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CURSO

Microbiologa I
LABORATORIO
Prctica A 8:00 9:40
PROFESORA
Helenn Candia
ALUMNA
Huamani Moreano, Nila

Laboratorio de Microbiologa



PRCTICA N
0
1
EQUIPOS DE LABORATORIO DE
MICROBIOLOGA Y BIOSEGURIDAD

OBJETIVOS
Conocer el funcionamiento y uso de los equipos y materiales de laboratorio
Prevenir los accidentes y proteger al alumno de un factor de riesgo.
Conocer los modos y maneras de usar los materiales de laboratorio para futuras
investigaciones.
MATERIALES
EQUIPOS DE LABORATORIO
Incubadora; produce calor seco, usada para incubar cultivos, alcanza temperaturas
<100
0
C.
Autoclave; esteriliza por vapor hmedo, esteriliza medios de cultivo y otras
soluciones.
Para materiales sin usar aun, 121
0
C, 15
0
de Presin x 15 min.
Para materiales sucios 121
0
C, 15
0
de Presin x 30 min.
Horno; produce calor seco, esteriliza materiales de vidrio, no se puede poner
lquidos por lo que lo seca, y tampoco jebe, ya que lo achicharra.
Refrigeradora; permite conservar a bajas temperaturas de 4 8
0
C.
Balanza analtica: se pueden pesar tanto medio de cultivo como reactivos.
Bao Maria; equipo que contiene agua a una determinada temperatura, se utiliza
por lo general a 37
0
C, mantiene una muestra a una temperatura especifica.
Contador de colonias
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Microscopio: equipo que nos permite la observacin de la imagen de un objeto
amplificado.
CUESTIONARIO
1. Describa el modo de usar una pipeta y una placa Petri. Esquematice.
Las placas Petri son un elemento esencial en el laboratorio, se utiliza para cultivar clulas,
examinar el comportamiento de pequeos animales e incluso realizar cultivos bacterianos.
Se realizan diferentes tipos de siembras con un medio slido, de acuerdo a los
requerimientos del microorganismo a estudiar. Existen distintas tcnicas para la siembra
en estras, el objeto es obtener colonias aisladas.
Tcnica A: Consiste en cargar el ansa con la muestra y hacer estras paralelas en la cuarta
parte de la superficie de la placa, se quema el ansa, se enfra, se gira la placa a 90 y se
vuelve a estriar tocando 3 o 4 veces el rea sembrada inicialmente y cubriendo otro
cuarto de la placa. Por ltimo, sin quemar el ansa, se estra el resto de la superficie sin
sembrar.



Figura 1: Tcnica A
Tcnica B: Con el ansa cargada se hacen 3 o 4 estras; se quema el ansa, se hacen 3 o 4
estras perpendiculares a las anteriores, se quema el ansa y se repite el procedimiento
hasta agotar la superficie de la placa.

Figura 2: Tcnica B,
posiciones de las
estras en una
placa Petri.




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Pipeta: Tcnica de Pipeteo
El primer paso de una buena tcnica de pipeteo es seleccionar la pipeta ms apta para el
volumen que se desea medir. Una vez seleccionada la pipeta, es necesario cerciorarse qu
tipo de pipeta es, si es de soplar o no. Luego se debe ajustar en la boquilla de la pipeta el
dispositivo que se utilizar para crear vaco y succin, la pera de hule. La pipeta se debe
llenar hasta un poco ms arriba del inicio de la graduacin de la escala y luego poco a poco
se ajusta, frente a los ojos y en posicin vertical, al punto exacto de graduacin de la
escala. La pipeta conteniendo el lquido a dispensar es transferida al recipiente donde se
depositar el lquido. En este momento se presiona la pera suavemente en el punto que
permitir la salida del lquido, manteniendo la pipeta en posicin vertical y con la punta de
la misma descansando en el recipiente. Una vez dispensado el volumen, se retira la pera y
la pipeta se descarta cuidadosamente.
Micropipeta:
Las micropipetas son dispositivos que permiten medir volmenes pequeos que van
desde 1 l hasta 1 ml o ms. Al igual que las pipetas stas pueden ser para contener o
para verter volmenes. Pueden ser graduadas de acuerdo al volumen por la rueda
dentada. Todas ellas utilizan puntas o tips descartables plsticos que se ajustan al
extremo de la micropipeta.
Para absorber el lquido, el pistn es presionado hasta una primera posicin, el tip es
puesto en contacto con el lquido y luego, lentamente, se permite que el pistn vuelva a
su posicin original. Este paso permite el llenado del tip con el volumen correspondiente
Aspiracin: apretar el botn pulsador hasta el primer tope. Lentamente se aspira el lquido
al relajar la presin del dedo sobre el botn pulsador. Si este paso no se realiza con
atencin, puede entrar aire en la punta y la cantidad de muestra aspirada no es la
adecuada.
Dosificacin: colocar la parte inferior de la punta contra la pared interior del recipiente
donde se depositar el lquido, con un ngulo entre 10
0
y 40
0
.
Apretar el botn pulsador suavemente hasta el primer tope y esperar un segundo.
Apretar el botn pulsador hasta el segundo tope para vaciar el resto del Lquido.
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Manteniendo apretado el botn pulsador en el segundo tope, retirar la pipeta deslizando
la punta por la pared del recipiente. Soltar luego el botn pulsador
Expulsar la punta apretando el botn del expulsor

Figura 3. Posiciones de la micropipeta a la hora de medir un volumen especfico
2. Qu materiales de laboratorio utilizara para medir volmenes pequeos y exactos.
Las mediciones y transferencias de volmenes son requisitos bsicos en un cultivo
microbiolgico. Estos procedimientos son hechos utilizando instrumentos como las
pipetas manuales, las micropipetas, las buretas, las probetas o los balones de aforar. Cada
uno de ellos cumple una funcin en particular dentro del laboratorio. (Santambrosio, E.,
Ortega, M., 2009.)
Debido al uso rutinario dentro de las prcticas a realizar es necesario conocer el manejo y
uso adecuado de los instrumentos
volumtricos.





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Figura 4. Instrumentos de medicin para volmenes pequeos.
3. Quien descubri a los microorganismos y como ocurri.
Sin embargo, dado que antiguamente los seres humanos no saban que existan
organismos microscpicos, se considera que la microbiologa comenz slo un par de
siglos atrs de nuestra poca, con la invencin del microscopio por Leewenhoek
(1632-1723). En este momento la existencia de los microorganismos dej de ser
intuicin pura y se convirti en una certeza. El descubrimiento de los
microorganismos fue obra de un comerciante holndes de tejidos, Antonie van
Leeuwenhoek (1632-1723), quien puliendo lentes fabric unos microscopios simples,
con los que lleg a obtener aumentos de casi 300 dimetros. En 1675 descubri que
en una gota de agua de estanque pululaba una gran variedad de pequeas criaturas a
las que denomin "animculos". (Casal, R., 2004).

4. En que categora de BIOSEGURIDAD clasificara al laboratorio de Microbiologa
El laboratorio de Microbiologa de Escuela de Biologa de la Facultad de Ciencias
Naturales de la UNFV, en el nivel de Bioseguridad 1, ya que es de uso en Enseanza e
investigacin. Se realizan prcticas microbiolgicas estndar, el lugar se mantiene
ventilado de manera normal y con un equipo de seguridad personal, sin uso de
cabinas.
CONCLUSIONES
- Los equipos de laboratorio mantienen una determinada rea de funcionalidad y
especificidad para los reactivos y medios tratados en el laboratorio.
- Es necesario una idea clara de los riegos que se corre en el laboratorio al manipular los
objetos y equipos, por eso es primordial conocer el uso adecuado de materiales.
- La bioseguridad como principal objetivo para prevenir cualquier tipo de accidente.
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REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
Santambrosio, E., Ortega, M., 2009. Siembra y recuento de microorganismos. Universidad
Tecnolgica Nacional.
Casal, R., 2004. Impacto social de la Microbiologa Medica.