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Universidad politécnica de Tlaxcala

Ingeniería de Biotecnología

Practica 3

“Extracción de ADN y ARN”

Integrantes:

• Ximena Cerón Tapia


• Monica Sugey Romano Acoltzi
• Naomi Ximena Hernández Mendoza
• Esmeralda Hernández Hernández
• Ian Osmar Sandre Teyssier

Docente: Oscar Acatitla Pluma

Cuatrimestre: Enero-Abril 2024

2° A
Objetivo:

Aprender la extracción de ADN y ARN de una forma sencilla y relacionando las sustancias
utilizadas para la ingeniería genética.

Introducción

El ADN, ARN y las proteínas son los tres componentes principales que juegan un papel
importante para organismos vivos.

El concepto de ADN es ampliamente conocido y como casi todo el mundo sabe, tiene que
ver con el almacenamiento de datos genéticos que pueden ser determinantes en el
comportamiento y los rasgos que destacan en los seres humanos y demás organismos. Sin
embargo, el ADN no trabaja solo, ya que el ARN y las proteínas también desempeñan su
papel al momento de determinar el trabajo de las células.

El ARN y el ADN tienen algunas similitudes, pero también sus diferencias, A continuación
veremos cuales entre ADN y ARN

Estructura del ADN:

• Desoxirribosa
• Grupo fostato
• Base nitrogenada

Estructura del ARN:

• Ribosa
• Grupo fosfato
• Base nitrogenada

Metodología

Se le llama extracción al método por el cual se obtiene el ADN a partir de material biológico
(ej.: cepillado bucal, saliva, sangre o cualquier tejido) utilizando técnicas físicas y químicas.
La extracción consiste en la separación y purificación del ADN con el fin de poder estudiarlo,
analizarlo o manipularlo.

Estas características no vienen directamente del propio ADN, sino de una molécula llamada
ARN, formada a partir del ADN, y codifica una proteína.

Marco Teórico

¿Qué es el ADN y ARN?

El ácido desoxirribonucleico (abreviado ADN) es la molécula que transporta nuestra


información genética para el desarrollo y funcionamiento de un organismo. Es responsable
de la transmisión y regulación de la información genética y la síntesis de proteínas.

Uno de los dos tipos de ácido nucleico que elaboran las células. El ARN contiene
información copiada del ADN (el otro tipo de ácido nucleico). Las células elaboran varias
formas diferentes de ARN y cada forma cumple una función específica en la célula. Muchas
formas de ARN cumplen funciones relacionadas con las proteínas. El ARN también es el
material genético de algunos virus en lugar del ADN. El ARN se puede producir en el
laboratorio y se usa en estudios de investigación. También se llama ácido ribonucleico y
RNA.

La estructura del ADN es una pareja de largas cadenas de nucleótidos. La estructura de


doble hélice del ADN fue descubierta en 1953 por James Watson y Francis Crick. Una larga
hebra de ácido nucleico está enrollada alrededor de otra hebra formando un par
entrelazado.

Sólo tenemos un 30% más de genes que un diminuto gusano, el cual tiene solo un milímetro
de longitud y posee 959 células, en tanto que nosotros alrededor de 100 billones. Y mientras
que los seres humanos poseemos aproximadamente 100.000 millones de neuronas, el
diminuto gusano cuenta únicamente con 302. En comparación con el arroz nos va aún peor,
puesto que un grano de arroz tiene muchos más genes que una persona, y todavía no se
le ha ocurrido ni la más tonta de las ideas.

¿Qué es una enzima?

Las enzimas son proteínas que ayudan a que las reacciones químicas ocurran con mayor
rapidez. Sin enzimas nuestros cuerpos se detendrían en seco. Las membranas celular y
nuclear han sido rotas, al igual que todas las membranas de los organelos, como las que
rodean a las mitocondrias y cloroplastos. Lo único que queda serán, proteínas,
carbohidratos (azúcares) − ADN El ADN en el núcleo de la célula está moldeado, doblado
y protegido por proteínas. El ablandador de carne corta las proteínas separándolas del
ADN.

El ADN es una molécula formada por dos cadenas de nucleótidos. Cada nucleótido está
compuesto por una base nitrogenada, una desoxirribosa (un azúcar) y un grupo fosfato. Las
bases nitrogenadas son adenina (A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). La secuencia de
bases nitrogenadas a lo largo de la cadena de ADN es la que determina la información
genética.
Existen diferentes métodos de extracción, se puede contar con tres métodos más
habituales:

• Precipitación con alcohol: Este método es sencillo y económico, pero no es muy


eficiente para obtener ADN de alta calidad.
• Extracción con fenol-cloroformo: Este método es más eficiente que la precipitación
con alcohol, pero es más complejo y requiere el uso de sustancias químicas
peligrosas.
• Kits comerciales: Existen kits comerciales que contienen todos los reactivos y
materiales necesarios para la extracción de ADN.

La extracción de ADN se basa en la ruptura de la membrana celular y la posterior


separación del ADN de otras moléculas presentes en la célula. Los principales pasos en la
extracción de ADN son:

• Lisis celular: La lisis celular es la ruptura de la membrana celular. Se puede realizar


mediante métodos mecánicos (como la sonicación o la homogeneización) o
mediante métodos químicos (como el uso de detergentes o soluciones salinas).
• Separación del ADN: Una vez que la membrana celular se ha roto, el ADN debe
separarse de otras moléculas presentes en la célula. Esto se puede realizar
mediante diferentes métodos, como la centrifugación, la filtración o la precipitación.
• Purificación del ADN: El ADN purificado se puede utilizar en una variedad de
aplicaciones, como la amplificación por PCR, la secuenciación o el análisis de
restricción.

Procedimiento:

1. Licuar 50gr del tejido animal o vegetal.

2. Agregar 0.25g de cloruro de sodio al licuado.


3. Agregar el doble del volumen de agua a la fuente de ADN.

4. Filtrar con gasa y añadir la sexta parte del volumen al licuado detergente para lavar
trastes y dejar reposar por 10min

5. Trasvasar la mezcla a tubos de ensayo de 13x100mm, solo una sexta parte de la


capacidad del tuvo.

6. Añadir a cada tuvo de ensayo 0.05g de enzima (ablandador de carne, 3 gotas de


jugo de piña o 1 gota de solucion limpiadora de lentes de contacto).
7. Ladear al tubo de ensayo y lentamente vierta el alcohol sobre la pared del tubo de
manera que forme una capa sobre la mezcla del filtrado.

8. El ADN se elevará desde la mezcla hasta la capa de alcohol.

Resultados:
Agregar sal al método de extracción de ADN con detergente y alcohol puede ayudar a
mejorar la eficiencia de precipitación del ADN. La sal, aumenta la viscosidad de la solución
y favorece la coagulación del ADN, facilitando su precipitación con alcohol.

Cuando se agrega alcohol a la solución que contiene el ADN liberado, provoca la


precipitación del ADN. Esto sucede porque el alcohol desestabiliza las interacciones entre
el ADN y el agua, lo que hace que el ADN se vuelva insoluble y forme una masa visible o
precipitado.

El detergente juega un papel crucial en el proceso de extracción de ADN al romper las


membranas celulares y las proteínas que rodean al ADN. Esto libera el ADN contenido
dentro de las células, permitiendo su posterior extracción.

Conclusión:

Las sustancias empleadas en la extracción del ADN cada una de ellas juega un papel
indispensable para la correcta realización de la práctica como lo es el detergente que
descompone los lípidos para romper la membrana celular, la enzima que se encarga de
romper las proteínas y el etanol como agente precipitante. Es muy importante el cuidado al
realizar la práctica ya que se podría romper la molécula y no conseguir una extracción
completa. En general, la extracción de ADN sigue un procedimiento estándar que implica
romper las células para liberar el ADN, eliminar las proteínas y otros contaminantes, y
finalmente precipitar y recoger el ADN.
Bibliografías:

¿Qué es el ADN? (s/f). Medlineplus.gov. Recuperado el 20 de marzo de 2024, de


https://medlineplus.gov/spanish/genetica/entender/basica/adn/
Ácido desoxirribonucleico (ADN). (2019, marzo 9). Genome.gov; NHGRI.
https://www.genome.gov/es/about-genomics/fact-sheets/acido-desoxirribonucleico
Maria Moreno-Medical Science Liaison Manager. (2019, mayo 21). ¿Qué es el ADN?
Veritas Intercontinental. https://www.veritasint.com/blog/es/que-es-el-adn/
ADN (ácido desoxirribonucleico). (s/f). Cigna.com. Recuperado el 20 de marzo de 2024, de
https://www.cigna.com/es-us/knowledge-center/hw/adn-std120898

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