PB-MP-24-2 (1) - 060054

Manuales de Prácticas de Ciencias de la Salud
Identificación del Manual de Prácticas

Nombre de la Asignatura Procesos biológicos
Clave TCS001
Cuatrimestre Primero
Total sesiones en laboratorio 5
Carrera Materia de Tronco Común para las licenciaturas
de Enfermería, Fisioterapia y Nutrición
Número de horas de cada sesión 2
Versión de manual 2022
Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 1 | 36

PRÁCT ICA 1
MICROSCOPÍA CELULAR
LABORATORIO: MULTIFUNCIONAL
CONT ENIDO
1.1. Niveles de organización

1.2. Teoría celular
1.3. Organización estructural de la célula
1.3.1. Célula procariota
1.3.2. Célula eucariota
OBJET IVO DE APRENDIZAJE
Reconocer las estructuras básicas que existen en las células de tal forma que puedan
distinguir entre una célula eucariota y procariota, a través del uso correcto del
microscopio óptico, desarrollando algunas técnicas básicas de preparación de
muestras para observación microscópica.
EQUIPO NECESARIO
Cada equipo requiere:
- 1 microscopio
MAT ERIALES PARA LA PRÁCT ICA

- 6 portaobjetos
- 6 cubreobjetos
- 1 hisopo
- 1 mechero bunsen con manguera
- 1 bisturí o navaja
- 1 gotero
- 1 frasco gotero con solución de azul de metileno
- 5 ml de Etanol-éter para limpieza de objetivos
- Pinza de disección
- Puente de tinción
- Papel seda para limpieza de objetivos
- Aceite de inmersión
- Kit para tinción de Gram (cristal violeta, lugol, alcohol-cetona, safranina)

Material provisto por el alumno
- 20 ml de agua estancada
- 1 yakult o yogurt natural
- 1 cebolla
- Encendedor
- Marcador indeleble punto fino
PROCEDIMIENT O DE LA PRÁCT ICA
El profesor:
➢ Iniciará la preparación y montaje de la clase y expondrá los objetivos de la

clase.
➢ Dara una introducción de la microscopía, con la definición de conceptos
generales.
➢ El profesor explicará las partes y función del microscopio.
➢ El profesor explicará los cuidados que deben tenerse durante el manejo del
microscopio.
➢ Con base en el esquema, cada alumno procederá a identificar cada una de las
partes del microscopio señaladas con las líneas.
➢ El profesor realizará de manera demostrativa la elaboración de un frotis así
como la tinción del mismo.
➢ Durante el desarrollo de la práctica el docente será un facilitador del
conocimiento, realizará retroalimentación con los alumnos e incentivará el
cuestionamiento por parte de ellos.
➢ MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO
Para manejar el microscopio de una manera correcta debe seguir ciertas

recomendaciones:
1. Antes de empezar a trabajar verifique que el objetivo a utilizar sea el de menor

aumento y la platina completamente abajo.
2. Conecte el microscopio y enciéndalo.
3. Coloque la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas y
ubique la muestra en el haz de luz que sale a través de la platina.
4. Subir la platina, con la ayuda del tornillo macrométrico, hasta que la muestra
esté lo más cerca del lente objetivo. Esto debe hacerse mirando directamente
y no a través del ocular.
5. Regule la apertura de los lentes oculares según la apertura de sus ojos, para
su mayor comodidad.
6. Mirando a través de los oculares regule la cantidad de luz y defina la imagen
con la ayuda del tornillo micrométrico. La imagen debe quedar nítida.

7. Gire el revolver para seguir pasando a los otros lentes. No necesita bajar la
platina en ningún momento si es que consiguió un buen enfoque al inicio. Si al
cambiar de objetivo se perdió por completo la imagen, es preferible volver a
enfocar con el objetivo anterior.
8. Una vez finalizada la observación se baja la platina y se coloca el objetivo de
menor aumento girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la
preparación de la platina.
9. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en
posición de observación.
10. Cubrir el microscopio.
a. ENFOQUE CON EL OBJETIVO DE INMERSIÓN
Nota: Antes de poner el aceite debe haberse enfocado en un lente de menor

aumento.
1. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino.

2. Colocar una gota mínima de aceite de inmersión sobre la muestra enfocada.
Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación ya no se
puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de
aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo se debería regresar al de menor
aumento.
3. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de
inmersión.
4. Enfocar cuidadosamente con el tornillo micrométrico.
5. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se limpia
el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial.
b. RECOMENDACIONES GENERALES
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en

posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no
sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con
su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy
suavemente con un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el
microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que
queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica, pasando el papel por
la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y
pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona
(7:3) o xilol sin embargo no debe de abusarse de este tipo de limpieza, porque
si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su
sujeción.

6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico,

micrométrico, platina, revolver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada
a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar
nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está
observando a través del ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella
algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un
paño humedecido en xilol.
9. Cuando traslade el microscopio hágalo siempre con las dos manos. Tome
el brazo con una mano y coloque la otra debajo de la base para sostenerlo.
Manténgalo en posición vertical.
10. Colóquelo sobre una superficie plana y sólida, por lo menos a 10 cm del borde
de la mesa.
11. Antes de comenzar a usarlo revise el estado del microscopio (De acuerdo a las
instrucciones del profesor).
Con base en el siguiente esquema, cada alumno procederá a identificar

las diferentes partes del microscopio señaladas con las flechas:

➢ Parte 1
Con la preparación de agua estancada
a) Verificar que el portaobjetos esté limpio.

b) Agitar el recipiente que contiene la muestra de agua estancada.
c) Con la ayuda de un gotero depositar una gota de agua estancada sobre un
portaobjetos y colocar sobre esta un cubreobjetos.
d) Realizar la observación siguiendo los pasos descritos utilizando los objetivos
de 10 y 40 X.
e) Realizar un dibujo de lo observado en el microscopio.
Parte 2
a) Con la ayuda de un hisopo realizar un raspado suave en la parte interna de la

mejilla de algún compañero.
b) Colocar la muestra proveniente del raspado sobre un portaobjetos limpio.
c) Colocar sobre la muestra una gota de azul de metileno y colocar el cubreobjetos
evitando la formación de burbujas de aire.
d) Realizar la observación de la preparación siguiendo los pasos descritos en la parte
1 utilizando los objetivos de 10 y 40X.
e) Realizar un dibujo de lo observado en el microscopio.

➢ Parte 3
Célula procariota
a) Verificar que el portaobjetos esté limpio.

b) Marcar en el extremo izquierdo del portaobjeto, para saber con qué muestra está
trabajando.
c) Con la ayuda de un gotero colocar una gota del cultivo bacteriano (yakult o
yogurt) en el centro del portaobjetos y distribuirlo de tal manera que se forme una
película delgada (frotis).
d) Dejar secar al aire el frotis realizado en el punto anterior.
e) Encender el mechero.
f) Pasar el portaobjetos entre 4 y 6 veces por la llama para fijar las células al vidrio
sujetándolo con una pinza de disección.
g) Dejar enfriar el frotis y cubrir completamente con cristal violeta y dejar actuar el
colorante durante un 1 min.
h) Transcurrido el tiempo eliminar el exceso de colorante enjuagando la preparación
con agua de la llave.
i) Cubrir el frotis con lugol y dejar actuar durante 1 min.
j) Transcurrido el tiempo eliminar el exceso enjuagando la preparación con agua de
la llave.
k) Decolorar el frotis adicionando alcohol-acetona de 15 segundos
aproximadamente.
l) Transcurrido el tiempo enjuagar la preparación con agua de la llave.
m) Cubrir completamente el frotis con safranina y dejar actuar durante 1 min.
n) Transcurrido el tiempo eliminar el exceso de colorante enjuagando la preparación
con agua de la llave.
o) Dejar secar al aire el frotis.
p) Una vez seco el frotis colocar sobre él un cubreobjetos.
q) Enfocar el frotis con el objetivo de 10X, una vez que se ha enfocado adicionar
sobre el cubreobjetos una gota de aceite de inmersión y cambiar el objetivo por el
de 100X, siguiendo los pasos descritos en la parte 1.
r) Realizar los dibujos correspondientes de lo que se observa en el microscopio.

➢ Parte 4
Célula eucariota
a) Separar una de las capas internas de la cebolla (epidermis), desprendiendo la

membrana adherida por la cara inferior cóncava de una de sus capas.
b) En un portaobjetos colocar una gota de agua destilada.

c) Colocar la epidermis sobre la gota de agua colocada previamente para evitar
que se enrosque.
d) Eliminar el exceso de agua y cubrir la epidermis con azul de metileno.
e) Dejar actuar el colorante durante 2 min.
f) Transcurrido el tiempo retirar el exceso del colorante y enjuagar con agua de la
llave.
g) Colocar sobre la epidermis una gota de agua, colocar el cubreobjetos sobre la
muestra y ubicar la preparación al menor aumento (10x)
h) Observar al microscopio cambiando a 40 y 100x, dibuja lo observado
(citoplasma, núcleo, pared) siguiendo los pasos descritos en la parte 1.
i) Realizar los dibujos correspondientes de lo que se observa en el microscopio.

➢ Al finalizar la práctica resolver el cuestionario e incluirlo en el reporte:
1. ¿Cuáles son las características de un Microscopio óptico, M. simple, M.

compuesto, M. de fluorescencia, M. de barrido?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
2. ¿Cuál es el intervalo de tamaño de las bacterias y en qué unidades se miden?
____________________________________________________________
3. ¿Cuál es el tamaño mínimo de especímenes que pueden observarse con un
microscopio óptico y cuál para un microscopio electrónico?
____________________________________________________________
4. ¿Cómo se define el poder de resolución de un microscopio?
____________________________________________________________
5.- ¿Qué material utilizó Robert Hooke y que fue lo que observó en el
microscopio simple?
____________________________________________________________
6.- ¿Cuáles son los dos microscopios electrónicos básicos?

____________________________________________________________
7.- ¿Qué se le atribuye a Antón Van Leeuwenhoek con respecto a sus

observaciones?
_____________________________________________________________
8- Defina los conceptos: unicelular, pluricelular y multicelular.
_____________________________________________________________
_____________________________________________________________
9.- ¿Qué función tiene el citoplasma, vacuola, pared y membrana celular,
núcleo,
cloroplasto?_____________________________________________________
_______________________________________________________________

10.- Realice un cuadro comparativo entre una célula procariota y una eucariota.

Anexo I
Las partes de un microscopio compuesto son:
a) Sistema mecánico:
- BASE: Soporta todo el peso del aparato, asegurando la estabilidad del mismo.
- BRAZO: Este elemento relaciona el cabezal del microscopio con el pie y
sostiene la platina y el condensador. De esta parte se sostiene el microscopio
cuando se lo traslada de un lugar a otro.
- CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular o
binocular.
- REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar,
cambiar los objetivos.
- PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación se halla sujeta al brazo y
posee además una abertura para el paso de luz. Las platinas tienen dos pinzas
sujetadoras, dos tornillos que permiten desplazar las placas y unas “reglillas”
llamadas Escalas de Vernier, que sirven para tomar las coordenadas sobre la
localización de células o estructuras de interés.
- TORNILLOS DE ENFOQUE: son dos, macrométrico que permite acercar la
muestra hacia el lente objetivo y micrométrico, de mayor precisión que es el
que define la imagen.
b) Sistema óptico:
- OCULAR: Lente que se encuentra próximo al ojo, amplifica la imagen

producida por el objetivo y su aumento es de 10X.
- OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación su función es ampliar la
imagen. En un microscopio están insertados en una pieza llamada revolver en
un número de 4 generalmente. Los lentes objetivos más comunes son los de
5X, 10X, 40X y 100X. El lente de 100X se usa únicamente con aceite de
inmersión por lo que es llamado lente de inmersión y los demás se llaman lentes
en seco. La amplificación total o magnificación total resulta de la acción
combinada del ocular y objetivo, se calcula multiplicando estos dos valores. Ej.:
ocular 10X, objetivo 10X, amplificación total 100X. A medida que el poder de
amplificación o la magnificación del microscopio aumentan, el espacio
observado bajo el campo óptico disminuye. Lo más importante de un
microscopio no es el aumento en sí mismo, sino el poder separador también
llamado a veces poder de resolución. El poder de resolución es una cualidad
del microscopio, y se define como la capacidad de distinguir como imágenes
distintas dos cercanas. El ojo normal no puede ver separados dos puntos
cuando su distancia es menor a una décima de milímetro.
c) Sistema de iluminación:
- CONDENSADOR: contiene varias lentes que concentran la luz en el objeto a

estudiarse.
- DIAFRAGMA: Esta junto al condensador y regula la cantidad de luz que entra

en el condensador.
- FOCO o FUENTE DE LUZ: Dirige los rayos luminosos hacia el condensador,
usualmente posee también un regulador de intensidad.
La unidad básica de longitud que se utiliza con el microscopio de luz es el micrómetro

o micra (µm).
1 mm = 1000 µm
1 µm = 1000 nm (nanómetro)
1µm = 10,000A° (Angstroms)
Anexo II
I. Células epiteliales de la boca
Célula epitelial de la boca sin teñir Célula epitelial de la boca teñida con azul de metileno
Imagen tomada de inakiresa.wordpress.com/2007/11/ Imagen b tomada de www.papquick.com/es_galeria.html
II. Ejemplos de protozoarios que pueden observarse en agua estancada.
Vorticella Diatomeas Paramecio
Imagen tomada de http://plantphys.info/organismal/lechtml/images/vorticella.jpg

III. Ejemplos de formas y agrupaciones bacterianas que pueden

observarse al microscopio
Imagen tomada de http://www.dialogica.com.ar/medline/2007/09/la-era-de-las-bacterias.html
IV. Células epiteliales de cebolla teñidas con azul de metileno
Núcleo
Membrana celular
Citoplasma
Imagen tomada de https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2014/11/02/practica -2/
Vacuola
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
• Lehninger. Principios de bioquímica Nelson, David L.; Cox, Michael M. Omega

2015.
• Bioquímica. Las bases moleculares de la vida McKee, Trudy; McKee, James
R. McGraw-Hill 2014
• Lewin. Células Cassimeris, Lynne; Lingappa, Vishwanath R.; Plopper George
McGraw-Hill 2012

PRÁCT ICA 2
ELEMENT OS QUE CONST IT UYEN A

LAS CÉLULAS DE LOS SERES VIVOS
LABORAT ORIO: EST RUCT URA Y
FUNCIÓN
CONT ENIDO
2. Elementos que constituyen a las

células y a los seres vivos
2.1. Membrana plasmática
2.1.1. Estructura
2.1.2. Funciones de las proteínas membranales
2.1.3. Tipos de transporte transmembranal y control de electrolitos.
2.1.4. Propiedades eléctricas de la célula excitable
2.2. Núcleo
2.3. Citoplasma
2.4. Mitocondria
2.5. Retículo endoplásmico y ribosomas
2.6. Aparato de Golgi
2.7. Citoesqueleto
2.7.1. Estructura y funciones
2.7.2. Especialización en células musculares
2.8. Vacuola y lisosomas
2.9. Matriz extracelular
• Reconocer las características específicas y la función de cada uno de los

elementos que constituyen a una célula eucariota.
EQUIPO NECESARIO
Por cada equipo se contará con:
- 1 Ipad con acceso a internet.
MAT ERIALES PROVIST O POR EL ALUMNO
- Esenciales para la construcción de una maqueta de célula eucariota.

- Se sugieren materiales como:
- Papel de colores. -Plastilina.
- Botones. -Post it de colores.

- Lápices y plumines de colores. -Palillos de madera.

- Tela. -Unicel.
- Globos. -Pegamento.
- Confeti. -Panel de madera y/o cartoncillo.
El profesor:

clase.
➢ Dará una introducción de 10 min donde expondrá los elementos que conforman
a una célula eucariota y su importancia de estudio.
Parte 1. Representación celular.
➢ En cada uno de las mesas, por equipo, los estudiantes tendrán 40 minutos para
realizar una maqueta, esquema o representación gráfica de una célula
eucariota, que sea de alta calidad, dinámica y explicativa por sí sola a escala
amplificada.
➢ Podrán ocupar todos los elementos como requieran y hayan llevado al
laboratorio y la montarán en su panel de madera o cartoncillo correspondiente.
➢ El objetivo es el trabajo en equipo y que el producto final sea de utilidad para
estudio en conjunto de manera posterior.
➢

Parte 2. Investigación activa de funciones.

➢ Después de haber concluido con la elaboración gráfica de su maqueta los
alumnos contarán con 20 minutos para que en su Ipad o teléfono celular
busquen las funciones específicas de cada elemento celular.
➢ La organización de cada research estará a cargo del monitor del equipo.
ORGANELO CELULAR FUNCIÓN

Parte 3. Exposición grupal.

➢ Una vez finalizado el tiempo de los 20 min, el profesor sorteará de forma
aleatoria cada uno de los elementos a exponer sobre la célula a cada equipo.
➢ Uno o todos los integrantes del equipo tendrán alrededor de 2 minutos para la
explicación de la estructura que les tocó en el sorteo.
El resguardo y conservación de la maqueta de cada equipo estará a cargo de

los integrantes del mismo.

2015.
R. McGraw-Hill 2014
McGraw-Hill 2012

PRÁCT ICA 3 M ET ABOLISM O
LABORAT ORIO M ULT IFUNCIONAL
CONT ENIDO
3. Metabolismo celular
Enzimas y energía
Rutas metabólicas
Respiración celular
Fermentación
• Detectar la producción de CO 2 en la fermentación alcohólica de la levadura, la

presencia de piruvato y acetaldehído durante la fermentación de la glucosa por las
levaduras evaluando el efecto que tienen la temperatura y el pH sobre la actividad
enzimática de la
α-amilasa
EQUIPO NECESARIO
- Balanza
M AT ERIALES PARA LA PRÁCT ICA
- Baño de agua
- 30 mL de agua a 37°C
- 3 Generadores de gases (dispositivos para fermentación). Figura 1
- 20 cm de Papel paraﬁlm
- 3 Tubos de ensayo de 13 x 100 mm cada uno con 2 mL del colorante rojo de fenol
- 20 Tubos de ensayo de 16 x 150 mm limpios y secos
- Gradilla para tubos de 16 X 150mm
- 5 Pipetas serológicas de 10 mL
- 1 Vaso de precipitados de 100 mL
- 1 Vaso de precipitados de 50 mL
- 1 Probeta de 50 o 100mL
- 12 Pipetas Pasteur con bulbo o goteros
- 2 Aplicadores de madera
- 15 mL de una solución de glucosa al 1%
- 50 mL de solución de almidón al 1%
- 5 mL de una solución reguladora de pH 4

Material provisto por los alumnos:
- 5 g de levadura comercial
- Marcador indeleble
- 1 Acetato o protector de hojas
PROCEDIM IENT O DE LA PRÁCT ICA
El profesor:
➢ Iniciará la preparación y montaje de la clase y expondrá los objetivos de la clase.

➢ Dara una introducción breve del metabolismo celular.
➢ El profesor mostrara y explicara la función de cada una de las partes que conforman
al generador.
➢ El profesor realizará de manera demostrativa el montaje de un generador.
Parte 1. Detección de CO 2 durante la fermentación alcohólica de la levadura.
a) Pesar 5g de levadura y disolverla en 25 mL de agua tibia (37°C).

b) Revisar que los generadores de gases se encuentran limpios y secos.
c) Marcar los generadores como 1, 2 y 3 a los cuales se les adicionaran distintas
soluciones de acuerdo con el siguiente protocolo.
Generador mL de la solución * mL de la solución de mL de

glucosa levadura agua
1 10 10 -----
2 ----- 10 10
3 10 ----- 10
• Nota: Las levaduras se encuentran suspendidas en agua, por lo cual los 10

mL son de levadura en agua tibia.
d) Cubrir con parafilm cada uno de los generadores de gases para evitar que haya fugas.
e) Verificar que no existan fugas en los generadores de gases.
f) Colocar la punta de la tubería en un tubo de ensayo el cual contiene 2 mL de una
solución de rojo de fenol al 1% como se muestra en la figura 1.
g) Dejar reposar por un periodo de tiempo de 45 a 60 min.
h) Observe lo que sucede y explique porque el colorante cambia de color.
i) Realice el dibujo correspondiente en cada una de las partes.
Figura 1. Dispositivo para realizar la fermentación.

➢ Parte 2. Influencia de la temperatura sobre la actividad enzimática de α-amilasa.
a) Colectar 2 mL aproximadamente de saliva en un vaso de precipitados de 50mL

b) Adicionar al vaso de precipitados que contiene la saliva 25 ml de agua destilada.
c) Mezclar perfectamente, una vez diluida deberá ser utilizada lo más pronto posible.
d) Marcar 3 tubos de ensaye de 16 x 150 mm con 2°C, 37°C, 93°C (para la solución de
almidón).
e) Adicionar 3 mL de una solución de almidón al 1% a cada uno de los tubos marcados
en el punto anterior.
f) Marcar 3 tubos de ensaye de 16 x 150 mm con 2°C, 37°C, 93°C (para la saliva diluida).
g) Adicionar 3 mL de la saliva diluida preparada en el punto b)
h) Incubar cada uno de los tubos a las temperaturas correspondientes (2°C, 37°C, 93°C)
durante 5 min.
i) Transcurrido el tiempo de incubación, vaciar el contenido de los tubos de saliva diluida
a los tubos de almidón de la temperatura correspondiente.
• Nota: verificar que los tubos que se van a mezclar correspondan a la misma
temperatura.
j) Los tubos resultantes del paso anterior deberán permanecer en cada una de las
temperaturas señaladas durante todo el procedimiento.
k) Una vez realizada la mezcla almidón-saliva tomar inmediatamente con ayuda de una
pipeta Pasteur con bulbo o un gotero, una muestra de cada uno de los tubos incubados
a las temperaturas de 2°C, 37°C, 93°C; colocar 2 gotas sobre la planilla cubierta con
un acetato o protector de hojas correspondiente a temperatura (figura 2), adicionar 2
gotas de lugol y mezclar con ayuda de un aplicador de madera.
• Nota: tener la precaución utilizar una pipeta Pasteur o gotero para cada una
de las temperaturas que se van a probar.
l) 0bservar y anotar la coloración de la mezcla en cada una de las diferentes

temperaturas.
• Reacción positiva (+): Color AMBAR. Reacción negativa (-): Color AZUL.
m) Repetir los pasos descritos en el punto i) a los 0, 10 y 20 después de haber realizado

la mezcla almidón-saliva.
n) Con los datos obtenidos completar el siguiente cuadro.
Temperatura °C Tiempo (min)

0 10 20
2
37
93

➢ Parte 3. Influencia de pH sobre la actividad enzimática de la α-amilasa.
a) Marcar 3 tubos de ensaye de 16 x 150 mm con pH 4,7 y 10.

b) Adicionar a los tubos marcados 3 mL de cada una de las soluciones a los diferentes
valores de pH a probar.
c) Adicionar a cada uno los tubos del paso anterior 3 ml de la solución de saliva diluida
preparada en el punto b) de la parte 5.
d) Incubar los tubos a 37°C, durante 5 minutos.
e) Marcar 3 tubos de ensaye de 16 x 150 mm con pH 4, 7 y 10.
f ) Adicionar a cada uno de los tubos del paso anterior 3 mL de una solución del almidón
al 1%
g) Incubar los tubos a 37°C durante 5 minutos.
h) Transcurrido el tiempo de incubación, vaciar el contenido de los tubos del paso b) a
los tubos de almidón del pH correspondiente.
Nota: verificar que los tubos que se van a mezclar correspondan al valor de pH.
i) Los tubos resultantes del paso anterior deberán permanecer durante todo el
procedimiento a 37°C
j) Una vez realizada la mezcla almidón-saliva tomar inmediatamente con ayuda de una
pipeta Pasteur con bulbo una muestra de cada uno de los tubos correspondiente a los
diferentes valores de pH de 4, 7 y 10; colocar 2 gotas, sobre la planilla cubierta con un
acetato o protector de hojas correspondiente a pH (figura 3) adicionar 2 gotas de lugol
y mezclar con ayuda de un aplicador de madera.
• Nota: tener la precaución utilizar una pipeta Pasteur para cada una de las
temperaturas que se van a probar.
k) 0bservar y anotar la coloración de la mezcla en cada una de las diferentes

temperaturas.
• Reacción positiva (+): Color AMBAR. Reacción negativa (-): Color AZUL.
l) Repetir los pasos descritos en el punto j) a los 0, 10 y 20 después de haber realizado

la mezcla almidón-saliva.
m) Con los datos obtenidos completar el siguiente cuadro
PH Tiempo (min)
0 10 20
4
7
10

➢ Al finalizar la práctica resolver el siguiente cuestionario e incluirlo en el reporte

1. Defina los siguientes términos: metabolismo, respiración, fermentación y ruta
metabólica.
____________________________________________________________
____________________________________________________________
2. Escriba la ecuación que describa la determinación de CO 2 con el rojo de
fenol
____________________________________________________________
____________________________________________________________
3. ¿Cuáles son los diferentes tipos de fermentación que se pueden presentar
como parte del metabolismo microbiano?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
4. ¿Qué es el rojo de fenol?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
5. ¿En cuáles etapas del proceso de fermentación se genera CO 2?

____________________________________________________________
____________________________________________________________
6. ¿Cuál es la reacción que cataliza la α-amilasa y cual la β-amilasa?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
7. ¿Cuál es la estructura del almidón?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
8. ¿Cuáles son las características esenciales de una enzima?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
9. ¿Por qué la actividad enzimática varía con la temperatura y el pH?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
10. ¿Qué se entiende por desnaturalización de una proteína?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________

Figura 2. Plantilla para realizar la prueba colorida del procedimiento de temperatura.

Temperatura Tiempo (minutos)
°C 0 10 20
37
93
Figura 3. Plantilla para realizar la prueba colorida del procedimiento de pH.

Tiempo (minutos)
pH
0 10 20
10
• Fortoul, Teresa. (2013). Histología y biología celular. McGraw-Hill.
• Baynes, John W; Dominiczak, Marek H.. (2015). Bioquímica médica. Elsevier.
• Herrera, Emilio; Ramos, María Del Pilar, et. al.. (2014). Bioquímica básica. Elsevier.

PRÁCT ICA 4
CICLO CELULAR
LABORAT ORIO MULT IFUNCIONAL
CONT ENIDO
1. Crecimiento y división celular

1.1. Etapas del ciclo celular
1.2. División celular
1.2.1. Mitosis
1.2.2. Meiosis
1.3. Crecimiento celular
1.4. Control del ciclo celular
1.5. Diferenciación y especialización celular
1.6. Envejecimiento y muerte celular
• Identificar las diferentes fases de la mitosis en células meristemáticas a través

de una tinción histológica visualizando los cromosomas aplicando los principios
de extracción físico-química de ácidos nucleicos.
EQUIPO NECESARIO
- Balanza
- 1 microscopio óptico
- 1 vasos de precipitado de 250 ml

- 1 matraz Erlenmeyer de 250 ml
- 1 vaso de precipitado de 100 mL
- 1 varilla de vidrio
- 1 gradilla
- 1 embudo de vidrio
- 1 probeta de 50 o 100mL
- 2 pipetas serológicas de 5 mL
- 2 matraces de 50 mL
- 2 portaobjetos
- 2 cubreobjetos
- 1 pinza de disección
- 1 tubo de ensayo de 13x100mm
- 1 navaja de disección
- 1 vidrio de reloj
- 5 ml de detergente líquido alcalino.
- 150 ml de agua destilada
- Agua destilada en gotero
- 20 ml de etanol absoluto frio (a 4°C).
- Frasco gotero con cristal violeta
- 5 ml de detergente líquido alcalino
- 1.5 g de sal
- Ácido clorhídrico 1N (HCl 1N)
Material provisto por el alumno
- 5 fresas.
- 1 cebolla grande o 1 ajo con ápice de crecimiento.
- 1 bolsa tipo “ziploc.”
- 1 filtro para café o colador de malla cerrada.
- 1 cartoncillo negro (10X10 cm).
El profesor:

clase.
➢ Dara una introducción breve de las propiedades fisicoquímicas del ADN y las
fases del crecimiento celular en 15 minutos.
➢ El profesor realizará de manera demostrativa cada paso de la metodología.
cuestionamiento por parte de ellos.
➢ Parte 1. Extracción de ADN.
• Preparación de la solución lisante.
a) Adicionar con ayuda de una probeta 120 mL de agua destilada a un vaso de

precipitados de 250 mL.
b) Pesar 1.5 g de sal en una balanza y adicionarlos a los 120 mL de agua destilada
contenida en el vaso de precipitados.
c) Medir con ayuda de una pipeta serológica 5 mL de detergente y adicionarlos a
los 120 mL de agua destilada contenida en el vaso de precipitados.

d) Mezclar los reactivos adicionados en el paso anterior y mantener la “solución

de lisis” en frío hasta su uso.
• Extracción de ADN a partir de fresas.
e) Depositar las 5 fresas en una bolsa tipo ziploc.

f) Macerar hasta que se forme una pasta homogénea (3 minutos
aproximadamente).
g) Tomar la “solución de lisis”y añadir a la bolsa donde están las fresas molidas.
h) Agitar vigorosamente la bolsa durante 2 minutos y dejar reposar otros 2
minutos.
i) Transcurrido el tiempo clarificar la suspensión obtenida en el paso anterior
eliminando los restos vegetales más grandes, haciendo pasar la suspensión a
través del filtro para cafetera o colador y colectar la suspensión clarificada en
un matraz de 250 ml.
j) Posteriormente adicionar 20 mL de etanol absoluto frío; teniendo la precaución
de adicionarlo por las paredes del matraz.
k) Dejar reposar 5 minutos.
l) Introducir la punta de la varilla de vidrio, justo debajo de la separación entre el
alcohol y el lisado.
m) Remover la varilla hacía delante y atrás, poco a poco se irán enrollando los
fragmentos de mayor tamaño de ADN (1 minuto aproximadamente).
n) Transcurrido el tiempo retirar la varilla atravesando la capa de alcohol y así
quedará adherido el ADN a su extremo teniendo este un aspecto de un copo
de algodón mojado.
o) Retirar el ADN de la varilla de vidrio y colocarlo sobre el papel negro.
p) Tomar una fotografía del ADN extraído e incluirla en el reporte.
➢ Parte 2. Observación de las fases de la mitosis.
Una o dos semanas antes de realizar la práctica, en un vaso con agua se

colocará una cebolla grande, orientando la parte de crecimiento del ápice de la
misma para que este en contacto con el agua durante para así obtener raíces en
constante crecimiento. Cambiar el agua del frasco cada 24 horas.
Ápice

Meristemos
a) Llevar al laboratorio la cebolla en agua para realizar la práctica, teniendo la

precaución de que los meristemos no se deshidraten.
b) Sacar la cebolla del agua.
c) Con ayuda de las pinzas y la navaja, cortar los meristemos de la raíz de la cebolla
(1.0 cm).
d) Colocar 4 cortes en un tubo de ensayo y cubrir con HCl 1N. Dejar en contacto 12
minutos a temperatura ambiente.
e) Transcurrido el tiempo, colocar los cortes en el portaobjetos y enjuagar con agua
destilada 2 o 3 veces.
f) Cubrir los cortes con 2 ml de cristal violeta y dejar en contacto durante 3 minutos.
g) Enjuagar con agua destilada, cortar 3mm de los meristemos y desechar el resto,
enseguida colocar un cubre objetos sobre ellos.
h) Con el papel secante eliminar el exceso de colorante de las orillas. Presionar
suavemente el cubreobjetos con la ayuda de la goma del lápiz, teniendo la
precaución de no romper los cortes. (NO GIRAR EL CUBREOBJETOS).
i) Observar al microscopio iniciando con el objetivo 10x hasta el 100x (de inmersión),
siguiendo la metodología descrita en la práctica No. 1
j) Realizar los dibujos correspondientes de lo que se observa en el microscopio.
k) Identificar las fases de la mitosis y hacer un dibujo representativo de lo observado

➢ Al finalizar la práctica resolver el siguiente cuestionario e incluirlo en el

reporte
1. Explique las propiedades fisicoquímicas que posee el ADN.

____________________________________________________________
____________________________________________________________
2. Explique la función que tiene la sal y el detergente durante la extracción del
ADN.________________________________________________________
____________________________________________________________
3. ¿Por qué el ADN precipita al adicionar etanol absoluto frío?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
4. ¿Qué es la lisis celular?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
5. ¿Cuál es la función del ADN y en que estructura celular se encuentra?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
6. Defina los siguientes términos: meiosis, mitosis, y cromosoma.
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
7. Compare las semejanzas y diferencias entre las fases de la mitosis y la
meiosis.
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
8. ¿En qué parte de nuestro cuerpo se producen la mitosis y la meiosis?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
9. ¿Cuál es el número de pares de cromosomas en humanos cuantos pares
son somáticos y cuantos sexuales?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
10. En que fases de la mitosis se encuentran las células del siguiente esquema.

• Anexo I
Imagen tomada de Ducolomb, D., Fierro, R., Gonzalez, C. (2012). Manual de prácticas de Laboratorio de
Biología Celular. México: UAM-Iztapalapa.

2015.
R. McGraw-Hill 2014
McGraw-Hill 2012

PRÁCT ICA 5
MECANISMO DE T RANSPORT E
CELULAR
LABORAT ORIO MULT IFUNCIONAL
CONT ENIDO
5. Comunicación celular
5.1. Intracelular
5.1.1. Tipos de receptores celulares
5.1.2. Segundos mensajeros
5.2. Intercelular
5.2.1. Señalización por contacto
5.2.2. Receptores GAP
5.2.3. Mensajeros celulares
5.2.4. Neurotransmisores
5.2.5. Hormonas
• Diferenciar los fenómenos de difusión, ósmosis, turgencia, plasmólisis y

transporte activo, observando el comportamiento de las células vegetales y
animales frente medios acuosas con diferente concentración de soluto
evidenciando de forma práctica la permeabilidad de la membrana.
EQUIPO NECESARIO
- 1 microscopio óptico
- 1 balanza
- 8 Portaobjetos
- 8 Cubreobjetos
- 1 Navaja o bisturí
- 5 Aplicadores de madera y/o palillos
- 1 Tripié y rejilla de asbesto o parrilla de calentamiento
- Mechero bunsen con manguera
- 2 Matraces Erlenmeyer de 250 mL
- 1 pipeta graduada de 10 mL

- 1 Probeta de 25 o 50 mL
- 3 goteros
- 2 ml de una solución de cloruro de sodio (NaCl) a una concentración del 3%.
- 2 ml de una solución de NaCl a una concentración del 0.9%
- 2 mL de una solución de NaCl a una concentración del 0.15%
- 75 mL de una solución de carbonato de sodio(Na2CO3) a una concentración del
0.75%
- 75 mL de una solución de rojo neutro a una concentración del 0.02%
- Torundas de algodón impregnadas con alcohol al 70%
- Masking tape
Material provisto por el alumno:
- 1 rama de Elodea (se consigue en lugares de venta de peces, los

acuarios)
- 10 g de levadura comercial
- 2 pares de guantes
- Marcador indeleble
- Encendedor
El profesor:

clase.
➢ Dará una introducción de los diferentes mecanismos de transporte celular.
➢ El profesor realizará de manera demostrativa el montaje de la preparación con
la hoja de Elodea.
cuestionamiento por parte de ello
Parte 1. Turgencia, Plasmólisis

a) Revisar que los portaobjetos este limpios.
b) Marcar los portaobjetos como 1, 2, 3 y 4; en los cuales se colocará 1 ml de
distintas soluciones de NaCl y una hoja de Elodea de acuerdo con el siguiente
protocolo.

No. de portaobjetos Solución

1 Agua
2 NaCl al 0.075%
3 NaCl al 0.9%
4 NaCl al 3%
c) Dejar reposar cada una de las preparaciones durante 3 min.

d) Transcurrido el tiempo colocar en cada una de las preparaciones un
cubreobjetos.
e) Observar al microscopio cada una de las preparaciones con el objetivo de
menor aumento (10x) y posteriormente con el objetivo de 100 X colocando
aceite de inmersión siguiendo la metodología revisada en la práctica 1.
f) Dibujar a detalle los cambios observados en las células al tratarlas con
soluciones de NaCl a diferentes concentraciones.
➢ Parte 2. Transporte activo.
En este ejercicio, se analizará este fenómeno en la levadura, un hongo unicelular. La

sustancia a ser transportada es el rojo neutro, un colorante que es rojo en solución
ácida y amarillo en solución básica. Se utilizará carbonato de sodio (Na 2CO3) para
hacer básica la solución inicial. Las condiciones en el interior de las células vivas son
relativamente ácidas. Las células en el matraz A son hervidas y por lo tanto sus
membranas son permeables a todas las moléculas. En el matraz B están vivas y sus
membranas pueden ser permeables o impermeables al colorante.

a) Etiquetar dos matraces Elermeyer como A y B.

b) Pesar en una balanza granataria 2 g de levadura para cada uno de los
matraces.
c) Deposite los 2 g de levadura en cada uno de los matraces.
d) Adicionar 10 mL de agua a una temperatura de 37°C aproximadamente a cada
uno de los matraces y deje reposar durante 10 minutos a temperatura
ambiente.
e) En el matraz A adicionar 20 mL de una solución de Na2CO3 al 0.75%
homogeneizar la solución.
f) Llevar a ebullición el matraz durante 2 min ya sea con ayuda de un mechero o
con una parrilla de calentamiento.
g) Enfriar el matraz al chorro del agua y adicionar 20 mL de una solución de rojo
neutro a una concentración del 2%.
h) Adicionar al matraz B 25 mL de una solución de Na 2CO3 al 0.75% y 20 mL de
una de una solución de rojo neutro a una concentración del 2%.
i) Homogenice el matraz.
j) Observe las diferencias de color que presentan ambos matraces
k) Dibuje sus observaciones
➢ Al finalizar la práctica resolver el cuestionario e incluirlo en el reporte
1. ¿Cómo se define una célula turgente y una célula plasmolizada?

____________________________________________________________
____________________________________________________________

2. ¿Por qué a la solución de NaCl al 0.9% se le llama también “solución salina

fisiológica?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
3. ¿Cuál es la diferencia entre permeabilidad y permeabilidad selectiva?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
4. ¿Por qué se dice que las biomembranas son estructuras dinámicas?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
5. ¿Qué es la osmosis y porque es importante?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
6. Defina los siguientes términos: isotónico, hipertónico, hipotónico
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
7. Escribe 3 funciones de la membrana.
____________________________________________________________
____________________________________________________________
8. ¿Qué diferencias observó entre las células animales y vegetales en
presencia de la solución hipotónica? Explique la causa.
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
9. ¿Qué efecto observó en las células al colocarlas en una solución
hipertónica?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________
10. ¿Qué efecto observó en las células al colocarlas en una solución isotónica?
____________________________________________________________
____________________________________________________________
____________________________________________________________

Anexo I Galería de imágenes.

• Elodea en condiciones fisiológicas
Pared celular
Membrana
Citoplasma
Vacuola central
Cloroplasto
Célula normal de Elodea
Elodea Célula de la Elodea en condiciones fisiológicas
Imagen tomada de http://www.linkpublishing.com/video-transport.htm
• Elodea en condiciones hipertónicas
El citoplasma y la membrana Separación de la membrana

se separan de la pared celular
Se observa plasmólisis cuando el

Elodea en contacto con una solución hipertónica Plasmólisis agua sale de la célula

• Elodea en condiciones hipotónicas.
Desaparece la separación
Separación de la membrana entre la membrana y la
pared celular
En la célula turgente la presión

Célula en contacto con
una solución hipotónica intracelular aumenta

2015.
R. McGraw-Hill 2014
McGraw-Hill 2012

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Manuales de Prácticas de Ciencias de la Salud

Identificación del Manual de Prácticas

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 1 | 36

1.1. Niveles de organización

OBJET IVO DE APRENDIZAJE

Cada equipo requiere:

MAT ERIALES PARA LA PRÁCT ICA

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 2 | 36

Material provisto por el alumno

PROCEDIMIENT O DE LA PRÁCT ICA

➢ Iniciará la preparación y montaje de la clase y expondrá los objetivos de la

➢ MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO

Para manejar el microscopio de una manera correcta debe seguir ciertas

1. Antes de empezar a trabajar verifique que el objetivo a utilizar sea el de menor

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 3 | 36

a. ENFOQUE CON EL OBJETIVO DE INMERSIÓN

Nota: Antes de poner el aceite debe haberse enfocado en un lente de menor

1. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino.

1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 4 | 36

6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico,

Con base en el siguiente esquema, cada alumno procederá a identificar

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 5 | 36

Con la preparación de agua estancada

a) Verificar que el portaobjetos esté limpio.

a) Con la ayuda de un hisopo realizar un raspado suave en la parte interna de la

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 6 | 36

a) Verificar que el portaobjetos esté limpio.

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 7 | 36

a) Separar una de las capas internas de la cebolla (epidermis), desprendiendo la

b) En un portaobjetos colocar una gota de agua destilada.

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 8 | 36

➢ Al finalizar la práctica resolver el cuestionario e incluirlo en el reporte:

1. ¿Cuáles son las características de un Microscopio óptico, M. simple, M.

6.- ¿Cuáles son los dos microscopios electrónicos básicos?

7.- ¿Qué se le atribuye a Antón Van Leeuwenhoek con respecto a sus

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 9 | 36

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 10 | 36

Las partes de un microscopio compuesto son:

- OCULAR: Lente que se encuentra próximo al ojo, amplifica la imagen

- CONDENSADOR: contiene varias lentes que concentran la luz en el objeto a

- DIAFRAGMA: Esta junto al condensador y regula la cantidad de luz que entra

La unidad básica de longitud que se utiliza con el microscopio de luz es el micrómetro

I. Células epiteliales de la boca

Imagen tomada de inakiresa.wordpress.com/2007/11/ Imagen b tomada de www.papquick.com/es_galeria.html

II. Ejemplos de protozoarios que pueden observarse en agua estancada.

Vorticella Diatomeas Paramecio

Imagen tomada de http://plantphys.info/organismal/lechtml/images/vorticella.jpg

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 12 | 36

III. Ejemplos de formas y agrupaciones bacterianas que pueden

Imagen tomada de http://www.dialogica.com.ar/medline/2007/09/la-era-de-las-bacterias.html

IV. Células epiteliales de cebolla teñidas con azul de metileno

• Lehninger. Principios de bioquímica Nelson, David L.; Cox, Michael M. Omega

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 13 | 36

ELEMENT OS QUE CONST IT UYEN A

2. Elementos que constituyen a las

OBJET IVO DE APRENDIZAJE

• Reconocer las características específicas y la función de cada uno de los

Por cada equipo se contará con:

- 1 Ipad con acceso a internet.

MAT ERIALES PROVIST O POR EL ALUMNO

- Esenciales para la construcción de una maqueta de célula eucariota.

Propiedad intelectual de UNITEC P á g i n a 14 | 36