Código genético

y síntesis d e proteínas

5.1. Suponga que en otro planeta de nuestra galaxia se han encontrado proteínas que
contienen 216 aminoácidos diferentes; ácidos nucleicos con seis bases Jiitrogena-
das distintas, un código genético que al igual que el nuestro está organizado en
tripletes:
a) ¿Son suficientes 6 bases nitrogenadas distintas para codificar 216 aminoácidos
diferentes?
b) ¿Podría existir un mecanismo de traducción semejante al de nuestro planeta?
c) ¿Cree usted que la iniciación y la finalización de la traducción podrían ser se-
mejantes?

Solución

a) S\a base nitrogenada llevara información para u n aminoácido, c o n 6 bases nitrogena-

das distintas solamente podríamos codificar 6 aminoácidos diferentes. Si cada dos bases
nitrogenadas codifican para u n aminoácido, teniendo e n cuenta que existen 6 bases dife-
rentes, tendríamos que calcular las variaciones c o n repetición de 6 elementos tomados de
dos en dos (VR,,, = 6- = 36). Se trata de variaciones, ya que el o r d e n tiene importancia, el
dinucleótido A B codifica para u n aminoácido diferente al BA, y son c o n repetición por-
que puede estar dos veces la misma base. Por tanto, las variaciones c o n repetición de 6
elementos (bases nitrogenadas) tomadas de dos e n dos son 6- = 36, es decir, si cada dos
bases llevan información para u n aminoácido solamente podríamos codificar 36 a m i -
noácidos diferentes. E n el caso de que cada tres bases nitrogenadas c o d i f i q u e n para u n
aminoácido, tendríamos que calcular las variaciones c o n repetición de 6 elementos t o -
mados de tres en tres.VR^, = (y> = 2l6. Por tanto, e n este caso podríamos c o d i f i c a r 2 l 6
aminoácidos diferentes. Por consiguiente, si el c ó d i g o de este planeta está o r g a n i z a d o
e n tripletes o codones, y tres bases c o d i f i c a n para u n aminoácido, c o m o e n nuestro p l a -
neta, 6 bases nitrogenadas serían suficientes para codificar los 216 aminoácidos
distintos de este planeta.
94 360 Problemas de Genética

h) El mecanismo de traducción sería esencialmente semejante a la de nuestro planeta, podría

realizarse e n los ribosomas y los ARN-t (transferentes) transportarían los aminoácidos has-
ta el mensajero. Sin embargo, existiría una diferencia fundamental, el código genético de
este planeta n o sería degenerado, de manera que u n aminoácido vendría d e t e r m i n a d o p o r
u n solo triplete. Por tanto, cualquier cambio e n la secuencia de bases del A D N se traduci-
ría en u n c a m b i o en la secuencia de aminoácidos de las proteínas. Este código genético
carecería de u n sistema "tampón" del efecto de las mutaciones.
c) La iniciación sería semejante, ya que las proteínas podrían comenzar siempre p o r el
m i s m o a m i n o á c i d o y la traducción empezar siempre p o r el m i s m o triplete, tal y c o m o
sucede e n el c ó d i g o de la Tierra. Sin embargo, el sistema de terminación de la traduc-
c i ó n sería diferente, ya que e n la Tierra existen codones sin sentido q u e no l l e v a n
información para ningún aminoácido; estos codones sin sentido son las señales q u e se
e m p l e a n para t e r m i n a r la traducción. En este planeta, n o existen codones de este t i p o ,
ya que hay 2 l 6 tripletes diferentes y 2 l 6 a m i n o á c i d o s distintos, todos los tripletes lle-
v a n información para u n aminoácido. Por tanto, la terminación de la traducción d e b e r í a
realizarse de f o r m a distinta a la Tierra; p o r e j e m p l o , las proteínas terminarían s i e m p r e
p o r el m i s m o aminoácido.

5.2. Si el ADN solamente tuviera dos bases nitrogenadas distintas, ¿cuántos nucleótidos
serían necesarios para determinar cada uno de los 20 aminoácidos diferentes que
forman parte de las proteínas?

Solución

Si exi.stieran solamente dos bases nitrogenadas diferentes y cada dos bases nitrogenadas
codificaran para u n aminoácido distinto, las variaciones con repetición de dos elementos to-
mados de dos en dos VR,, = 2- =4 nos i n d i c a n que solamente se codificarían 4 aminoácidos
distintos. Si cada tres bases llevan información para u n aminoácido, las VRi.3 = 2-' = 8 nos i n -
dican que se podrían codificar 8 aminoácidos diferentes. Si son 4 las bases necesarias para
u n aminoácido, el número de aminoácidos que podríamos codificar sería l 6 (VR2., = 2' = I 6 ) .
Por tanto, aún n o tenemos capacidad para los 20 aminoácidos diferentes. Para ello, es nece-
sario que cada aminoácido venga d e t e r m i n a d o p o r 5 bases nitrogenadas; de esta manera, se
codificarían 32 aminoácidos diferentes (VR,^ = 2"" = 32). El código genético q u e tendríamos
e n este caso sería degenerado, ya que el número de conjuntos de 5 bases diferentes (32) se-
ría m a y o r q u e el de aminoácidos (20).

5.3. Una de las técnicas utilizadas para realizar estudios de variabilidad a nivel del
ADN, es una variante de la reacción en cadena de la polimeasa (PCR) que emplea
oligonucleótidos de 10 bases de longitud como cebadores para amplificar secuen-
cias de ADNgenómico.
 Código genético y síntesis de proteínas 95

¿Cuántos oligonucleótidos diferentes de 10 bases de longitud pueden sintetizarse

con 4 bases nitrogejiadas distintas?

Solución

Tendríamos q u e calcular las variaciones c o n repetición de 4 elementos (bases nitroge-

nadas distintas) t o m a d o s de 10 e n 10, VR,,» = 4"' = 1.048.576.

5.4. Al analizar la secuencia de ami7ioácidos de muchas proteínas distintas en dife-

rentes organismos, se llega a la conclusiófi de que 7io existe ninguna restricción en
la secuencia de aminoácidos de las proteínas, observándose que junto a un ami-
noácido concreto puede encontrarse cualquiera de los otros 19 aminoácidos.
¿Qué consecuencias relativas al código genético pueden extraerse de estos experi-
mentos de secuejiciación de proteínas?

Solución

Este resultado indica que el código genético n o está solapado, de manera que los triple-
tes de dos aminoácidos sucesivos de una proteína n o c o m p a r t e n n i n g u n a base nitrogenada.
I m a g i n e m o s l o que sucedería en u n c ó d i g o genético en el que cada a m i n o á c i d o está
d e t e r m i n a d o p o r u n triplete o c o d ó n , e n el que existen 4 bases nitrogenadas diferentes y
e n el q u e hay solapamiento:

a) Podemos s u p o n e r que los tripletes de dos aminoácidos sucesivos c o m p a r t e n dos bases

nitrogenadas. Por tanto, j u n t o a u n aminoácido concreto, sólo podrían encontrarse co-
m o m á x i m o otros 4 aminoácidos, ya que las dos primeras bases estarían fijadas
(anterior a m i n o á c i d o ) y sólo podría variar la tercera. Si existen 4 bases nitrogenadas
distintas, la de la tercera posición p u e d e ser cualquiera de las cuatro.

Primer aminoácido aa, = A A G

aa, Segundo aminoácido aa2 = AGX

5' —— A A G ^ — 2 Las dos primeras bases del
G son las dos últimas del aa,
C 4 posibilidades para el aa2

b) Los tripletes de dos aminoácidos sucesivos podrían c o m p a r t i r u n solo nucleótido; e n

este caso, la primera base de cualquier aminoácido estaría fijada (correspondería a la
última base d e l aminoácido anterior, y las otras dos bases nitrogenadas podrían ser cua-
lesquiera; p o r tanto, existirían l 6 posibles dinucleótidos (VR^, = 4- = l 6 ) , y c o m o
consecuencia, j u n t o a u n aminoácido sólo encontraríamos otros l 6 , p e r o n o u n o c u a l -
quiera de los otros 19.
96 360 Problemas de Genética

Primer aminoácido aa, = A A G

aa, Segundo aminoácido aa, = GXX

M •
5' 3 La primera base del aa2
GX es la última del aa,
ex 16 posibilidades para el aa.

5.5. Eti un sistema acelular de traducción "in vitro" obtenido a partir de E. coli se aña-
de el ARN-m de la fi-globina humana. El polipéptido sintetizado "in vitro" presenta
la misma secuencia de amiizoácidos que la ¡i-globina humana.
En un sistema acelular de traducción "in vitro" obtenido a partir de reticulocitos
de conejo, en el que los ribosomas proceden del conejo y los ARN-t proceden de E.
coli se añade el ARN-m de la ¡i-globina humana, obteniéndose uti polipéptido que
tiene la misma secuencia de aminoácidos que la fi-globina humaría.
¿Qué nos indican estos resultados?

Solución

Los resultados obtenidos e n el p r i m e r e x p e r i m e n t o i n d i c a n q u e el c ó d i g o g e n é t k o h u -

rnano y el de la bacteria E. coli sori igu_ales, ya q u e u n mensajero h u m a n o e n u n sistema
acelular c o n ribosomas y ARN-t de E. coli p r o d u c e u n polipéptido de igual secuencia al
h u m a n o . Por tanto, los tripletes d e l mensajero h u m a n o tienen el m i s m o significado e n las
células humanas y e n la bacteria E. coli.
En e l segundo e x p e r i m e n t o , los ribosomas p r o c e d e n de conejo, los ARN-t s o n de E. co-
li y el A R N - m es h u m a n o y el resultado sigue siendo q u e se sintetiza u n polipéptido de
igual secuencia al p r o d u c i d o e n células humanas. Por tanto, este dato nos sugiere q u e el
sistema de traducción e n el conejo, e n E. coli y e n h u m a n o s d e b e ser igual, t e n i e n d o t o -
dos ellos u n c ó d i g o idéntico. C o m o conclusión, estos resultados parecen a p u n t a r q u e el
c ó d i g o genético es universal, igual e n todos los organismos.

5.6. Dada la siguiente secuencia de nucleótidos de mi segmento de ADN que se tradu-

ce a un polipéptido de cinco aminoácidos, y empleando el código genético:

3'TACAATGGCCCTTTTATC5'
5'ATGTTACCGGGAAAATAG3'

a) Deduzca la secueneia de ribonucleótidos en el ARN mensajero.

b) Escriba la secuencia de amittoácidos del polipéptido producido.
c) Indique la hélice codificadora y la estabilizadora en el ADN.
d) Diga los anticodones de los ARN transfere^ites (ARN-t) implicados en la síntesis
de este polipéptido, teniendo en cuenta la hipótesis de la "flexibilidad de la ter-
cera base del anticodón".
 Código genético y síntesis de proteínas 97

Solución

a) Si o b t e n e m o s los mensajeros correspondientes a ambas hélices, t e n i e n d o e n cuenta

q u e el A R N - m se sintetiza e n la dirección 5' 3' y q u e la A d e l A D N aparea c o n el U
d e l A R N , o b t e n e m o s las siguientes secuencias:

ARN 5 ' A U G U U A C C G G G A A A A U A G 3 '

t
ADN 3 ' T A C A A T G G C C C T T T T A T C 5 '
ADN 5 ' A T G T T A C C G G G A A A A T A G 3 '

i
i
ARN 3 ' U A C A A U G G C C C U U U U A U C 5 '
hj Para escribir la secuencia de aminoácidos d e l polipéptido p r o d u c i d o es necesario re-
cordar que el A R N - m se traduce c o m e n z a n d o p o r el e x t r e m o 5' y t e r m i n a n d o p o r el
e x t r e m o 3', dirección 5' ^ 3'. A l e x t r e m o 5' le corresponde el e x t r e m o a m i n o t e r m i n a l
d e l polipéptido ( N H , ) y al e x t r e m o 3' le corresponde el e x t r e m o c a r b o x i l o t e r m i n a l d e l
polipéptido ( C O O H ) . Si o b t e n e m o s la secuencia de aminoácidos c o r r e s p o n d i e n t e a ca-
da u n o de los dos posibles A R N - m e m p l e a n d o el c ó d i g o genético, los resultados s o n
los siguientes:

ARN-m 5' AUG UUA CCG GGAAA AUAG 3'

Polipéptido NH, - met - leu - pro- gly - lys - COOH

ARN-m 3 • U A C.A A U.G G_C C^Ü,U_U U A,.y C 5'

Polipéptido COOH - arg - ser - phe - leu - NH,

D e los dos posibles polipéptidos, u n o de ellos tiene cinco aminoácidos y c o m i e n z a p o r

m e t i o n i n a ( m e t ) , correspondiéndole a este a m i n o á c i d o e! triplete A U G , triplete de i n i -
ciación de la traducción. Sin embargo, el poliéptido o b t e n i d o a partir d e l o t r o
mensajero es más corto, tiene cuatro aminoácidos, y n o comienza p o r m e t i o n i n a sino
p o r leucina ( l e u ) correspondiéndole u n triplete ( C U A ) q u e n o es de iniciación. Por c o n -
siguiente el mensajero correcto es el p r i m e r o ;

ARN-m 5 ' A U G U U A C C G G G A A A A U A G 3 '

Polipéptido NH, - met - leu - pro - gly - lys - COOH

Según este resultado la hélice codificadora sería la que se t o m a c o m o m o l d e ara sinte-

tizar el A R N - m , es decir, la hélice que se transcribe y la hélice estabilizadora sería la
c o m p l e m e n t a r i a , la que n o se transcribe:

ADN 3' T A C A A T G G C C C T T T T A T C 5' Hélice codificadora

ADN 5' A T G T T A C C G G G A A A A T A G 3 ' Hélice estabilizadora
98 360 Problemas de Genética

d) La hipótesis de la " f l e x i b i l i d a d de la 3- base d e l anticodón" o hipótesis d e l " t a m b a l e o "

fue propuesta p o r Crick (1966) para explicar el h e c h o de q u e u n m i s m o ARN-t fuera ca-
paz de reconocer varios tripletes en el mensajero. La tercera base d e l anticodón d e l
ARN-t es la que o c u p a la posición 5' y tiene una m a y o r flexibilidad para f o r m a r p u e n -
tes de hidrógeno c o n otras bases nitrogenadas, p u d i e n d o f o r m a r enlaces de h i d r ó g e n o
c o n varias bases e n la posición 3' d e l A R N - m . En la siguiente tabla se i n d i c a n las p o s i -
bilidades de apareamiento entre la 3- base del anticodón ( o c u p a la posición 5' d e l
ARN-t) y la q u e o c u p a la posición 3' d e l triplete d e l A R N - m .

3" Base d e l anticodón del ARN-t 3- base en el c o d ó n d e l A R N - m

( e x t r e m o 5') ( e x t r e m o 3')
G C o U
C G
A U
U A o G
I A, U o C

Según se observa e n el anticodón puede aparecer la inosina ( I ) , una base p o c o fre-

cuente y q u e p u e d e aparear c o n otras tres en el mensajero.
Los tripletes del A R N - m los habíamos o b t e n i d o en el p r i m e r apartado de este p r o b l e -
ma, a partir de ellos p o d e m o s obtener los anticodones e n el ARN-t. En el siguiente
esquema los anticodones de cada ARN-t distinto se h a n separado mediante guiones y la 3*
base ( e x t r e m o 5') se ha subrayado:

Polipéptido NH, - met - leu - pro - gly - lys - COOH

ARN-m 5' AUG - UUA - CCG - GGA - AAA - UAG 3'

ARN-t 3' UAC - A A U - G G C - C C U - U U U - F I N 5'

ARN-t 3' UAU - - GGU - - - 5'

Por tanto, los codones de este mensajero que c o r r e s p o n d e n a los a m i n o á c i d o s m e t i o -

nina ( m e t ) y p r o l i n a ( p r o ) p u e d e n tener dos posibles anticodones.

5.7. El virus del mosaico del tabaco ( T M V ) está constituido por una molécula de ARN de
-i hélice sencilla de unos 6.000 nucleótidos, y una envoltura proteica de 3,5 x 10'' dal-
ton de peso molecular. La envoltura proteica del T M V está formada por 2.130
capsómeros o polipéptidos idénticos de 158 aminoácidos de longitud. Este tipo de es-
tructura aparece con frecuencia en los seres vivos.
a) Sabiendo que él peso molecular medio de un aminoácido es 120 dalton, ¿podría
estar constituida la etivoltura proteica por un solo polipéptido del mencionado
peso molecular?
b) ¿Qué ventaja supondría producir proteínas de alto peso molecularformadas por
la agregación de polipéptidos de bajo peso moleciúar, en el supuesto de que por
anomalías de la traducción se incorporara erróneamente un aminoácido cada
diez mil?
 Código genético y síntesis de proteínas 99

Solución

a) Si d i v i d i m o s el peso molecular de la envoltura proteica del virus p o r el peso m e d i o de

u n aminoácido, o b t e n d r e m o s el n ú m e r o de aminoácidos q u e f o r m a n la cápside: 3'5 x
l O V 120 = 291.666 aminoácidos. T e n i e n d o en cuenta q u e cada aminoácido está deter-
m i n a d o p o r tres bases, el número mínimo de ribonucleótidos necesario para codificar
u n polipéptido d e l tamaño i n d i c a d o sería 291.666 x 3 = 874.998 ribonucleótidos. Por
tanto, si el virus TMVüene 6.000 ribonucleótidos n o puede p r o d u c i r u n polipéptido de
291.666 aminoácidos.

b) Si cada 10.000 aminoácidos u n o se incorpora de forma errónea e n la traducción, u n p o -

lipéptido de 219.666 aminoácidos tendría c o m o media (291.666 / 10.000 = 29,1) 29
aminoácidos incorrectos. Por tanto, nunca tendríamos e l polipéptido de la secuencia
correcta. En este caso n o sería posible conseguir u n a cápside d e l TMVsin errores. Sin
embargo, si la envoltura proteica se forma mediante la unión de m u c h o s polipéptidos
idénticos y p e q u e ñ o s , formados p o r 158 aminoácidos cada polipéptido, entonces u n o
de cada 63 polipéptidos tendría u n aminoácido incorrecto (63 X 158 = 10.000), p e r o
siempre existirían muchos más polipéptidos c o n la secuencia correcta (62 polipépti-
dos) y se podría formar la cápside d e l virus sin errores. Por consiguiente, es m e j o r
p r o d u c i r estructuras proteicas grandes a base de polipéptidos p e q u e ñ o s .

5.8. Se han aislado cuatro ARN mensajeros distintos en E. coli y se han obtenido las se-
cuencias de ribonucleótidos del extremo 5' en todos ellos. Las secuencias obtenidas,
en las que se ha subrayado el triplete de iJiiciación, han sido las siguientes:

y GAUUCCUAGGAGGUUUGACCUAUGCGAGCUUUUAGU 3'
5' AUGUACUAGGAGGUUGUAUGGAACAACGCUUUAAAU 3'
5' GAAUCUUAGGAGGUUUUUUAUGCGAGUGUUGUUUAA 3'
5' CAAUUCAAGGAGGUUGUAIJG.GAACGCUACAAAUUAG 3'

Igualmente, se ha podido aislar el ARN ribosómico 16 S que forma parte de la su-

bunidad pequeña de los ribosomas de E. coli y se ha obtenido su secuencia de
ribonucleótidos. Parte de esta secuencia puede complementar con el extremo 5'
de los mensajeros anteriormente descritos y presenta el siguiente orden de ribo-
nucleótidos:

3' AUUCCUCCACUAG 5'

a) ¿Observa algima semejanza en la secuencia de los extremos 5' de los mensaje-

ros indicados? En caso afirmativo, indique en qué consiste.
h) ¿Qué parte de la secuencia de los extremos 5' de los mensajeros puede comple-
mentar con la secuencia del ARN ribosómico 16 S indicada?
c) ¿Cuál sería la posible función de esta secuencia en la traducción?
100 360 Problemas de Genética

Solución

a) Los extremos 5' de los mensajeros indicados presentan una secuencia de 8 bases idén-
tica e n todos ellos, esta secuencia se ha intensificado y subrayado e n el siguiente
esquema:

5' GAUUCCUAGGAGGUUUGACCUAUGCGAGCUUUUAGU 3'

5' AUGUACUAGGAGGUUGUAUGGAACAACGCUUUAAAU 3'
5' GAAUCUUAGGAGGUUUUUUAUGCGAGUGUUGUUUAA 3'
5' CAAUUCAAGGAGGUUGUAUGGAACGCUACAAAUUAG 3'

h) Esta secuencia c o m ú n a los cuatro mensajeros p u e d e aparear c o n la secuencia o b t e n i -

da a partir d e l A R N ribosómico 16 S. En el siguiente esquema se destaca la parte de la
secuencia de A R N l 6 S que podría hibridar c o n el e x t r e m o 5' d e l mensajero. La se-
cuencia se ha resaltado y situado entre guiones:

3' AU- UCC UCC A-CUAG 5'

5' GAUUCCU-AGGAGGU-UUGACCUAUGCGAGCUUUUAGU 3'

c) C o m o hemos p o d i d o observar, existe una secuencia e n los extremos 5' de varios m e n -

sajeros distintos que se mantiene ( A G G A G G U U ) y además es c o m p l e m e n t a r i a de otra
secuencia e n el A R N l 6 S que f o r m a parte de la s u b u n i d a d p e q u e ñ a d e l r i b o s o m a . Por
tanto, esta secuencia podría servir para que la s u b u n i d a d p e q u e ñ a d e l r i b o s o m a reco-
nozca el e x t r e m o 5' d e l mensajero y p u e d a comenzar la traducción. Esta secuencia de
ribonucleótidos que aparece cerca d e l c o d ó n de iniciación ( A U G ) e n el e x t r e m o 5' d e l
mensajero fue descubierta p o r Shine y Dalgarno, r e c i b i e n d o p o r este m o t i v o el n o m -
bre de secuencia Shine-Dalgarno.

5.9. Utilizando como mensajero sintético el copolímero formado mediante la polirribo-

nucleótido fosforilasa en un medio que contiene 80% de guanina (G) y 20% de
uracilo (U) se sintetiza en el medio acelular de traducción "in vitro" un polipépti-
do con las siguientes proporciones relativas de aminoácidos: 80 de glicina, 20 de
valina, 16 de triptófano, 4 de leucina, 4 de cisterna y 1 de feyiilalanina.
Deduzca hasta donde sea posible los codones o tripletes correspondientes a estos
aminoácidos.

Solución

La polirribonucleótido fosforilasa es u n enzima que sintetiza A R N a partir de ribonucleó-

tidos libres y sin necesidad de copiar u n m o l d e , simplemente va t o m a n d o ribonucleótidos al
azar del m e d i o y los va u n i e n d o . La dirección de síntesis es '5-* 3'- Por tanto, si e n el m e d i o
sólo existen G y U , el A R N que se formará sólo contendrá estas dos bases; si además la G es-
tá e n u n 80% y el uracilo e n u n 20%, la proporción en la que se encuentran ambas bases e n
 Código genético y síntesis de proteínas 101

el m e d i o es de 4 guaninas p o r cada uracilo (4G:1U), la probabilidad de que el enzima t o m e

una guanina del m e d i o sería 4/5 y la de que tome u n U sería 1/5. Además, cada vez q u e el
enzima toma u n ribonucleótido del m e d i o es u n suceso independiente del ribonucleótido
q u e haya t o m a d o previamente. Por consiguiente, e n el A R N podrán aparecer 8 tipos de tri-
pletes diferentes construidos c o n G y U c o n las siguientes probabilidades;

Triplete 5' 3' Probabilidad Proporción relativa

GGG 4/5 X 4/5 X 4/5 = 64/152 64
GGU 4/5 X 4/5 X 1/5 = 16/125 16
GUG 4/5 X 1/5x4/5 = 16/125 16
UGG 1/5 X 4/5 X 4/5 = 16/125 16
GUU 4/5 X 1/5 X 1/5 = 4/125 4
UGU 1/5 X 4/5 X 1/5 = 4/125 4
UUG 1/5 X 1/5 X 4/5 = 4/125 4
UUU 1 / 5 x 1 / 5 x 1 / 5 = 1/125 1

El mensajero sintetizado contendrá los 8 tripletos indicados e n la tabla anterior. Si c o m -

paramos las p r o p o r c i o n e s relativas e n las q u e aparecen los tripletes e n el A R N sintético y
las p r o p o r c i o n e s relativas e n las que se detectan los aminoácidos e n los polipéptidos sin-
tetizados a partir de e.ste ARN, p o d e m o s observar que la suma de las p r o p o r c i o n e s en q u e
aparecen los distintos aminoácidos es (80+20+16+4+4+1) = 125. Las sumas de las p r o p o r -
ciones relativas de los diferentes tripletes también es 125, pudiéndose c o m p a r a r fácilmente
los datos. El aminoácido q u e aparece c o n m a y o r proporción es la glicina, c o n 80, este va-
lor p u e d e proceder de la suma de 64 + l 6 = 80; p o r consiguiente, la glicina estaría
determinada p o r el triplete más frecuente G G G (64) y u n triplete de proporción l 6 , es de-
cir, c o n dos guaninas y u n uracilo, pero n o p o d e m o s saber qué secuencia concreta tendría
este triplete. El aminoácido valina aparece en proporción 20, p u d i é n d o s e o b t e n e r este va-
lor p o r la suma de u n triplete de frecuencia relativa l 6 (2 guaninas y u n u r a c i l o ) y o t r o de
frecuencia relativa 4 (una guanina y dos uracilo.s); p o r tanto, la valina estaría d e t e r m i n a d a
p o r dos tripletes, pero t a m p o c o podríamos especificar su secuencia concreta. La leucina y
la cisteína presentan una frecuencia relativa de 4 correspondiéndoles u n triplete de una
guanina y dos uracilos, pero t a m p o c o p o d e m o s precisar su secuencia exacta. Por último,
la fenilalanina muestra la frecuencia relativa más baja (1) y le atribuiríamos el triplete m e -
nos frecuente, es decir, U U U .
Cuando se estaba descifrando el código, n o se sabía si era o n o degenerado y t a m p o -
co se c o n o c í a el t i p o de degeneración. Por tanto, c u a n d o se resuelve u n p r o b l e m a de
desciframiento d e l código genético n o se d e b e n asignar aminoácidos a tripletes b a s á n d o -
nos en la degeneración de la 3- base. Para resolver este t i p o de problemas, tenemos q u e
comparar los tripletes de cada mensajero sintético y los aminoácidos que aparecen en los
polipéptidos correspondientes, de manera q u e debemos encontrar q u e dos mensajeros d i -
ferentes tengan u n triplete c o m ú n y los polipéptidos sintetizados muestren también u n
solo aminoácido común. Si aparecen u n triplete c o m ú n y dos aminoácidos c o m u n e s n o es
posible resolver sin ambigüedades.
102 360 Problemas de Genética

Solamente es posible descifrar totalmente u n c o d ó n de glicina, el más frecuente, G G G ,

y el triplete de fenilalanina, el menos frecuente, U U U . Los demás tripletes quedarían par-
cialmente descifrados. Sin embargo, los resultados obtenidos sugieren q u e el c ó d i g o
g e n é t i c o es degenerado, es decir, q u e u n aminoácido puede estar d e t e r m i n a d o p o r más de
u n triplete, c o m o sería el caso de la glicina y de la valina.

5 . 1 0 . Si se emplean los siguientes mensajeros sintéticos de secuencia conocida en un sis-

tema acelular de traducción "in vitro" capaz de sintetizar proteínas se obtienen los
polipéptidos indicados en la siguiente tabla:

Mensajero sintético Polipéptido sintetizado

PoliUG NH,-cys-val-cys-val-cy.s-val-...

(...UGUGUGUGUG...) NH,-val-cys-val-cys-val-cys-...

Poli GUGG NH,-val-gly-gly-trp-val-gly-gly-trp>val-gly-gly-trp-...

(...GUGGGUGGGUGGGUGG...)NH,-gly-gly-trp-val-gly-gly-tq>val-gly-gly-trp-val-...

NH,-gly-tq>val-gly-gly-tip-val-gly-gly-trp-val-gly-...

NH,-trp-val-gly-gly-trp-vaI-gly-gly-trp-val-gly-gly-...

Poli U U G U NH,-val-cys-leu-phe-val-cys-leu-phe-val-cys-leu-phe-...

(...UUGUUUGUUUGUUUGU...) NH.-cys-leu-phe-val-cys-leu-phe-val-cys-leu-phe-val-...

N H ,-leu-phe-val-cys-leu-phe-val-cys-leu-phe-val-cys-...

M-l2-phe-val-cys-leu-phe-val-cys-leu-phe-val-cys-leu-...

cys = cisteína, gly = glicina, leu = leucina, phe = fenilalanina, trp = triptófano,
val = valina

Téngase en cuenta que cuando se está descifrando el código genético no se sabe si

éste es o no degenerado.
a) Indique los tripletes que contiene cada mensajero sintético.
b) ¿Por qué los polipéptidos sintetizados comienzan en cada caso por un aminoá-
cido distinto?
c) ¿Qué codones podrían ser total o parcialmente descifrados a partir de estos
datos?
d) ¿Indican estos resullados que el código genético es degenerado?
e) Diga qué aminoácidos, y en qué proporciones, se incorporarán a los polipépti-
dos formados en un medio de traducción "in vitro" en el que se emplea el
copolímero sintetizado al azar por la polirribonucleótido fosforilasa en un me-
dio que contiene Uy G eji las proporcioties 4U:1G.
 Código genético y síntesis de proteínas 103

Solución

aJ El mensajero sintético p o l i U G ( . . . U G U - G U G - U G U - G . . . ) contiene dos tripletes d i f e r e n -

tes: U G U y G U G , que se alternan en su secuencia. El mensajero sintético p o l i G U G G
( . . . G U G - G G U - G G G - U G G - G U G - G . . . ) muestra cuatro codones diferentes q u e se r e p i t e n
siempre e n el m i s m o o r d e n : G U G , G G U , G G G y U G G y el mensajero p o l i U U G U
( . . . U U G - U U U - G U U - U G U - U U G - U . . . ) tiene también 4 tripletos diferentes q u e se r e p i t e n
siempre e n el m i s m o o r d e n : U U G , U U U , G U U y U G U .

h) En los sistemas de traducción " i n v i t r o " si n o existe u n triplete de iniciación ( A U G ) la

síntesis d e l polipéptido puede comenzar p o r cualquier base nitrogenada. Por esta cau-
sa los polipéptidos p u e d e n comenzar en el caso de p o l i - U G p o r dos a m i n o á c i d o s
distintos y en el p o l i - G U G G y p o l i - U U G U p o r cuatro aminoácidos distintos, tantos co-
m o bases tiene la u n i d a d q u e se repite.

c) C u a n d o se estaba descifrando el código, n o se sabía si era o n o degenerado y t a m p o c o

se c o n o c í a el t i p o de degeneración. Por tanto, cuando se resuelve u n p r o b l e m a de des-
ciframiento del código genético n o se d e b e n asignar aminoácidos a tripletes b a s á n d o n o s
e n la degeneración de la 3- base. Para resolver este t i p o de problemas, tenemos que
comparar los tripletes de cada mensajero sintético y los aminoácidos que aparecen e n
los polipéptidos correspondientes, de manera que debemos encontrar que dos mensa-
jeros diferentes tengan u n triplete c o m ú n y los polipéptidos sintetizados muestren
también u n solo aminoácido común. Si aparece u n triplete c o m ú n y dos aminoácidos
comunes n o es posible resolver sin ambigüedades.

Si comparamos el p o l i - U G y el p o l i - G U G G encontramos u n solo triplete c o m ú n , G U G ,

y u n .solo aminoácido c o m ú n , valina (val). Por tanto, G U G codifica para v a l . Sin e m -
bargo, si comparamos p o l i - U G y p o l i - U U G U encontramos u n solo triplete c o m ú n ,
U G U , y dos aminoácidos comunes, valina (val) y cisteína (cys). En este último, sólo c o n
esta c o m p a r a c i ó n n o es posible saber q u é aminoácido (val o cys) corresponde al t r i -
plete U G U . En el esquema siguiente se indica el razonamiento seguido para descifrar
los tripletes:

Poli UG Poli G U G G G
UGUGUGUGUGUG GUG GGUGGG UGGGUGGGU G G G U G G

cys - val - cys - val - val - gly - gly - trp - v a l - gly - gly - trp -

í f
Poli UUGU
UUGUUU GUUUGUUUGUUU GUUUGU

leu - phe - val - cys - leu - phe - val - cys -

f !
104 360 Problemas de Geriética

En la tabla siguiente se i n d i c a n los tripletes de cada mensajero y los a m i n o á c i d o s de los

polipéptidos correspondientes:

Mensajero sintético Triplete 5' ^ 3' Aminoácido

Poli-UG UGU cys
GUG val
GUG val
Poli-GUGG GGU gly
GGG gly
UGG trp
UUG leu
Poli-UUGU UUU phe
GUU val
UGU cys

T e n i e n d o e n cuenta q u e ya hemos d e d u c i d o q u e G U G es val, e n el p o l i - U G , el t r i p l e - |

te que queda, U G U , t i e n e n que ser, p o r eliminación, cisteína (cys).
En el mensajero p o l i - G U G G , siempre se repiten los mismos cuatro tripletes e n el m i s m o
o r d e n y la misma secuencia de cuatro aminoácidos se repite en el polipéptido correspon-
diente. Sabemos que G U G corresponde a val, el siguiente triplete a G U G siempre es G G U y
en el polipéptido detrás de val siempre está glicocola (gly); p o r tanto, G G U codifica para gly.
Después de gly va siempre otra glicocola (gly) y en el mensajero después de G G U siempre
está el triplete G G G , de manera que G G G debe codificar para gly. Por t^iltimo, a continua-
ción de la segunda glicocola (gly) va siempre triptófano (trp) y el c o d ó n G G G d e l mensajero
siempre va seguido del triplete U G G ; p o r consiguiente, U G G codifica para triptófano ( t r p ) .
C u a n d o hemos analizado el mensajero p o l i - U G hemos d e d u c i d o q u e el triplete U G U
codifica para cisteína (cys). C o n este dato p o d e m o s abordar el desciframiento d e l mensa-
jero p o l i - U U G U , ya q u e este triplete U G U y el aminoácido p o r el c o d i f i c a d o (cys) aparecen
e n el polipéptido sintetizado. I n m e d i a t a m e n t e detrás de cys va siempre leucina ( l e u ) y a
continuación de U G U encontramos siempre el triplete U U G ; p o r tanto, U U G codifica p a -
ra leu. D e s p u é s de leu encontramos phe (fenilalanina) y d e s p u é s de U U G s i e m p r e está
U U U ; por consiguiente, U U U determina phe.

d) Todos los tripletes h a n sido totalmente descifrados y los aminoácidos valina (va!) y g l i -
cocola ( g l y ) están codificados cada u n o de ellos p o r dos tripletes diferentes. Por tanto,
los resultados obtenidos i n d i c a n q u e el código genético es degenerado. Además, los t r i -
pletes para g l y son G G G y G G U , las dos primeras bases son c o m u n e s y varía la tercera
base. En el caso del aminoácido valina (val) los tripletes son G U G y G U U , de n u e v o las
dos primeras bases son comunes y varía la tercera. Estos resultados sugieren q u e la de-
g e n e r a c i ó n afecta f u n d a m e n t a l m e n t e a la 3- base de cada triplete, siendo las dos
primeras constantes.

e) En el p r o b l e m a n° 9 habíamos explicado c ó m o f i m c i o n a la polirribonucleótido fosforila-

sa. Si en el m e d i o las proporciones de uracilo y guanina son 4U:1G, la p r o b a b i l i d a d de
que este enzima tome u n uracilo es 4/5 y la de que tome una guanina del m e d i o es 1/5.
 Código genético y síntesis de proteínas 105

Por tanto, el A R N sintetizado contendrá los o c h o tripletes diferentes q u e se p u e d e n for-

mar. Los o c h o tripletes d e l A R N h a n sido descifrados e n los apartados anteriores d e l
p r o b l e m a ; p o r tanto, en la siguiente tabla i n d i c a m o s los tripletes di.stintos, sus f r e c u e n -
cias y los aminoácidos para los que codifican:

Triplete 5 ' 3 ' Aminoácido Probabilidad Proporción relativa

UUU phe 4/5 X 4/5 X 4/5 = 64/152 64
UUG leu 4/5 X 4/5 X 1/5 = 16/125 16
UGU cys 4/5 X 1/5 X 4/5 = 16/125 16
GUU val 1/5 X 4/5 X 4/5 = 16/125 16
UGG trp 4/5 X 1/5 X 1/5 = 4/125 4
GUG val 1/5 X 4/5 X 1/5 = 4/125 4
GGU gly 1/5 X 1/5 X 4/5 = 4/125 4
GGG gly 1/5 X 1/5 X 1/5 = 1/125 1

Por consiguiente, cada aminoácido aparecerá e n el polipéptido sintetizado e n la p r o -

porción indicada e n la tabla. Es necesario fijarse e n que g l y está dos veces, p o r tanto, su
proporción relativa será 4+1=5 y q u e algo semejante sucede c o n cys, q u e también está co-
dificada p o r dos tripletes, siendo su proporción relativa 16+4=20.

i 5 . 1 1 . 5 í se iitilizayi como mensajeros sintéticos de secuencia conocida polir- AG,

poli-AGA y poli-AGAC en sistemas de traducción "in vitro" se sintetizan los poli-
péptidos indicados en la siguiente tabla. Tenga en cuenta que cuando se está
descifrando el código genético no se sabe si es o no degenerado, y en el supuesto de
que sea degenerado, tampoco se sabe qué tipo de degeneración presenta.

Mensajero sintético Polipéptido sintetizado

Poli A G (... AGAGAGAG...)
Poli A G A (.. .AGAAGAAGA...)
Poli AGAC
(... AGACAGACAGAC...)
.. . - a r g - g l u - a r g - g l u - a r g - g l u - a r g - g l u - . . .
Poli-arg (.. .-arg-arg-arg-arg-arg-...)
Poli-glu (.. . - g l u - g l u - g l u - g l u - g l u - . . . )
Poli-lys (.. .-lys-lys-lys-lys-lys-...)
...-gln-4hr---asp--arg--gln-thr--asp--aig--gln-thr-asp--aíg-...

arg = arginina, asp^= aspártico, glu = glutámico, gln = glutamina, lys = Usina,
thr = treonina

a) ¿Qué tripletes distintos contiene cada mensajero sintético?

b) ¿Qué aminoácidos podrían ser total o parcialmente descifrados a partir de estos
datos?
c) ¿Por qué se sintetizan tres polipéptidos distintos con el poli AGA?
d) ¿Indican estos resultados que el código genético es degenerado?
106 360 Problemas de Genética

Solución cj C o n el mensjpí
repite el aig. i
aJ El mensajero Poli A G ( . . . A G A - G A G - A G . . . ) contiene dos tripletes diferentes A G A y G A G . los sistemas»
El mensajero Poli AGA (...AGA-AGA-AGA...) o (...A-GAA-GAA-GA...) o cualquier!
( . . . A G - A A G - A A G - A . . . ) d e p e n d i e n d o de la base p o r la que comience a traducirse pre- el mens
senta tres codones diferentes AGA, GAA y AAG. El Poli AGAC iniciadcKi 1
( . . . A G A - C A G - A C A - G A C - . . . ) tiene cuatro tripletes diferentes que se repiten siempre e n el
m i s m o o r d e n : A G A , C A G , A C A y GAC.

h) Para comenzar a descifrar hay que buscar en dos mensajeros diferentes u n triplete co-
m ú n y u n solo a m i n o á c i d o c o m ú n en los polipéptidos sintetizados. E n los tres
mensajeros aparece u n solo triplete c o m ú n ( A G A ) y u n solo a m i n o á c i d o c o m ú n a los
tres (arg). Por tanto, A G A codifica para arginina. En el p o l i A G el triplete q u e q u e d a ,
G A G , p o r eliminación, tiene que codificar para glutámico ( g l u ) . En el mensajero p o l i
A G A C hay cuatro tripletes diferentes que se r e p i t e n siempre e n el m i s m o o r d e n y e n el
polipéptido correspondiente aparecen 4 aminoácidos que se r e p i t e n también en el mis-
m o o r d e n ; p o r tanto, sabiendo que A G A es arginina (arg), después de A G A s i e m p r e
está C A G y d e s p u é s de arg siempre hay g l u t a m i n a ( g l n ) ; p o r consiguiente, C A G deter- ci; Lc5!
m i n a g l n . Siguiendo a C A G tenemos A C A y a continuación de g l n hay t r e o n i n a ( t h r ) .
Por último, después de A C A va GAC y después de treonina sigue aspártico (asp), de
manera que GAC codifica para aspártico. En el p o l i A G A , el triplete A G A sabemos q u e 5er4
es arg, p e r o los otros dos tripletes G A A y A A G , n o p o d e m o s descifrarlos totalmente;
u n o de ellos corresponde a glutámico ( g l u ) y el o t r o a lisina (lys), p e r o n o es p o s i b l e ,
c o n los datos q u e tenemos, asignaries u n triplete concreto a cada a m i n o á c i d o . Los t r i - 5.12.1
pletes totalmente descifrados son: A G A - arg, G A G - g l u , C A G - g l n , A C A - t h r y G A C - a s p .
Los tripletes parcialmente descifrados son G A A y A A G , u n o es para g l u y o t r o para lys.
En el esquema y tabla siguientes se i n d i c a n los tripletes q u e presenta cada mensajero
sintético y los aminoácidos que se i n c o r p o r a n e n los polipéptidos correspondientes:

Poli AG Poli AGAC

AGAGAGAGAGAG AGA CAG ACA GAC AGA CAG ACA GAC

arg - glu - arg - glu - arg - gln - thr - asp - arg - gln - thr - asp -

Mensajero sijitético Triplete 5' 5' Aminoácido

Poli-AG AGA arg
GAG glu
AGA arg
Poli-AGA' GAA glu
AAG lys
AGA arg
Poli-AGAC CAG gln
ACA thr
GAC asp

t
 Código genético y síntesis de proteínas 107

cj C o n el mensajero p o l i A G A se sintetizan tres polipéptidos distintos, u n o en el q u e se

repite el arg, o t r o en el que se repite glutámico y el último e n el q u e se reitera lys. En
los sistemas de traducción " i n v i t r o " la traducción d e l mensajero puede c o m e n z a r p o r
cualquier base, y si la traducción comienza p o r la p r i m e r a A, el triplete q u e se repite e n
el mensajero es A G A , si comienza p o r la guanina el c o d ó n q u e se reitera es G A A y si la
iniciación tiene lugar p o r la segunda adenina, el triplete que se repite es A A G .

AGAAGAAGAAGAAGA AGA es arg

arg - arg - arg - arg - arg -

GAA Glu
AGAAGAAGAAGAAGA AAG Lys

Parcialmente
descifrados
AGAAGAAGAAGAAGA

d) Los resultados obtenidos i n d i c a n que el c ó d i g o genético es degenerado, ya q u e el a m i -

n o á c i d o glutámico está d e t e r m i n a d o p o r dos tripletes, u n o de ellos ha sido totalmente
descifrado, G A G ; sin embargo, el o t r o triplete está parcialmente descifrado, p u d i e n d o
ser G A A o A A G .

> 5 . 1 2 . Utilizando mettsajeros sintéticos de secuencia conocida en sistemas de traducción

"in vitro" se sintetizan los polipéptidos indicados en la siguiente tabla:

Mensajero sintético Polipéptido sintetizado

Poli-ser (.. . - s e r - s e r - s e r - s e r - s e - . . . )
Poli UUC ( . . . U U C U U C U U C U U C U U C U U C . ) P o l i - l e u ( . . . - l e u - l e u - l e u - l e u - l e u - . . . )
Poli-phe (.. . - p h e - p h e - p h e - p h e - p h e - . . )
P o l i - l e u (.. . - l e u - l e u - l e u - l e u - l e u - , . . )
Poli U U G (...UUGUUGUUGUUGUUGUUG...) Poli-val (...val-val-val-val-val-...)
P o l i - c y s (.. . - c y s - c y s - c y s - c y s - c y s - . . . )
Poli G U A ( . . . G U A G U A G U A G U A G U A G U A . . . ) Poli-ser ( . . . - s e r - s e r - s e r - s e r - s e r - . . , )
P o l i - v a l (.. , - v a l - v a l - v a l - v a l - v a l - , . . )
Poli G A U (...GAUGAUGAUGAUGAUGAU...) Poli-asp (...-as{>-asp-asp-asp-asp-...)
^ Poli-met (...-met-met-met-met-met-...)
Poli G A U A ( . . . G A U A G A U A G A U A G A U A . . . ) Ningún polipéptido
Poli G U A A ( . . . G U A A G U A A G U A A G U A A . . . ) Ningún polipéptido

a) ¿Por qué el poli GUA y el poli GAU determinan cada uno sólo dos bomopolipép-
tidos?
b) ¿Por qué el poli GAUA y el poli GUAA no estimulan la síntesis de polipéptidos?
108 360 Problemas de Genética

Solución

a) T e n i e n d o en cuenta que en u n sistema de traducción " i n v i t r o " la iniciación de la sín-

tesis d e l polipéptido p u e d e tener lugar p o r cualquier base nitrogenada, l o q u e
esperamos c u a n d o se e m p l e a n mensajeros sintéticos en los que se repite u n d e t e r m i -
n a d o trinucleótido es q u e se sinteticen tres polipéptidos diferentes, cada u n o de ellos
c o n u n solo aminoácido repetido muchas veces. Así, en la tabla p o d e m o s ver q u e el
p o l i UUC y el p o l i U U G c u m p l e n esta expectativa, de manera que o r i g i n a n tres p o l i -
péptidos distintos. Sin embargo, p o l i G U A y p o l i G A U solamente d a n lugar a dos
polipéptidos diferentes. Probablemente, a l g u n o de los tres tripletes posibles de cada
mensajero n o lleva información para ningím aminoácido, es decir, p u e d e ser que exis-
tan tripletes sin sentido que n o c o d i f i c a n para aminoácido a l g u n o . Esto explicaría la
síntesis de sólo dos polipéptidos distintos c o n cada u n o de estos mensajeros.

bj El triplete U A G está presente en el p o l i G U A y e n el p o l i G A U A ; este último mensajero

n o p r o d u c e síntesis de polipéptidos. El p o l i G U A A t a m p o c o origina polipéptidos. Pro-
bablemente, estos dos mensajeros sintéticos p o l i G A U A y p o l i G U A A c o n t i e n e n
también tripletes sin sentido, que n o c o d i f i c a n para a m i n o á c i d o a l g u n o .

5 . 1 3 . Segíin la hipótesis del adaptador de Crick (1958), los aminoácidos son transporta-
dos por la molécula adaptadora hasta el ARN mensajero. Cada adaptador reconoce
el triplete apropiado en el ARN-m, siendo de esta manera especificada por el gen la
posición correcta de cada aminoácido en el polipéptido.
Los siguientes experimejitos están relacionados coji el papel del ARN transferente en
la síntesis de proteínas.
a) A partir de extractos celulares se pudieron obtener aminoácidos unidos a ARN-t.
Cada aminoácido estaba unido a un ARN-t específico.
b) Usando un ARN-m sintético, poli UG, en un sistema capaz de sintetizar proteí-
nas "in vitro", se eixcontró que codificaba para el polipéptido - cys - val - cys-
val - cys - val... cuando estos aminoácidos estaban unidos a sus ARN-t específi-
cos. Sin embargo, cuando la cisteíjia (cys) fue reducida a alanina (ala) después
de estar unida a su ARN-t específico, el poli UG estimulaba la síntesis del poli-
péptido...-val-ala-val-ala-val-ala-... Si la alanina estaba unida a su ARN-t
específico, no se incorporaba en el polipéptido sintetizado a partir del poli UG.
Responda a la siguientes preguntas:
a) ¿Apoyan estos datos la hipótesis del adaptador de Crick?
b) Itídique qué resultados se hubieran obtenido si los codones en el ARN-m fueran
recojiocidos directamente por los propios aminoácidos.

Solución

a) La hipótesis d e l adaptador de Crick p r o p o n e q u e los aminoácidos n o son capaces p o r

sí solos de reconocer los codones d e l mensajero, de manera q u e necesitan ser trans-
 Código genético y síntesis de proteínas 109

portados p o r otra molécula o adaptador; esta molécula sería la q u e llevaría a cabo el

r e c o n o c i m i e n t o de los trípletes d e l mensajero. Por tanto, si los aminoácidos aparecen
u n i d o s a A R N - t y cada aminoácido está u n i d o a u n A R N - t específico distinto, estos da-
tos sugieren que la molécula de A R N - t podría ser el adaptador q u e p e r m i t e a los
aminoácidos reconocer los codones d e l mensajero.
IJJ El mensajero p o l i U G ( U G U G U G U G . . . . ) d e t e r m i n a la síntesis d e l p o l i p é p t i d o
c y s - v a l - c y s - v a l - . . . s i e m p r e q u e la cys esté u n i d a a su ARN-t^., e s p e c í f i c o y q u e v a l
esté u n i d o a su ARN-t„| e s p e c í f i c o . Si la cys se r e d u c e a alanina (ala) d e s p u é s de es-
tar u n i d a a su ARN-t,,., e s p e c í f i c o , entonces el p o l i U G determinará la síntesis d e l
p o l i p é p t i d o v a l - a l a - v a l - a l a - . . . Por tanto, l o q u e t e n e m o s es u n a ala u n i d a al ARN-t^.^
e s p e c í f i c o de cisteína. El r e c o n o c i m i e n t o d e l tríplete l o está r e a l i z a n d o el ARN-t^.,. Si
la alanina está u n i d a a su A R N - t , , , e s p e c í f i c o , este a m i n o á c i d o n o se i n c o r p o r a al p o -
lipéptido sintetizado a partir de p o l i U G . La c o n c l u s i ó n es q u e el A R N - t es el q u e
lleva a c a b o el r e c o n o c i m i e n t o d e l c o d ó n e n el mensajero y n o el a m i n o á c i d o d i r e c -
tamente. Si fuera el a m i n o á c i d o el q u e realiza d i r e c t a m e n t e el r e c o n o c i m i e n t o d e l
triplete d e l mensajero, en ningún caso se podría haber i n c o r p o r a d o la alanina al p o -
lipéptido sintetizado a partir d e p o l i U G .

Codón Codón Codón

y 5 . 1 4 . Zfl tripsina hidroliza los enlaces peptídicos de los grupos carboxilo de arginina
(arg) y lisina (lys), mientras que la quimotripsina hidroliza los enlaces peptídicos
de los grupos carboxilo de los ami?wácidos aromáticos como la fenilalanina (phe),
triptófano (trp) y tirosina (tyr). Si mi polipéptido se trata por separado con cada
una de estas enzimas, se obtienen una serie de péptidos más pequeños que pueden
separarse mediante cromatografía bidimensional en papel. Cada uno de estos pép-
110 360 Problemas de Genética

tidos pequeños puede ser secuenciado mediante el método de degradación de Ed-

man que degrada secuencialmente
(NH2) utilizando isotiocianato
Se ha aislado el ARN-m
mento, se ha empleado
vitro"y se han obtenido
estos péptidos por su extremo amino terminal
defenilo.
de un determinado polipéptido, se ha secuenciado un seg-
dicho segmento en un sistema acelular de traducción "in
los siguientes resultados:

Segmento del ARN-m secuenciado Péptido sintetizado

5' GAUUUUGAAAGAUCUGGGACA 3' NH-asp-phe-glu-arg-ser-gly-thr-COOH

La aplicación de las técnicas de digestión con enzimas y el método de degmdación

de Edman a este polipéptido ha originado los péptidos pequeños indicados en la si-
guiente tabla:

Enzima utilizada Secuencia de cada uno de los péptidos obtenidos

para cortar el polipéptido
NH-glu-arg-ser-gly-thr-tyr-COOH
Quimotripsina NH,-met-leu-val-asp-phe-COOH
NH-val-ser-leu-COOH
NH-pro-arg-ser-leu-trp-COOH
NH,-ala-gln-asn-lys-ile-val-phe-COOH
NH-ile-val-phe-pro-arg-COOH
Tripsina NH,-met-Ieu-val-asp-phe-gIu-arg-COOH
NH-ser-leu-trp-val-ser-leu-COOH
NH,-ser-gly-thr-tyr-ala-gln-asn-lys-COOH

a) ¿Cuál es la secuencia del polipéptido original?

h) ¿Qué codones corresponden a los aminoácidos que aparecen en el péptido sin-
tetizado "in vitro"?
c) ¿A qué parte de la secuencia de aminoácidos del polipéptido original corres-
ponde el péptido sintetizado "in vitro"?
d) ¿Solapa el péptido sintetizado "in vitro" con algunos de los péptidos obtenidos
después de la digestión con quimotripsina y tripsina?

Solución

a) Para o r d e n a r los péptidos, debemos comparar las secuencias de los o b t e n i d o s c o n q u i -

motripsina y c o n tripsina, r e c o r d a n d o q u e la tripsina r o m p e p o r arg y lys, mientras q u e
la q u i m o t r i p s i n a r o m p e p o r p h e , t r p y tyr. Los péptidos originados a partir d e l trata-
m i e n t o c o n tripsina deberían acabar todos e n el e x t r e m o C O O H p o r arg o lys, e x c e p t o
el correspondiente al e x t r e m o final C O O H de la proteína. Por tanto, e l péptido
N H , - s e r - l e u - t r p - v a l - s e r - l e u - C O O H corresponde al e x t r e m o C O O H de la proteína y a
q u e termina p o r leu. D e igual f o r m a , los péptidos obtenidos c o n q u i m o t r i p s i n a debe-
 Código genético y síntesis de proteínas 111

rían t e r m i n a r p o r p h e , tyr o t r p , e x c e p t o el d e l e x t r e m o C O O H de la proteína; p o r c o n -

siguiente, el péptido N H , - v a l - s e r - l e u - C O O H es el correspondiente al e x t r e m o C O O H
ya que t e r m i n a p o r leu. Además, este péptido coincide e n su secuencia c o n la parte f i -
nal del o b t e n i d o c o n tripsina. A partir de este m o m e n t o , p o d e m o s reconstruir la
proteína desde el e x t r e m o C O O H hacia el e x t r e m o N H , , s i m p l e m e n t e b u s c a n d o se-
cuencias de aminoácidos que solapen entre los péptidos obtenidos c o n tripsina y c o n
q u i m o t r i p s i n a . El siguiente esquema presenta los péptidos c o n el e x t r e m o N H , a la iz-
quierda y el C O O H a la derecha:

Péptidos obtenidos con tripsina

-met-leu-val-asf)-phe-glu-arg- / -ser-gly-thr-tyr-ala-gln-asn-lys- / -ile-val-phe-pro-arg-
/ -ser-leu-trp-val-ser-leu-

-met-leu-val-asp-phe- / -glu-arg-ser-gly-thr-tyr- / -ala-gln-asn-lys-ile-val-phe-

/ -pro-arg-ser-leu-trp- / -val-ser-leu-
Péptidos obtenidos con quimotripsina

Por tanto, la secuencia de la proteína sería:

NH.-met-leu-val-asp-phe-glu-arg-ser-gly-thr-tyr-ala-gln-asn-lys-ile-val-
phe-pro-arg-ser-leu-trp-val-ser-leu-COOH

CÓDIGO GENÉTICO

Segunda base

U C A G

p UUU phe UCU ser UAU tyr UGU cys U T

r UUC phe UCC ser UAC tyr UGG cys C 1
U
r UUA leu UCA ser UAAFIN UGA FIN A e
UUG leu UGG ser UAG FIN UGG trp G
i r
m CUU leu CCU pro CAU his GGU arg U c
c CUC leu CCG pro CAG his CGC arg c
e CUA leu CCA pro CAA gln CGA arg A e
r GUG leu CCG pro CAG gln CGG arg G r
a AUU ile ACU thr AAU asn AGU ser U a
A AUC ile ACC thr AAC asn AGC ser c
AUA ile ACA thr AAA lys AGA arg A
B AUG met ' ACG thr AAG lys AGG arg G B
a a
GUU val GGU ala GAU asp GGU gly U
s G GUC val GCC ala GAC asp GGG gly c s
GUA val GCA ala GAA glu GGA gly A
e GUG val GCG ala GAG glu GGG gly G e
112 360 Problemas de Genética

b) Los codones q u e c o r r e s p o n d e n a cada u n o de los aminoácidos d e l péptido sintetizado

" i n v i t r o " se o b t i e n e n s i m p l e m e n t e c o m p a r a n d o la secuencia d e l mensajero sintético y
del péptido y r e c o r d a n d o que el A R N comienza a traducirse p o r el e x t r e m o 5' q u e se
corresponde c o n el e x t r e m o N H 2 d e l péptido y termina de traducirse p o r el e x t r e m o 3'
q u e se corresponde c o n el e x t r e m o C O O H d e l péptido. En el siguiente esquema se i n -
dica el triplete que le corresponde a cada aminoácido:

5' GAU - UUU - GAA - AGA - UCU - G G G - ACA 3'

NH, - a.sp - phe - glu - arg - ser - gly - thr - COOH

El péptido sintetizado " i n v i t r o " corresponde a la parte de la secuencia de la proteína

q u e se ha subrayado y resaltado en el siguiente esquema:

NH.-met-leu-val-asp-phe-glu-arg-ser-glv-thr-tvr-ala-gln-asn-lvs-ile-val-
phe-pro-arg-ser-leu-trp-val-ser-leu-COOH

d) El péptido sintetizado " i n v i t r o " solapa c o n dos péptidos de los o b t e n i d o s c o n tripsina:

- m e t - l e u - v a l - a s p - p h e - g l u - a r g - y - s e r - g l y - t h r - t y r - a l a - g l n - a s n - l y s - . T a m b i é n solapa
con dos de los péptidos p r o d u c i d o s p o r q u i m o t r i p s i n a : - m e t - l e u - v a l - a s p - p h e - y
-glu-arg-ser-gly-thr-tyr-.

[Véanse problemas 21.10 y 21.11 del capítulo de genética humana.]