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Versión 19-3
Manuales de Prácticas de Ciencias de la Salud
PRÁCTICA 1
MICROSCOPÍA Y LA CÉLULA
CONTENIDO
OBJETIVO DE APRENDIZAJE
EQUIPO NECESARIO
- 1 microscopio
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- 20 ml de agua estancada
- 1 yakult o yogurt natural
- 1 cebolla
- Encendedor
- Marcador indeleble punto fino
PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA
El profesor:
Para manejar el microscopio de una manera correcta debe seguir ciertas recomendaciones:
1. Antes de empezar a trabajar verifique que el objetivo a utilizar sea el de menor aumento y la
platina completamente abajo.
2. Conecte el microscopio y enciéndalo.
3. Coloque la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas y ubique la
muestra en el haz de luz que sale a través de la platina.
4. Subir la platina, con la ayuda del tornillo macrométrico, hasta que la muestra esté lo más
cerca del lente objetivo. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular.
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5. Regule la apertura de los lentes oculares según la apertura de sus ojos, para su mayor
comodidad.
6. Mirando a través de los oculares regule la cantidad de luz y defina la imagen con la ayuda del
tornillo micrométrico. La imagen debe quedar nítida.
7. Gire el revolver para seguir pasando a los otros lentes. No necesita bajar la platina en ningún
momento si es que consiguió un buen enfoque al inicio. Si al cambiar de objetivo se perdió
por completo la imagen, es preferible volver a enfocar con el objetivo anterior.
8. Una vez finalizada la observación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento
girando el revólver. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina.
9. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de
observación.
10. Cubrir el microscopio.
b. RECOMENDACIONES GENERALES
1. Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de
observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la
misma y dejarlo cubierto con su funda.
2. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para
evitar que se ensucien y dañen las lentes.
3. Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con
un papel de óptica.
4. No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio.
5. Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el
objetivo con pañuelos especiales para óptica, pasando el papel por la lente en un solo
sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que
limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol sin embargo no debe de abusarse
de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las
lentes y su sujeción.
6. No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macrométrico, micrométrico,
platina, revolver y condensador).
7. El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la
preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo
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agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del
ocular.
8. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido,
secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol.
9. Cuando traslade el microscopio hágalo siempre con las dos manos. Tome el brazo con una
mano y coloque la otra debajo de la base para sostenerlo. Manténgalo en posición vertical.
10. Colóquelo sobre una superficie plana y sólida, por lo menos a 10 cm del borde de la mesa.
11. Antes de comenzar a usarlo revise el estado del microscopio (De acuerdo a las instrucciones
del profesor).
12. Con base en el siguiente esquema, cada alumno procederá a identificar las diferentes partes
del microscopio señaladas con las flechas.
Parte 1
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Parte 2
a) Con la ayuda de un hisopo realizar un raspado suave en la parte interna de la mejilla de algún
compañero.
b) Colocar la muestra proveniente del raspado sobre un portaobjetos limpio.
c) Colocar sobre la muestra una gota de azul de metileno y colocar el cubreobjetos evitando la
formación de burbujas de aire.
d) Realizar la observación de la preparación siguiendo los pasos descritos en la parte 1 utilizando los
objetivos de 10 y 40X.
e) Realizar un dibujo de lo observado en el microscopio.
Parte 3
Célula procariota
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Parte 4
Célula eucariota
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Anexo I
Las partes de un microscopio compuesto son:
a) Sistema mecánico:
- BASE: Soporta todo el peso del aparato, asegurando la estabilidad del mismo.
- BRAZO: Este elemento relaciona el cabezal del microscopio con el pie y sostiene la platina y
el condensador. De esta parte se sostiene el microscopio cuando se lo traslada de un lugar a
otro.
- CABEZAL: Contiene los sistemas de lentes oculares. Puede ser monocular o binocular.
- REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los objetivos.
- PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación se halla sujeta al brazo y posee además
una abertura para el paso de luz. Las platinas tienen dos pinzas sujetadoras, dos tornillos que
permiten desplazar las placas y unas “reglillas” llamadas Escalas de Vernier, que sirven para
tomar las coordenadas sobre la localización de células o estructuras de interés.
- TORNILLOS DE ENFOQUE: son dos, macrométrico que permite acercar la muestra hacia el
lente objetivo y micrométrico, de mayor precisión que es el que define la imagen.
b) Sistema óptico:
- OCULAR: Lente que se encuentra próximo al ojo, amplifica la imagen producida por el
objetivo y su aumento es de 10X.
- OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación su función es ampliar la imagen. En un
microscopio están insertados en una pieza llamada revolver en un número de 4
generalmente. Los lentes objetivos más comunes son los de 5X, 10X, 40X y 100X. El lente de
100X se usa únicamente con aceite de inmersión por lo que es llamado lente de inmersión y
los demás se llaman lentes en seco. La amplificación total o magnificación total resulta de la
acción combinada del ocular y objetivo, se calcula multiplicando estos dos valores. Ej.: ocular
10X, objetivo 10X, amplificación total 100X. A medida que el poder de amplificación o la
magnificación del microscopio aumentan, el espacio observado bajo el campo óptico
disminuye. Lo más importante de un microscopio no es el aumento en sí mismo, sino el
poder separador también llamado a veces poder de resolución. El poder de resolución es una
cualidad del microscopio, y se define como la capacidad de distinguir como imágenes
distintas dos cercanas. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su distancia
es menor a una décima de milímetro.
c) Sistema de iluminación:
La unidad básica de longitud que se utiliza con el microscopio de luz es el micrómetro o micra (µm).
1 mm = 1000 µm
1 µm = 1000 nm (nanómetro)
1µm = 10,000A° (Angstroms)
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Anexo II
Célula epitelial de la boca sin teñir Célula epitelial de la boca teñida con azul de metileno
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Núcleo
Membrana celular
Citoplasma
Imagen tomada de https://practicasdehematologiaycitologia.wordpress.com/2014/11/02/practica-2/
Vacuola
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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PRÁCTICA 2
CONTENIDO
OBJETIVO DE APRENDIZAJE
EQUIPO NECESARIO
- 1 microscopio óptico
- 1 balanza
- 8 Portaobjetos
- 8 Cubreobjetos
- 1 Navaja o bisturí
- 5 Aplicadores de madera y/o palillos
- 1 Tripié y rejilla de asbesto o parrilla de calentamiento
- Mechero bunsen con manguera
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PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA
El profesor:
Iniciará la preparación y montaje de la clase y expondrá los objetivos de la clase.
Dará una introducción de los diferentes mecanismos de transporte celular.
El profesor realizará de manera demostrativa el montaje de la preparación con la hoja de
Elodea.
Durante el desarrollo de la práctica el docente será un facilitador del conocimiento, realizará
retroalimentación con los alumnos e incentivará el cuestionamiento por parte de ello
Parte 1. Turgencia, Plasmólisis
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3 NaCl al 0.9%
4 NaCl al 3%
En este ejercicio, se analizará este fenómeno en la levadura, un hongo unicelular. La sustancia a ser
transportada es el rojo neutro, un colorante que es rojo en solución ácida y amarillo en solución
básica. Se utilizará carbonato de sodio (Na 2CO3) para hacer básica la solución inicial. Las condiciones
en el interior de las células vivas son relativamente ácidas. Las células en el matraz A son hervidas y
por lo tanto sus membranas son permeables a todas las moléculas. En el matraz B están vivas y sus
membranas pueden ser permeables o impermeables al colorante.
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Pared celular
Membrana
Citoplasma
Vacuola central
Cloroplasto
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Desaparece la separación
Separación de la membrana entre la membrana y la
pared celular
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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– https://sites.google.com/site/preupsubiologia/efectomedioencelulaanimal.JPG
– http://www.linkpublishing.com/video-transport.htm#OSMOSIS
PRÁCTICA 3
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METABOLISMO
CONTENIDO
3. Metabolismo celular
3.1. Enzimas y energía
3.2. Rutas metabólicas
3.3. Respiración celular
3.4. Fermentación
OBJETIVO DE APRENDIZAJE
EQUIPO NECESARIO
- Balanza
- Baño de agua
- 30 mL de agua a 37°C
- 3 Generadores de gases (dispositivos para fermentación). Figura 1
- 20 cm de Papel parafilm
- 3 Tubos de ensayo de 13 x 100 mm cada uno con 2 mL del colorante rojo de fenol
- 20 Tubos de ensayo de 16 x 150 mm limpios y secos
- Gradilla para tubos de 16 X 150mm
- 5 Pipetas serológicas de 10 mL
- 1 Vaso de precipitados de 100 mL
- 1 Vaso de precipitados de 50 mL
- 1 Probeta de 50 o 100mL
- 12 Pipetas Pasteur con bulbo o goteros
- 2 Aplicadores de madera
- 15 mL de una solución de glucosa al 1%
- 50 mL de solución de almidón al 1%
- 5 mL de una solución reguladora de pH 4
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PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA
El profesor:
Iniciará la preparación y montaje de la clase y expondrá los objetivos de la clase.
Dara una introducción breve del metabolismo celular.
El profesor mostrara y explicara la función de cada una de las partes que conforman al
generador.
El profesor realizará de manera demostrativa el montaje de un generador.
Nota: Las levaduras se encuentran suspendidas en agua, por lo cual los 10 mL son de levadura
en agua tibia.
d) Cubrir con parafilm cada uno de los generadores de gases para evitar que haya fugas.
e) Verificar que no existan fugas en los generadores de gases.
f) Colocar la punta de la tubería en un tubo de ensayo el cual contiene 2 mL de una solución de
rojo de fenol al 1% como se muestra en la figura 1.
g) Dejar reposar por un periodo de tiempo de 45 a 60 min.
h) Observe lo que sucede y explique porque el colorante cambia de color.
i) Realice el dibujo correspondiente en cada una de las partes.
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Figura 1.
Dispositivo
Nota: verificar que los tubos que se van a mezclar correspondan a la misma temperatura.
j) Los tubos resultantes del paso anterior deberán permanecer en cada una de las
temperaturas señaladas durante todo el procedimiento.
k) Una vez realizada la mezcla almidón-saliva tomar inmediatamente con ayuda de una pipeta
Pasteur con bulbo o un gotero, una muestra de cada uno de los tubos incubados a las
temperaturas de 2°C, 37°C, 93°C; colocar 2 gotas sobre la planilla cubierta con un acetato o
protector de hojas correspondiente a temperatura (figura 2), adicionar 2 gotas de lugol y
mezclar con ayuda de un aplicador de madera.
Nota: tener la precaución utilizar una pipeta Pasteur o gotero para cada una de las
temperaturas que se van a probar.
l) 0bservar y anotar la coloración de la mezcla en cada una de las diferentes temperaturas.
Reacción positiva (+): Color AMBAR. Reacción negativa (-): Color AZUL.
m) Repetir los pasos descritos en el punto i) a los 0, 10 y 20 después de haber realizado la
mezcla almidón-saliva.
n) Con los datos obtenidos completar el siguiente cuadro.
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i) Los tubos resultantes del paso anterior deberán permanecer durante todo el procedimiento
a 37°C
j) Una vez realizada la mezcla almidón-saliva tomar inmediatamente con ayuda de una pipeta
Pasteur con bulbo una muestra de cada uno de los tubos correspondiente a los diferentes
valores de pH de 4, 7 y 10; colocar 2 gotas, sobre la planilla cubierta con un acetato o
protector de hojas correspondiente a pH (figura 3) adicionar 2 gotas de lugol y mezclar con
ayuda de un aplicador de madera.
Nota: tener la precaución utilizar una pipeta Pasteur para cada una de las temperaturas que se
van a probar.
PH Tiempo (min)
0 10 20
4
7
10
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37
93
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Tiempo (minutos)
pH
0 10 20
10
REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
Fortoul, Teresa. (2013). Histología y biología celular. McGraw-Hill.
Baynes, John W; Dominiczak, Marek H.. (2015). Bioquímica médica. Elsevier.
Herrera, Emilio; Ramos, María Del Pilar, et. al.. (2014). Bioquímica básica. Elsevier.
PRÁCTICA 4
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CONTENIDO
OBJETIVO DE APRENDIZAJE
EQUIPO NECESARIO
- Balanza
- 1 microscopio óptico
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- 5 fresas.
- 1 cebolla grande o 1 ajo con ápice de crecimiento.
- 1 bolsa tipo “ziploc.”
- 1 filtro para café o colador de malla cerrada.
- 1 cartoncillo negro (10X10 cm).
PROCEDIMIENTO DE LA PRÁCTICA
El profesor:
Iniciará la preparación y montaje de la clase y expondrá los objetivos de la clase.
Dara una introducción breve de las propiedades fisicoquímicas del ADN y las fases del
crecimiento celular.
El profesor realizará de manera demostrativa cada paso de la metodología.
Durante el desarrollo de la práctica el docente será un facilitador del conocimiento, realizará
retroalimentación con los alumnos e incentivará el cuestionamiento por parte de ellos.
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Una o dos semanas antes de realizar la práctica, en un vaso con agua se colocará una cebolla
grande, orientando la parte de crecimiento del ápice de la misma para que este en contacto
con el agua durante para así obtener raíces en constante crecimiento. Cambiar el agua del
frasco cada 24 horas.
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Ápice
Meristemos
a) Llevar al laboratorio la cebolla en agua para realizar la práctica, teniendo la precaución de que los
meristemos no se deshidraten.
b) Sacar la cebolla del agua.
c) Con ayuda de las pinzas y la navaja, cortar los meristemos de la raíz de la cebolla (1.0 cm).
d) Colocar 4 cortes en un tubo de ensayo y cubrir con HCl 1N. Dejar en contacto 12 minutos a
temperatura ambiente.
e) Transcurrido el tiempo, colocar los cortes en el portaobjetos y enjuagar con agua destilada 2 o 3
veces.
f) Cubrir los cortes con 2 ml de cristal violeta y dejar en contacto durante 3 minutos.
g) Enjuagar con agua destilada, cortar 3mm de los meristemos y desechar el resto, enseguida
colocar un cubre objetos sobre ellos.
h) Con el papel secante eliminar el exceso de colorante de las orillas. Presionar suavemente el
cubreobjetos con la ayuda de la goma del lápiz, teniendo la precaución de no romper los cortes.
(NO GIRAR EL CUBREOBJETOS).
i) Observar al microscopio iniciando con el objetivo 10x hasta el 100x (de inmersión), siguiendo la
metodología descrita en la práctica No. 1
j) Realizar los dibujos correspondientes de lo que se observa en el microscopio.
k) Identificar las fases de la mitosis
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Anexo I
Imagen tomada de Ducolomb, D., Fierro, R., Gonzalez, C. (2012). Manual de prácticas de Laboratorio de
P r o p i e d a Biología
d i n Celular.
t e l eMéxico: l d e U N. I T E C
c t u aUAM-Iztapalapa P á g i n a 28 | 29
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REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
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