TEMA 2: CLASIFICACIÓN DE MATERIALES,

EQUIPOS BÁSICOS Y REACTIVOS.

Varela, B.

TEMA 2.3 PROTOCOLOS BÁSICOS

Uso de la balanza

En cuanto al uso de las balanzas es importante:

 No cambiarlas de ubicación ni moverlas, ya que van instaladas sobre una mesa que evita y
absorbe las vibraciones. Deben estar situadas en lugares sin corriente de aire y con temperatura
ambiente y humedad constantes. Y, además, están niveladas sobre la mesa, lo cual se puede
verificar observando el nivel de burbuja que tienen.
 Se debe conectar unos 30 minutos antes de su uso, para que se caliente y rinda con la exactitud
para la que está diseñada.
 Es importante comprobar su calibración y calibrarla si no está calibrada. La mayoría llevan un
botón de calibración interna automática, se autocalibra tras pulsarlo.
 Se recomienda mantenerla en stand by una vez puesta en marcha y verificada/calibrada, de
forma que no tengamos que esperar el tiempo de calentamiento cada vez que vamos a hacer
una pesada.

Cómo se realiza una pesada:

1) Tarar la balanza. Para ello debes colocar el recipiente o papel en el centro del plato de la balanza
y una vez obtenida la lectura, poner la balanza a cero (pulsar T, Tara, Tare, Zero o equivalente,
según modelo de balanza). Esto lo realizamos para que la lectura de la masa de lo que queremos
pesar, no incluya la masa del recipiente.
2) Depositar el producto/ reactivo o lo que queramos pesar sobre el recipiente o sobre el papel. Se
realizará despacio y con cuidado. Es importante no verter nunca desde el envase del producto,
sino que usaremos para sólidos las espátulas y para líquidos las pipetas.
3) Anota el resultado. Tanto el valor como la unidad.

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Uso de la micropipeta

Distinguimos entre dos técnicas de pipeteo, ambas válidas:

a) Técnica directa de pipeteo

Esta técnica se emplea con la mayoría de los líquidos. La forma de realizarla se indica a continuación:

1) Colocar la punta de la pipeta. Se selecciona aquella adecuada al volumen que queremos dispensar
y se coloca en la pipeta apropiada para esa punta de pipeta. OJO: no se colocan las puntas con la
mano.
2) Ajustamos el volumen que queremos dispensar en la pipeta. Normalmente consiste en girar un
selector (salvo que sean digitales). OJO: no pases de rosca la pipeta, sino en el mejor de los casos
puede descalibrarse pero es muy frecuente que se haya estropeado.
3) Cargar la pipeta con el líquido que queramos dispensar:
a. Con el pulgar, presiona el émbolo hasta el PRIMER tope.
b. Introduce la punta en el líquido (verticalmente, sin que la inmersión sea mucha).
c. Suelta lentamente el émbolo hasta su posición inicial (verás que el líquido ha ascendido por
la punta de la pipeta).
d. Saca la punta del líquido tocando ligeramente las paredes interiores del recipiente, de esta
forma retiras los excesos que quedan por la parte exterior de la pipeta.
4) Dispensación del líquido.
a. Coloca la pipeta de forma que la punta de la misma quede tocando la pared del recipiente
receptor.
b. Presiona el émbolo hasta el PRIMER tope y sin dejar de presión el émbolo presiona hasta el
SEGUNDO tope (de esta forma vaciarás totalmente la punta de la pipeta).
c. Sin dejar de presionar el émbolo, saca la punta de la pipeta del recipiente y devuelve el
émbolo a su posición inicial.
5) Desecha la punta en el contenedor de residuos, presionando el botón eyector de la micropipeta.

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b) Técnica inversa de pipeteo

Esta técnica se emplea para pipetear soluciones de gran viscosidad. La forma de realizarla se indica a
continuación:

1) Colocar la punta de la pipeta. Se selecciona aquella adecuada al volumen que queremos dispensar
y se coloca en la pipeta apropiada para esa punta de pipeta. OJO: no se colocan las puntas con la
mano.
2) Ajustamos el volumen que queremos dispensar en la pipeta. Normalmente consiste en girar un
selector (salvo que sean digitales). OJO: no pases de rosca la pipeta, sino en el mejor de los casos
puede descalibrarse pero es muy frecuente que se haya estropeado.
3) Cargar la pipeta con el líquido que queramos dispensar:
a. Con el pulgar, presiona el émbolo hasta el SEGUNDO tope.
b. Introduce la punta en el líquido (verticalmente, sin que la inmersión sea mucha).
c. Suelta lentamente el émbolo hasta su posición inicial (verás que el líquido ha ascendido por
la punta de la pipeta).
d. Saca la punta del líquido tocando ligeramente las paredes interiores del recipiente, de esta
forma retiras los excesos que quedan por la parte exterior de la pipeta.
4) Dispensación del líquido.
a. Coloca la pipeta de forma que la punta de la misma quede tocando la pared del recipiente
receptor.
b. Presiona el émbolo hasta el PRIMER tope.
c. Sin dejar de presionar el émbolo, saca la punta de la pipeta del recipiente y pulsa hasta el
SEGUNDO tope desechando el resto del contenido.
5) Desecha la punta en el contenedor de residuos, presionando el botón eyector de la micropipeta.

Se desecha.

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Uso del pHmetro

Un pHmetro, peachímetro o medidor del pH, es un instrumento que mide la actividad del ión hidrógeno
en soluciones acuosas, indicando su grado de acidez o alcalinidad expresada como pH. Es decir, nos
sirve para medir la acidez o alcalinidad de una solución (pH).

El valor del pH de una determinada sustancia está directamente relacionado con la proporción de las
concentraciones de los iones de hidrógeno [H+] e hidroxilo [OH-]. Si la concentración de H+ es mayor que
la de OH-, el material es ácido (el valor del pH es menor que 7). Si la concentración de OH - es mayor
que la de H+, el material es básico (con un pH con valor mayor que 7). Si las cantidades de H+ y de OH-
son las mismas, el material es neutral y su pH es 7. Ácidos y bases tienen, respectivamente, iones de
hidrógeno y de hidroxilo libres.

Medición de pH

Podemos obtener una indicación aproximada del pH usando indicadores o cintas de pH, que cambian
de color en función de la variación del nivel de pH. Pero estos indicadores presentan limitaciones en
términos de exactitud y pueden ser difíciles de interpretar correctamente en muestras oscuras o muy
coloridas.

Electrodos de pH

El medidor de pH o pH metro utiliza al menos un electrodo o sensor para medir el pH; explicado de forma
muy general, determina el pH mediante la medida del potencial que se desarrolla a través de una fina
membrana de vidrio que separa dos soluciones con diferente concentración de protones (una solución
es la que está presente en el interior del electrodo y la otra solución es aquella a la cual le queremos
medir el pH).

Mástil/soporte del electrodo

Soluciones tampón (buffer)

Electrodo
Pantalla

Agitador magnético

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Manejo básico del pH metro

A continuación, describimos un protocolo general de uso/manejo del pH metro; sin embargo, es

conveniente que lea las instrucciones del equipo que tenga la primera vez que lo utilice ya que, puede
haber procedimientos específicos o ligeras variaciones.

Tenga en cuenta, en cualquier caso las siguientes consideraciones generales:

- Tenga especial cuidado con la temperatura, ya que esta puede influir en la medida del pH.
- La mayoría de los pH metros, permiten 3 modos de medida: por estabilidad, en continuo o por
tiempo (elija el que más se adapte a su necesidad en ese momento).
- Muchos modelos ofrecen diferentes tipos de calibración: con reconocimiento de 3 familias de
tampones, con reconocimiento de 2 familias de tampones, a un pH concreto, con tampones de
usuario, etc. Una medida correcta del pH implica la calibración periódica del instrumento-
electrodo con soluciones tampón.
- Algunos equipos poseen 2 o más electrodos, lo que le permite medir otros parámetros de forma
simultánea, por ejemplo, además del pH, la conductividad.
- Nunca mantenga el electrodo al aire mientras no lo esté usando, deberá estar siempre cubierto
con su protector y sumergido en la solución correspondiente (KCl 3M habitualmente, aunque
existen otras).

Procedimiento de calibración empleando 2 tampones técnicos (comerciales), es la más habitual.

1) Encender el instrumento.
2) Seleccionar en el menú la opción de calibración/ calibrar pH.
3) Retire el protector al electrodo (no vacíe su contenido), y lave el electrodo con H2O.
4) Seque el electrodo cuidadosamente con un papel que no deje residuos.
5) El equipo le indicará que introduzca el electrodo en el primer tampón técnico.

6) Cuando el equipo haya finalizado con el primer tampón técnico, le pedirá que use el segundo
tampón técnico. Recuerde que antes de ejecutar este paso, usted debe lavar con H2O
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nuevamente el electrodo y secarlo, ya que, de no hacerlo, contaminará el segundo tampón

técnico con restos del primero.
7) Una vez introduzca el electrodo en el segundo tampón y el equipo lo haya reconocido, le indicará
que el equipo ya está calibrado.
8) Puede retirar el electrodo del segundo tampón técnico. Recuerde lavarlo nuevamente y secarlo,
tras lo cual ya estaría listo para su uso. Si en ese momento no va a seguir usando el pH metro,
cúbralo con su protector correspondiente que contendrá además la solución mencionada
anteriormente.

Medida del pH

1) Recuerde tener calibrado el equipo antes de utilizarlo y además limpio y seco el electrodo antes
de introducirlo en su muestra.
2) Seleccione en el menú medida del pH.
3) Elija el método de medida que más se ajuste a su protocolo (por estabilidad, en continuo…)
4) Introduzca el electrodo en su muestra.
5) Pulse en iniciar medida.
6) Espere a que salga la lectura en la pantalla.

7) Anote los datos que necesite.

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8) Saque el electrodo de su muestra.

9) Lave el electrodo, séquelo y cúbralo con el protector que igualmente contendrá la solución
mencionada anteriormente (KCl 3 M, habitualmente).

Otras consideraciones generales:

- Utilice al menos 40 ml de cada tampón técnico cuando sumerja el electrodo en ellos.

Ejemplo de tampones técnicos comerciales.

- Procure que el electrodo no toque ni las paredes del bote ni el fondo del bote de los tampones
técnicos. Tampoco deberá tocar las paredes ni el fondo del recipiente que contenga su muestra.

Visualice los siguientes vídeos en el orden indicado:

1) https://www.youtube.com/watch?v=_6rDNwxmejA
2) https://www.youtube.com/watch?v=Y-NJU2d5FK4