dipŽptidos y tripŽptidos. El resultado es
una capa simple de PG (de 1 nm de espesor), con grandes poros (los ÒhuecosÓ dejados por las zonas donde no hay enlace
pept’dicos).

Explica el comportamiento de las bacterias Gram-negativas en la tinci—n de Gram: al a–adir el alcohol, se produce una
deshidrataci—n que tiende a contraer la estructura del PG, pero los poros son grandes y por ellos sale el primer colorante (el violeta
de genciana). El ulterior tratamiento de la preparaci—n con el colorante de contraste (fuchsina o safranina) ti–e a estas bacterias de
rojo.

GRAM POSITIVAS (+) GRAM NEGATIVAS (-)

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 ¥ Pared celular y la tinci—n de GRAM.
La tinci—n de Gram o coloraci—n de Gram es un tipo de tinci—n diferencial empleado en bacteriolog’a para la visualizaci—n
de bacterias, sobre todo en muestras cl’nicas. Debe su nombre al bacteri—logo danŽs Christian Gram, que desarroll— la
tŽcnica en 1884.
-Lo que sucede, es que el complejo violeta de ganancia-yodo se mezcla con el peptidoglucano; el decolorante elimina la
membrana externa lip’dica de las bacterias Gram ( - ) y lava el violeta de ganancia.

¥ Pared celular At’pica. Los miembros del genero Mycoplasma carecen naturalmente de pared celular.
-La pared acido alcohol resistente posee una capa de acido micolico por fuera de la capa delgada de peptidoglicano.

El gŽnero Mycobacterium
Determinadas gram positivas. Se han descrito m‡s de 100 especies, 25 de las
cuales han sido identificadas como agentes infecciosos frecuentes para el hombre y
animales. Las otras especies del genero son saprofitas que actœan como pat—genos
oportunistas, causando enfermedades pulmonares o infecciones en otras
localizaciones.

¥ Las micobacterias son bacilos largos o curvos de

-3 a 5 µm de longitud
-en forma de maza
-inm—viles, no esporulados
-con abundantes gr‡nulos citoplasm‡ticos, que poseen una resistencia mayor a la tinci—n por los colorantes comunes, pero una
vez te–idos son resistentes a la decoloraci—n con una mezcla de alcohol ‡cido.

Clasificaci—n por tama–o y forma

Mycobacterium Tuberculosis: Abarca otros pat—genos estrictos (Enfermedades en animales y personas)

Genero
Mycobacterium Mycobacterias no tuberculosas (MNT): Especies de vida saprofita (Existen algunos pat—genos estrictos)

Mycobacterium Lepra: Causante de la lepra.

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COMPOSICION DE LA PARED CELULAR
¥ Un peptidoglucano especial (la diferencia m‡s importante es que en vez de N-acetil mur‡mico existe N-glucolil-
mur‡mico)
¥ Un arabinogalactano de gran peso molecular
¥ Ambos pol’meros se encuentran enlazados a travŽs de fosfodiŽster entre una unidad de mur‡mico y una de las arabinosas.
Pero a su vez, este esqueleto se une covalentemente a los ‡cidos mic—licos

El esqueleto de la pared celular de estas bacterias consiste en: Peptidoglucano > Arabinogalactano > Acidos Micolicos

Pero aparte de este esqueleto complejo, la P.C. de las bacterias ‡cido-alcohol resistentes exhibe una variedad de l’pidos:

¥ Glucol’pidos:

a. Micolatos de trehalosa: Dos unidades de trehalosa unidas entre s’ por enlace a (1ˆ1«), y en donde los grupos 6 y 6«
est‡n unidos con ‡cidos mic—licos. Constituyen el factor de crecimiento en cuerdas, son responsables de la agregaci—n de
los individuos bacterianos en forma de ÒcuerdasÓ.

b. Sulfol’pidos de trehalosa: Est‡n localizados en la periferia de la P.C. factores de virulencia. En Mycobacterium

tuberculosis (el bacilo) estos sulfol’pidos de trehalosa funcionan como evasinas (facilitan el que la bacteria escape a la
acci—n de los macr—fagos inhibiendo la fusi—n del fagosoma con el lisosoma).

c. Mic—sidos: Localizados en la periferia, consisten en la uni—n por enlace Žster entre ‡cidos mic—licos y azœcares
(incluyendo ‡cidos ur—nicos, desoxiosas, aminozœcares, etc.).

¥ C e r a s: Uni—n de ‡cidos mic—licos con ftioceroles (alcoholes ramificados de alto peso molecular: C30 - C34).

aspecto y consistencia cŽrea de sus colonias crecen formando grumos en medios l’quidos
gran resistencia a la desecaci—n resistencia a sustancias antibacterianas (detergentes, oxidantes, ‡cidos, bases

Estas bacterias no se tiñen con los colorantes normales, una

vez que se han teñido con fucsina (forzando mediante
calentamiento de la preparación), tienen resistencia a
decolorarse por una mezcla de ‡cido clorh’drico al 3% en etanol de 96o.

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Estructuras internas en relaci—n con la pared celular.

¥ Membrana plasm‡tica. Rodea a la cŽlula y es una capa bi-lip’dica con prote’nas perifŽricas e integrales
(modelo de mosaico fluido). Posee permeabilidad selectiva y contiene las enzimas necesarias para las reacciones
metab—licas.
¥ Citoplasma. Es el componente liquido de la cŽlula, por dentro de la membrana plasm‡tica, compuesto por
agua, contiene molŽculas org‡nicas e inorg‡nicas , ADN, ribosomas e inclusiones.
¥ Procarion. Contiene el ADN del cromosoma bacteriano. TambiŽn puede contener pl‡smidos que consisten en
molŽculas circulantes de ADN extra cromos—mico.
¥ Ribosomas. Presentan el sitio de s’ntesis de prote’nas.
¥ Endospora. Es una forma de resistencia que toman algunas bacterias para protegerse de condiciones extremas.

Crecimiento bacteriano.

¥ Multiplicaci—n bacteriana. Las bacterias se multiplican por fisi—n binaria (Proceso asexual) dando lugar a dos
cŽlulas idŽnticas, de este modo se divide de manera logar’tmica.
CURVA DE DESARROLLO BACTERIANO NORMAL.
1. Fase de retraso. Las bacterias son transferidas a un medio de crecimiento, se ajustan a las nuevas condiciones.
2. Fase logar’tmica (exponencial). Cuando inicia la multiplicaci—n.
3. Fase estacionaria. Cuando se agotan los nutrientes del cultivo.
4. Fase de muerte. Falta de nutrientes o acumulaci—n de sustancias toxicas en el medio.

Requerimientos para el crecimiento bacteriano.

¥ Oxigeno. Aerobias, anaerobias y microaerofilicas.

-Aerobias: Requieren y proliferan en presencia de oxigeno.

-Anaerobias obligadas (estrictas): crecen solo en ausencia de ox’geno. No proliferan en presencia de oxigeno
-Anaerobias facultativas: crecen en presencia o ausencia de ox’geno. (Aerobios facultativos)
-Microaer—filas: crecen mejor en concentraciones bajas de ox’geno, demasiado oxigeno las mata.

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 ¥ Temperatura.
-Si la temperatura optima de crecimiento es menor a 20
grados C. : Psicrofila (Amante del frio).

-Casi todas las bacterias de importancia medica son

mesofilas, crecen entre 20-45 grados C, siendo optimo 37 C.

-Termofilas: Cunado su temperatura optima son 45-60

grados C.

¥ PH (Clasificacion bacteriana de acuerdo a su requerimiento de pH.)

Acidofilas Neutrofilas Basofilas o Alcalofilas

-Crecen mejor en medios con ph -Proliferan mejor en un pH de 6 - Se desarrollan mejor en

menor de 5, (Optimo 3) a 8. ambientes con pH arriba de 9
(optimo 10.5)
-Mantienen un pH interno de casi -Mantienen un pH interno - Mantienen un pH interno de
6.5 cercano a 7.5 casi 9.5

METABOLISMO BACTERIANO

conjunto de reacciones qu’micas que tienen lugar dentro de estos organismos unicelulares
Hay tres procesos fundamentales para la producci—n de energ’a bacteriana: Respiraci—n aerobia, anaerobia y fermentaci—n.

¥ Respiracion anearobica celular. En la respiraci—n celular anaer—bica, la gluc—lisis se produce normalmente.

A continuaci—n, las molŽculas de piruvato producidas por la gluc—lisis pueden someterse a fermentaci—n.
La fermentaci—n del ‡cido l‡ctico es una v’a que utiliza el NADH para reducir el piruvato a ‡cido l‡ctico y NAD+.

-Microorganismos anaerobios en diferentes rangos de pH

pH Tipo de microorganismos Microorganismos encontrados

1.1-5.5 Acidofilos Lacrobacillus spp
Bifodobacterium bifidum
5.5-8.0 Neutrofilos Clostridium perfringes
8.5-11.5 Alcalonofilos Micrococcus spp

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 ¥ Respiracion aerobica celular. descomposici—n de la glucosa para producir energia en presencia de oxigeno.

La respiración celular aeróbica en procariotas puede

dividirse en cuatro fases:

1. Gluc—lisis.
2. Oxidaci—n del piruvato.
3. Ciclo del ‡cido c’trico (ciclo de Krebs).
4. Cadena de transporte de electrones y
quimiosmosis (ocurre en la membrana plasm‡tica).

Clasificación de los microorganismos en

función de las fuentes de:

Ø ENERGIA
-Fot—trofos: emplean la luz como fuente de energ’a (fotos’ntesis). -Quimiolitotrofos: utilizan la oxidaci—n de compuestos inorg‡nicos.
-Quimiotrofos: utilizan la oxidaci—n de compuestos qu’micos. -Quimioorganitrofos: utilizan la oxidaci—n de compuestos
org‡nicos.
Ø ATP
¥ Si los microorganismos realizan fotos’ntesis lo obtienen por fotofosforilaci—n.
¥ Los quimioheter—trofos realizan respiraci—n y lo obtienen por fosforilaci—n oxidativa
¥ Los que realizan fermentaci—n, por fosforilaci—n a nivel de sustrato
¥ Los quimiolit—trofos realizan respiraci—n, as’ que lo obtienen por fosforilaci—n oxidativa.

Ø CARBONO Y PODER REDUCTOR

¥ Fot—trofos: obtienen el poder reductor de compuestos org‡nicos; este proceso se llama fototrof’a.
o Fotoaut—trofos: fuente de C= CO₂. Lo son las plantas, las algas, las cianobacterias, y las bacterias rojas y verde de
azufre (S)
o Fotoheter—trofos: fuente de C= compuestos org‡nicos. Bacterias rojas
y verdes no del azufre y heliobacterias.
¥ Quimi—trofos
o Quimiolit—trofos: obtienen el poder reductor de compuestos
inorg‡nicos; este proceso se llama quimiolitotrof’a.
§ Quimiolitoaut—trofos: fuente de C = CO₂. Bacterias del hidr—geno
(H2), bacterias oxidantes del S, bacterias nitrificantes, bacterias del hierro
(Fe), carboxidobacterias y algunas arqueas.
§ Mix—trofos (Quimiolitoheter—trofos): fuente de C = compustos
org‡nicos. Ciertas bacterias.
o Quimiorgan—trofos (Quimioheter—trofos): obtienen el poder reductor
de compuestos org‡nicos. Animales, protozoos, hongos, bacterias no
fotosintŽticas y algunas arqueas.

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Metabolismo del nitr—geno

Algunas bacterias son capaces de fijar el nitr—geno.

Estas bacterias fijadoras de nitr—geno son vitales para
el ciclo del nitr—geno porque se encargan de convertir
el nitr—geno atmosfŽrico (N2) en amon’aco (NH3).

Ejemplos de bacterias fijadoras (pseudomonas,

nocardia, Clostridium
pasteurianum y Methanobacterium. )

NUTRICION

Las bacterias necesitan diferentes nutrientes para cumplir sus funciones b‡sicas de crecimiento, desarrollo y reproducci—n.

¥ Los macronutrientes: son necesarios en grandes cantidades y est‡n construidos a partir de elementos qu’micos. Entre
los m‡s importantes para las bacterias tenemos: azufre (S), carbono (C), f—sforo (P), hidr—geno (H), nitr—geno (N) y ox’geno
(O). Estos son esenciales para las reacciones bioqu’micas, las actividad enzim‡tica y la s’ntesis de biomolŽculas como
los ‡cidos nucleicos.

¥ Los micronutrientes: son necesarios en peque–as cantidades. Incluyen principalmente minerales esenciales
y vitaminas. Algunos los m‡s importantes para las bacterias son: Cobalto (Co), Cobre (Cu), Molibdeno (Mo), Zinc (Zn), la
biotina, la tiamina, la niacina, la riboflavina y la vitamina B12, as’ como los ‡cidos nucleicos, los amoni+acidos y diversos
oligoelementos.

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