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RECTOR
De tal forma, este escrito intenta proporcionar las bases que permitirán tanto al
estudiante de Medicina Veterinaria como al Clínico, interpretar los resultados del
laboratorio de una manera sencilla, al compararlos con los rangos normales de cada
prueba realizada.
Existe una gran variedad de tablas de valores normales a la disposición del clínico,
pero se recomienda que el Médico Veterinario deba determinar los rangos normales
de valores a través del envió constante de pruebas y fomentar la aproximación a la
patología clínica permitiendo esto, comprender mejor el perfil de las enfermedades
que afectan a los diferentes animales domésticos.
GENERALIDADES PÁGINA
1.- Hematopoyesis 5
2.- Hemoglobina 12
3.- Leucopoyesis 13
4.- Alteraciones de la sangre:
Policitemia y anemia 17
5.- Importancia de los recuentos leucocitarios 19
6.- Interpretación de los recuentos leucocitarios 20
7.- Interpretación de las alteraciones leucocitarias 22
8.- Anticoagulantes 23
9.- PRACTICAS DE LABORATORIO
Punción venosa 26
Velocidad de sedimentación 28
Hematocrito 31
Determinación de proteínas plasmáticas 35
Frotis y tinción 37
Conteo de eritrocitos 41
Conteo de leucocitos 44
Determinación de hemoglobina 46
Conteo de plaquetas (trombocitos). 48
Tiempos de coagulación:
Tiempo de sangrado 50
Tiempo de coagulación 51
Tiempo de protrombina 53
Tiempo parcial de tromboplastina 54
Tiempo de trombina 55
General de orina (análisis de la orina). 57
Determinaciones especiales (Pruebas serológicas). 78
Citología diagnóstica 83
Medula ósea.- Almacena hierro, sintetiza hemoglobina, produce los eritrocitos leucocitos y
trombocitos.
Neutrófilos
Eosinófilos
Basófilos
Linfocitos
Monocitos
Trombocitos
Células varias
Núcleos expulsados de los eritrocitos
Distribución de la sangre: La sangre hace de 6-8% del peso corporal magro. La médula
ósea, donde se forma mucho de los componentes celulares, comprende cosas de 2% del
peso corporal aproximadamente dos tercios del volumen del hígado.
Puede ocurrir disminución en los componentes celulares por perdida rápida de células
(hemorragia). La hemólisis y la insuficiencia para formar células tienen poco efecto en el
volumen sanguíneo total. El aumento primario en al producción de eritrocitos es raro, pero
en animales en gran altitud puede ocurrir una policitemia secundaria.
El bazo actúa como almacén de reserva de eritrocitos en el caballo, perro gato y otras
especies. Durante o inmediatamente después de la hemorragia, el bazo se contrae para
mantener el volumen plasmático. Cuando la pérdida de células sanguíneas y plasma es
grande, el liquido intersticial de los tejidos entra en el compartimiento vascular para
mantener el volumen sanguíneo. Este líquido es bajo en proteína y por dilución reduce la
concentración de proteínas plasmáticas.
ERITROCITOS: comprenden alrededor del la mitad del volumen total de la sangre. Son
elementos sumamente especializados cuya función es la de transportar oxigeno y el
anhídrido carbónico, para cuya función están capacitados debido a su contenido de
hemoglobina
En todos los mamíferos el eritrocito carece aparato nuclear de la verdadera célula. Se halla,
aparentemente rodeado por una especie de membrana delicada constituida por sustancias
de naturaleza lipoproteína
Es un disco bicóncavo en la totalidad de los mamíferos excepto en los camelidae (oval)
En este proceso se inicia con una célula primitiva rubiblasto y procede en forma ordenada a
través de etapas identificadas en la forma siguiente:
Prorubricito
Rubricito
Metarubricito
Retículo o eritrocito policromatófilo
Eritrocito maduro
En general el tamaño celular disminuye a medida que se llega a cada nueva etapa en la
serie.
Hay un núcleo hasta la etapa de metarubricito, el núcleo se vuelve picnótico
Al terminar la vida de los eritrocitos, la célula vieja se empequeñece y es más densa por
que disminuye la concentración de enzimas glucolíticas. El método usual de destrucción de
las células viejas es la fagocitosis por el tejido.
Las células RE procesan los eritrocitos y sus fragmentos, siendo el bazo el tejido más
sensible para la filtración de las células.
Fig. 2.3 Eritrocitos felinos. Son más pequeños que los Fig. 2.6 Eritrocitos de oveja. Son de tamaño pequeño
de perro se aprecia ligera anisocitosis. 100x (comparado con el del perro) y se aprecia su palidez
central limitada. 100x.
Fig. 2.4 Eritrocitos de equino. Se aprecia el Fig. 2.7 Eritrocitos de llama. Se aprecia su forma
fenómeno de Roleux, presente normalmente en elíptica característica.
esta especie y en el felino.
Compuestos de transporte:
El hierro es un componente esencial del pigmento respiratorio, hemoglobina y ciertas
enzimas.
65% del hierro del cuerpo esta combinado en la hemoglobina, 4% en la mioglobina y el 1%
en las enzimas oxidativas.
15% se haya en forma ferritina y hemosiderina; sustancia de reserva del hierro y el 0.1%
encontrado en la transferrina.
El ión ferroso se combina con globulina beta del plasma el compuesto es transferrina.
Cada molécula de globulina se combina con 2 átomos de hierro.
La transferrrina transporta el hierro al rubriblasto para su incorporación en la hemoglobina.
LEUCOCITOS GRANULARES
Neutrófilos, eosinófilos y basófilos. Se originan extravascularmente en médula ósea.
LEUCOCITOS AGRANULARES
El nombre, linfocito, se deriva del hecho de que el citoplasma de estas células s
característicamente claro.
Su desarrollo s a partir de linfoblastos y siguiendo su forma de maduración a prolinfocito y
finalmente a linfocito.
El desarrollo de los monocitos es similar, monoblastos, promonocito y monocito
TROMBOCITOSIS
Las plaquetas son fragmentos celulares sin núcleo, que se originan del citoplasma de los
megacariocitos (células gigantes) de la medula ósea.
Neutrófilos: son la fracción principal de los granulocitos. Su núcleo esta dividido en lóbulos
o segmentos conectados mediante filamentos. Poseen actividad amiboidea y son activos en
la fagocitosis.
Aumentan en los puntos de inflamación y en enfermedades infecciosas e intoxicaciones.
Se forman en medula ósea a partir de los mielicitos neutrófilos.
Son microfagocíticos de bacterias y pequeñas partículas, las cuales elaboran enzimas de
gran poder proteolítico que ejercen dentro de su acción dentro de las células para destruir
la partícula fagocitaría o para eliminar dichas toxinas. Son muy móviles de acción
quimiotáctica para tejido desvitalizado, bacterias y cualquier otro cuerpo extraño.
Monocitos: Son macrófagos cuya misión es eliminar grandes partículas. Produce enzimas
más potentes que las de los neutrófilos para destruir hongos, protozoarios, bacilos
tuberculosos, etc.
Maduración de las células eritroides y granulocíticas caninas como se presentan en los extendidos de
aspiración de médula ósea (Wright-giemsa) Dibujados por el Dr. Perry Bain
M en C VÍCTOR M. ALONSO MENDOZA
CERTIFICADO POR LA SLAPCV Página 16
Fig.5.7 Neutrófilo semgentado. Célula con un núcleo Fig. 5.10 Eosinófilo . Célula con un núcleo bilobulado
segentado y citoplasma rosa pálido (Neutrófilo y con múltiples gránulos rojizos . Frotis de sangre
maduro o segmentado maduro). felina.
Fig. 5.8 Linfocito pequeño. Célula pequeña con núcleo Fig. 5.11 Basófilo . Célula con núcleo segmentado y
redondo u oval central y un borde de citoplasma azul gránulos redondos de color púrpura poco definidos en
claro. Frotis de sangre canina. el citoplasma. Frotis de sangre felina.
Fig. 5.9 Monocito. Célula grande con un núcleo Fig. 5.12 Neutrófilo segmentado y basófilo. La célula en
profundamente dentado, citoplasma azul-gris y la parte inferior izquierda es un neutrófilo semgentado y
múltiples y discretas vacuolas citoplasmática. la de la parte superior derecha es un basófilo (de mayor
Frotis de sangre felina. tamaño con gránulos redondos del citoplasma de color
púrpura claro poco definidos. Frotis de sangre felino.
2
3
1 1
POLICITEMIA
Es el aumento del número de eritrocitos, al que generalmente acompaña un aumento
correctivo en la cantidad de hemoglobina y en el volumen d eritrocitos aglomerados.
POLICITEMIA RELATIVA:
Hemoconcentración: Como consecuencia de disminución de volumen del plasma
POLICITEMIA PASAJERA:
REDISTRIBUCION DE ERITROCITOS EN EL LECHO VASCULAR
El bazo actúa como almacén de eritrocitos en el perro, gato, caballo y en caso de
necesidad, los eritrocitos pueden liberarse por estimulación esplénica: ejercicio,
hemorragia aguda, reducida previsión de oxigeno, emociones fuertes, drogas que
estimulan el SNC
POLICITEMIA ABSOLUTA:
Aumento en la masa total de células
ANEMIAS
Se define como anemia a la disminución por debajo de la cantidad normal de eritrocitos por
microlitro, el valor de la hemoglobina, y del volumen del paquete celular (VPC). Esta, no es
una enfermedad, sino un signo de enfermedad subyacente.
El objetivo del laboratorio es determinar el tipo de anemia para poder descubrir la causa.
TIPOS DE ANEMIA:
Macrocítica
Tipo I Normocíitica Deficiencia de cobalto (def. Vit. B12)
Porfirinuria congénita
Tipo II Hipocrómica Afección transitoria que ocurre durante la que
fase activa de la regeneración eritrocítica de la
pérdida aguda de sangre.
Destrucción de eritrocitos.
Hemoglobinuria.
Leptospirosis.
Anaplasmosis y piroplasmosis.
Microcitica Normocromica
El recuento leucocitario con ayuda del examen físico y clínico del paciente nos sirve
para darnos cuenta de:
Virulencia del microorganismo
Naturaleza y gravedad del proceso
Respuesta general del enfermo
duración del proceso
Pronóstico.
Anticoagulantes
El uso de jeringas o tubos húmedos
El exceso de vacío al aspirar la jeringa
Excesiva presión al expulsar la sangre
Contaminación con productos químicos
Como ya se dijo antes, el grado de leucocitosis esta influido por los siguientes
factores: especie de animal, gravedad de la infección o inflamación, virulencia del
agente etiológico, resistencia del huésped, tipo de lesiones (infección generalizada,
o localizadas).
1. Gravedad de la afección
Se juzgara por los siguientes factores:
Infección ligera cuando hay neutrofilia con ligera desviación a la izquierda y
presencia de eosinófilos.
Grave si hay leucocitosis elevada, principalmente a partir de neutrófilos
Gravedad media a intensa si hay neutrofilia con linfopenia y eosinopenia.
Grave si hay neutrófilos tóxicos.
Muy grave cuando hay manifestaciones clínicas sin alteraciones
leucocitarias.
Disminución de la gravedad y tendencia a recuperarse si hay descenso de
leucocitos con disminución de neutrófilos y aumento de linfocitos y
eosinófilos.
3.- Pronóstico
Signos desfavorables:
Desviación degenerativa a la izquierda.
Linfopenia persistente.
Intoxicación grave o sea presencia de neutrófilos tóxicos.
Ausencia de eosinófilos.
Recuentos leucocitarios muy elevados con predominio de neutrófilos.
Persistencia de leucopenia.
EDTA
Es usado para biometrías, hematocrito, pruebas de segmentación y pruebas de tipo
sanguíneo.
Presenta dos tipos de sales de ácido etileno diamino tetracético
Di sódica
Di potásica
CITRATOS
El citrato sódico: se combina con el calcio para formar una sal insoluble. Es más
usado para estudios de coagulación, sedimentación de eritrocitos y para
transfusiones de sangre. Las transfusiones de sangre citratada a veces van
seguidas de escalofríos o fiebre moderada o fuerte, durante los primeros minutos de
la trasfusión. Esta reacción puede ser pasajera y de poca importancia clínica, pero
puede producirse anafilaxia grave progresiva, hasta la muerte.
FLORUROS
Su forma de actuar en inhibiendo la glucólisis y se utiliza cuando se ha de
determinar glucosa
HEPARINA
Su acción, retarda la coagulación pero no es por si misma anticoagulante, por la
fuerte acidez de la heparina disociada del ión sódico, este se combina con proteínas
de plasma, probablemente con una seroalbúmina. La actividad anticoagulante de la
heparina se atribuye a esta combinación. Prolonga el tiempo de coagulación por
inhibir la conversión de la protrombina en trombina.
Dosis es de 0.1-0.2 mg x ml de sangre.
Produce en efecto mínimo sobre el tamaño y hemólisis de los eritrocitos.
Es utilizado principalmente para transfusiones sanguíneas, siendo apropiado para
la realización de frotis sanguíneos y pruebas de aglutinación.
El uso terapéutico de la heparina es en el tratamiento de tromboflebitis y trombosis
coronaria así en los daños mecánicos o químicos a la íntima de las venas grandes,
como puede ocurrir en cirugía y que puede favorecer a la formación de trombos.
Equino Yugular
Bovino Yugular, mamaria, auricular
Cerdo Vena cava posterior y marginal de la oreja
Perro Cefálica safena y yugular
Gato Yugular
Aves Vena del ala
Ovino Yugular
Animal laboratorio Directo al corazón
PUNCION VENOSA
OBJETIVO: Localizar sitios de punción sanguínea y llevar a cabo la toma de la
muestra de una manera rápida y efectiva.
DESCRIPCIÓN DEL DESARROLLO DE LA PRÁCTICA.
1.- La buena sujeción del animal, representa el mayor porcentaje del éxito de la
toma de muestra (la mejor sujeción es la mínima).
2.- Limpiar la zona con alcohol y dejarlo secar.
3.- Oclúyase la vena por presión digital o mediante un torniquete
4.- Estírese la piel sobre la vena para inmovilizarla
5.-Insértese la aguja con el bisel hacia arriba. Una aguja del numero 20 es la
más adecuada, lagunas personas utilizan las de los números 22 y 25 para gatos.
6.- Aplíquese tracción cuidadosa al embolo de la jeringa hasta obtener la cantidad
deseada de sangre. La succión demasiado enérgica es capaz de colapsar la vena,
impidiéndole el paso de sangre a la jeringa
7.-Retírese la aguja y después de quitarla de la jeringa, vacié la sangre con mucho
cuidado en el tubo que contiene anticoagulante.
8.- Se puede utilizar equipo vacutaener.
Fig. 1.2 Toma de la muestra. Fig. 1.4 Selección del tipo de tubo
Vacutaener.
EVALUACIÓN
El alumno entregará un reporte de práctica:
Abarcando los siguientes puntos:
Portada
Introducción
Desarrollo
Resultados
Conclusiones
Bibliografía
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN
FUNDAMENTO:
NUMERO DE ERITROCITOS
Cuando aumenta el número de eritrocitos la velocidad de sedimentación
disminuye.
En la mayor parte de las anemias, el escaso número de células se traduce en
aumento de la velocidad de sedimentación.
TIPOS DE ANTICOAGULANTES
El oxalato doble, la heparina y el EDTA no afectan el tamaño de los
eritrocitos ni altera la velocidad de sedimentación.
TEMPERATURA
La velocidad de sedimentación de la sangre a la temperatura del refrigerador
es mas baja que la temperatura del laboratorio, pero las variaciones
pequeñas en esta no influyen
METODO WINTROBE
Portada
Introducción
Desarrollo
Resultados
Conclusiones
Bibliografía
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
1. Feldam B. Zinkl J. Jain N, Veterinary hematology, Ed. Lippincott Williams and
Wilkins, Fifth edition. Canada, 2000, pp 216-239, 281-439
2.- Davidson Malcom, Else Roderick, Lumsden John, Manual de patología clínica en
pequeños animales, Ed. Harcourt, España, 2000, pp 43-81
3. - Meyer D.J, Harvey John, Veterinary laboratory Medicine interpretation and
diagnosis, Ed.Saunders company, Third Edition, United States of America, 2004.
pp. 47- 130
Objetivo:
El alumno conocerá los diferentes componentes de la sangre, como se distribuyen
por diferentes densidades y como se lleva a cabo su medición o lectura.
SINONIMIAS
Volumen de eritrocitos aglomerados (vea)
Volumen de sedimentación globular
Volumen del paquete celular
CONSIDERACIONES GENERALES:
METODOS
1. De wintrobe
2. Microhematocrito
METODO WINTROBE
Es un tubo de calibre uniforme (3mm) y fondo plano, dividido
longitudinalmente en 10 cm o 100mm.
Los números a la derecha leídos hacia arriba de 0-10cm se usan para
determinaciones de hematocrito.
Los números de izq. leídos hacia debajo de 0-100mm se usan para la
velocidad de sedimentación de los eritrocitos.
METODO MICROHEMATOCRITO
MATERIAL
PROCEDIMIENTO
Se llenan 2/3 O ¾ partes del tubo capilar (por el fenómeno de capilaridad)
El extremo opuesto, libre de sangre se cierra con la arcilla o con calor
Se coloca el fondo de la columna de glóbulos rojos en la línea 0 de la escala
de la centrífuga.
Se centrífuga (10,000-13,000rpm) y se produce un conglomerado de
eritrocitos en 5 minutos o menos, según la especie.
Se procede a la lectura.
HCM = Hb eng/100ml_______x 10
Cuenta de eritrocitos
Millones /mm3
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
2. Feldam B. Zinkl J. Jain N, Veterinary hematology, Ed. Lippincott Williams and
Wilkins, Fifth edition. Canada, 2000, pp 216-239, 281-439
2.- Davidson Malcom, Else Roderick, Lumsden John, Manual de patología clínica en
pequeños animales, Ed. Harcourt, España, 2000, pp 43-81
3. - Meyer D.J, Harvey John, Veterinary laboratory Medicine interpretation and
diagnosis, Ed.Saunders company, Third Edition, United States of America, 2004.
pp. 47- 130
OBJETIVO:
MATERIAL:
Sangre con anticoagulantes.
Centrífuga
Pipeta de transferencia
Refractómetro
Valores de referencia en diferentes especies.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
Feldam B. Zinkl J. Jain N, Veterinary hematology, Ed. Lippincott Williams and
Wilkins, Fifth edition. Canada, 2000.
Davidson Malcom, Else Roderick, Lumsden John, Manual de patología
clínica en pequeños animales, Ed. Harcourt, España, 2000.
Meyer D.J, Harvey John, Veterinary laboratory Medicine interpretation and
diagnosis, Ed.Saunders company, Third Edition, United States of America,
2004.
Meyer D.J, Harvey John, Medicina laboratorial veterinaria, Interpretación y
diagnosis, España, 2007, pp 229-245
MATERIAL
Sangre.
Varios porta objetos limpios.
PROCEDIMIENTO
Se toman dos laminillas o portaobjetos, cuyos extremos estén lisos
totalmente.
Se coloca una gota de sangre de tamaño medio a 1-2 cm del extremo
derecho de la laminilla.
Se sostiene el porta objeto con el pulgar y el índice por el extremo izquierdo.
Se toma otro porta objetos y se coloca formando un ángulo agudo, hasta
hacer contacto con la gota de sangre y se desliza con rapidez, debiendo
quedar una película uniforme.
Secar.
MATERIAL
Frotis sanguíneo.
Tinción (Wright, dip quick, nuevo azul de metileno).
Agua destilada o solución amortiguadora.
Microscopio.
Aceite de inmersión.
PROCEDIMIENTO
Se coloca la laminilla (frotis) sobre la gradilla de tinción y se cubre en su
totalidad de sol. Wright mediante un gotero
Se espera de 1-5 min.
Se agrega una cantidad de agua destilada o solución amortiguadora,
mezclándose.
Esperar a que seque.
Observar al microscopio.
Después agregue una gota de aceite de inmersión y observe con el objetivo
de inmersión.
PROCEDIMIENTO
1.- Una vez realizado el frotis sanguíneo, se procede a colocarlo en el primer
recipiente que contiene alcohol fijador (Metílico absoluto) por 30 segundos.
2.- Se saca del recipiente retirando el exceso de alcohol y se coloca en el
segundo depósito que contiene el colorante primario (eosina) por 30 segundos.
3.- Posteriormente se pasa
A fin de dar una muestra representativa de todas las porciones del frotis se sugiere
el método siguiente:
Empezar el examen siguiendo lo largo del margen exterior del frotis en unos
tres campos, correr hacia adentro un trecho corto (1mm o tres campos) paralelo
a un margen para examinar tres campos, luego regresar al borde del frotis.
Repetir el procedimiento tantas veces como sea necesario para identificar el
número de células que se requiere.
La figura 1.B nos muestra dicho procedimiento.
Fig. 1.B
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
Feldam B. Zinkl J. Jain N, Veterinary hematology, Ed. Lippincott Williams and
Wilkins, Fifth edition. Canada, 2000.
Davidson Malcom, Else Roderick, Lumsden John, Manual de patología
clínica en pequeños animales, Ed. Harcourt, España, 2000.
Meyer D.J, Harvey John, Veterinary laboratory Medicine interpretation and
diagnosis, Ed.Saunders company, Third Edition, United States of America,
2004.
Meyer D.J, Harvey John, Medicina laboratorial veterinaria, Interpretación y
diagnosis, España, 2007, pp 25-36
MATERIAL:
Sangre completa (con anticoagulante).
Pipeta de Thoma
Boquilla y tubo de goma
Solución Hayem (o solución salina fisiológica).
Cámara Neubauer
Agitador
Microscopio
PROCEDIMIENTO:
Cámara de Neubauer
Llenado de la Cámara de Neubauer
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
1.-Feldam B. Zinkl J. Jain N, Veterinary hematology, Ed. Lippincott Williams and
Wilkins, Fifth edition. Canada, 2000, pp 216-239, 281-439
2.- Davidson Malcom, Else Roderick, Lumsden John, Manual de patología clínica en
pequeños animales, Ed. Harcourt, España, 2000, pp 43-81
3.-Meyer D.J, Harvey John, Veterinary laboratory Medicine interpretation and
diagnosis, Ed.Saunders company, Third Ed., United States of America, 2004. pp.
47- 130
CUENTA DE LEUCOCITOS
PROCEDIMIENTO
El procedimiento es el mismo que el anterior, excepto que se utiliza una
pipeta para leucocitos y la sangre se aspira hasta la marca 0.5 y el diluyente
hasta la marca II.
Los leucocitos de los cuatro cuadros de la esquina son contados por el
objetivo 10x.
La cuenta final, se obtiene multiplicando la suma de los cuatro cuadros por
50 que es el factor de conversión a células mm3
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
DETERMINACIÓN DE HEMOGLOBINA
PROCEDIMIENTO:
Se coloca la cámara de vidrio en la abrazadera de modo que una de las
plataformas del fondo, sobresalga del cubreobjetos como un cajón
parcialmente abierto.
Se pone en la plataforma una gota de sangre y se hace girar en ella la punta
de un delgado palillo cubierto de saponina, en cosa de 1 min. (la hemólisis es
completa).
Se quita el palillo y se empuja en la plataforma bajo el cubre objetos.
Se observa la cámara con luz trasmitida para ver que la gota cubra la
totalidad de la plataforma y llene el espacio entre este y el cubreobjetos.
Se inserta en el instrumento la abrazadera y la cámara montada y se
compara el color de la cámara con un prisma de vidrio que puede moverse
en direcciones opuestas y sirve de patrón. Se forman dos campos verdes
contiguos, que deben ajustarse hasta su igualación.
Mueva el prisma de arriba hacia abajo tres veces para corregir el ajuste.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
CUENTA TROMBOCITICA
Objetivo: El alumno podrá realizar cuentas de plaquetas y conocerá las principales
causas que alteran su determinación.
COLECCIÓN DE LA SANGRE:
Se prefiere la sangre venosa a la capilar, deberá extraerse con una jeringa de
plástico y colocarse en un tubo de ensaye siliconizado que contenga 2.5-5mg de
EDTA
METODO INDIRECTO:
1. Se examina el frotis de sangre teñido y se anota el número de trombocitos en
varios campos representativos y se saca un promedio.
Puede utilizarse cualquier tinción de rutina para la realización del frotis
sanguíneo.
El hallazgo de 3 o menos trombocitos puede compararse con el de leucocitos
del frotis, este número relativo puede transportarse a un número absoluto:
Número de trombocitos por cuenta total de leucocitos = trombocitos 100
leucocitos por microlitro.
METODO DIRECTO:
1. Se extrae la sangre en una pipeta para diluir eritrocitos hasta la marca
0.5 y el liquido diluyente hasta la marca 101 entre los diluyentes están:
Citrato de sodio 3.8g
Formaldehído al 40% 0.2ml
Azul de cresol brillante 0.1ml
Agua destilada 100ml
Oxalato de amonio al 1%
Oxalato de amonio 1 H2O
Agua destilada 1.1g
EDTA 1-2% 9.5-100 ml
EVALUACIÓN
El alumno entregará un reporte de práctica:
Abarcando los siguientes puntos:
Portada
Introducción
Desarrollo
Resultados
Conclusiones
Bibliografía
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
FUENTES BIBLIOGRÁFICAS
TIEMPO DE SANGRADO
INTERPRETACIÓN:
Valores normales varían de 1-5 min. en animales domésticos
Es prolongado en:
Lesiones vasculares
Defectos plaquetarios
Fragilidad capilar
Enfermedad de von willebrad
EVALUACIÓN
El alumno entregará un reporte de práctica:
Abarcando los siguientes puntos:
Portada
Introducción
Desarrollo
Resultados
Conclusiones
Bibliografía
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
METODO
método de Lee-White
1. se obtiene por lo menos 3 ml de sangre en una jeringa de plástico,
teniendo cuidado al hacer la punción venosa
se enciende un cronometro tan pronto como la sangre entre a la
jeringa.
2. se pone 1 ml de sangre en cada uno de tres tubos (10x75ml)
3. se ponen los tubos de ensayo en baño de agua a 37 0c
4. a los dos minutos se inclina suavemente uno de los tubos y luego a
intervalos de 1mn hasta que la sangre haya coagulado
5. se estudia el tercer tubo de la misma forma
6. el tiempo entre la aparición de la sangre en la jeringa y el de la
formación del coagulo en el tercer tubo es el tiempo de coagulación
Se hace una punción en la piel, después de secar la primera gota se llena un tubo
capilar especial con sangre, anotando el tiempo que aparece por primera vez la
sangre.
Deteniendo el tubo entre los dedos pulgar e índice de ambas manos, se pasa
suavemente el tubo cada 30 seg. hasta que se observe un hilo de fibrina en el
hueco que queda entre los extremos del tubo
Se anota el intervalo entre la aparición de la sangre y la formación de fibrina.
INTERPRETACIÓN
Valores normales:
Método de Lee-White en tubos de vidrio: de 3-12 min.
Método del tubo capilar
caballo y ganado bovino: de 2-15 min.
otros animales de 1-5min
Prolongados:
Deficiencia de los factores de coagulación: medición burda del sistema intrínseco
Por lo general esta normal en el trombocitopenia, pero puede estar ligeramente
prolongado
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
TIEMPO DE PROTOMBINA
PRINCIPIO
El plasma con oxalato se coagula con la adición de calcio en presencia de exceso
de tromboplastina. Se supone que el tiempo necesario para la coagulación del
plasma se relaciona directamente con la velocidad de conversión de la protrombina
a trombina y depende del nivel de protrombina plasmática
INTERPRETACIÓN
Normal
1. Perros 9-14 seg.
2. Bovino 18-28 seg.
3. Caballo 9-12
4. Algunos reactivos comerciales producen tiempos de coagulación
extremadamente cortos con plasma animal
Prolongado
Pruebas del sistema intrínseco
1. Deficiencias de protrombina y factores V, VII y X
Enfermedad hepática
Deficiencia de vitamina k o mala absorción
Después de la ingestión de dicumarol (antagonista de la
vitamina K)
PRINCIPIO
El sistema intrínseco se prueba con caolín, que se usa para activar el factor XII y la
cefalina suplanta el papel de las plaquetas
INTERPRETACIÓN
Promedios normales
1. Perro: por lo general de 17-30 seg. pero puede ser mas cortos con
ciertos reactivos comerciales
Prolongado
1. El método mas confiable para buscar un defecto del sistema intrínseco:
prueba todos los factores excepto el VII y las plaquetas.
Cuando el tiempo de protrombina es normal detecta las deficiencias de
los factores VIII, IX, X y XII
TIEMPO DE TROMBINA
PRINCIPIO
El tiempo de trombina es el que tarda el plasma en formar un coágulo de fibrina en
la adición de trombina. Es una prueba rápida para medir la concentración de
fibrinógeno plasmático y para detectar la presencia de fibrina o productos del
desdoblamiento de esta
MÉTODO
A un tubo de ensayo de 10 x75mm se le agrega 0.2 ml de plasma del
paciente
Se coloca en baño María a 370c
Se le agrega rápidamente 0.1 ml de trombina bovina comercial, al mismo
tiempo que se pone en marcha un cronometro
INTERPRETACIÓN
Valores normales: 15- 20 seg.
Prolongado
1. niveles de fibrinógeno plasmático bajo (menos de 100gm)
2. trastorno de la función del fibrinógeno
3. inhibidores de la formación del coagulo incluido por trombina
Productos del desdoblamiento fibrinolítico
Coagulación intra vascular diseminada
Heparina
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
Objetivo General:
RECOLECCIÓN
TIEMPO DE RECOLECCIÓN
Una muestra de la mañana de mascotas domesticas es la más indicada
No debe recogerse la primera parte de orina de muestra no cateterizada,
porque contiene restos celulares que pueden alterar los resultados.
TIEMPO DE ANÁLISIS
VOLUMEN
1. La cantidad de orina producida al día depende de diversos factores:
Dieta.
Ingestión de líquidos.
Clima.
Ejercicio.
Talla y peso.
2. Por lo general, el volumen se relaciona inversamente con la densidad
específica.
Gran volumen y baja densidad especifica.
Volumen bajo y densidad especifica elevada.
Excepciones:
Diabetes mellitus: volumen y densidad elevados debido
a la glucosuria.
Nefritis severa o terminal: volumen y densidad bajos.
M en C VÍCTOR M. ALONSO MENDOZA
CERTIFICADO POR LA SLAPCV Página 61
3. Aumento del volumen (poliuria).
Poliuria:
En estado patológico la encontramos en:
En insuficiencia renal progresiva crónica
Diabetes mellitus
Insuficiencia renal aguda
Glucosuria renal primaria
Diabetes renal insípida
Hipoplasia cortical renal
Piometra
4. Disminución del volumen: (oliguria)
COLOR
El color es observado en un tubo de ensayo o cilindro urinómetro y este varia en:
INTERPRETACIÓN:
1. Nefritis aguda
2. Disminución de ingestión de líquidos
3. Deshidratación
4. Fiebre
Café obscura
1. Hemoglobina
2. Bilis
3. La orina de caballo normal es de amarillo cuando evacua pero cambia de
color con la oxidación de la pirocatequina
4. Mioglobina
5. Metahemoglobina
6. Melanina
Verde:
1. Azul de metileno: antiséptico urinario
2. Bilis: biliverdina
3. Acriflavina
4. Dizan
Roja a rosa:
1. Fenotiacina
2. Fenolsulfatelina
3. Neoprontosil
TRANSPARENCIA:
Se verifica la transparencia mientras se observa en el tubo de ensayo o un cilindro
urinómetro en:
1. Clara
2. Turbia
Carbonato de calcio
Uratos amorfos (turbidez blanca o rosa)
Fosfatos amorfos( turbidez blanca)
DENSIDAD ESPECÍFICA
La metodología para la determinación de la densidad específica de la orina es
sencilla y los pasos son los siguientes:
se llena el cilindro urinómetro (3/4)
se coloca el urinómetro en la orina y se hace girar evitando que toque los
lados o el fondo del cilindro
se lee la escala del tallo del urinómetro en la interfase del aire y la orina y se
anota en decimales
Especies Rango
Caballo 1.020-1.050
Bovino 1.015-1.045
Oveja y cabra 1.015-1.045
Cerdo 1.010-1.030
Perro 1.015-1.045
Gato 1.010-1.040
En estados patológicos:
1. Deshidratación
2. Fiebre
3. Edema por trastornos circulatorios
4. Choque
5. Diabetes mellitus
1. Papel de nitracina.
Se moja o sumerge varias veces la tira en la orina.
Se compara el color con el cuadro 1 min. después de haberla mojado.
Es Acida en:
1. Normal en animales carnívoros
2. Becerro y potrillos lactantes
3. Dieta con exceso de proteínas
4. Inanición
5. Fiebre
6. Acidosis
7. Actividad muscular prolongada
8. Administración de sales ácidas
Es alcalina:
1. Normalmente en los animales herbívoros
2. Cistitis (dependiendo tipo de bacterias)
3. Retención de orina
4. Terapia alcalina
5. Absorción rápida de los trasudados
PROTEÍNAS
El método mas utilizado para la determinación de proteínas es el de la prueba de
Robert.
Esta prueba se basa en la precipitación de proteínas por un ácido fuerte.
PROCEDIMIENTO:
Interpretación:
Es conveniente interpretar siempre proteinuria junto con la densidad específica.
Interpretación:
La orina normal no debe contener glucosa.
SANGRE
Hemastix
La porción del reactivo de la tira se impregna con una mezcla amortiguadora de
peroxido orgánico y ortotoloudina.
La determinación en la sangre en la orina se lleva a cavo por tiras reactivas.
PROCEDIMIENTO:
Se sumerge el extremo de la tira en la orina bien mezclada, o se pasa
brevemente a través del chorro de orina. Se observa a los 30 seg.
RESULTADOS:
Negativo: no se presenta color azul en el extremo de la tira de prueba a los
30 seg.
Positivo: el extremo de la tira de la prueba se torna azul a los 30 seg. ; las
secciones de color que vienen en la etiqueta del frasco i8ndican las
reacciones obtenidas con pequeñas, moderadas o grandes cantidades de
sangre oculta en heces.
INTERPRETACIÓN:
La distinción entre le hematuria y la hemoglobinuria es de gran importancia
diagnóstica
BILIRRUBINA (BILIS)
PROCEDIMIENTO
Se ponen 5 gotas de orina en un cuadro de una a ruega o círculo especial.
Se pone la tableta del reactivo Icotest en el centro del área humedecida.
Se deja fluir dos gotas de agua sobre la tableta del círculo.
Resultados:
1. Negativo: El círculo no muestra color a los 30 segundos.
2. Positivo: El círculo que esta alrededor de la tableta cambia de color azul o
púrpura; La cantidad de bilirrubina es proporcional a la velocidad e intensidad
de la reacción.
INTERPRETACION:
Siempre debe interpretarse junto con la densidad específica.
El umbral de la bilirrubina en riñón del perro normal es baja.
La bilirrubina debe conjugarse en hígado para pasar por los glomérulos
normales.
La bilirrubina conjugada puede pasar a la orina después de una acumulación
excesiva.
Causas:
Enfermedad hepatocelular:
UROBILINOGENO
Métodos: prueba de Wallace- diamond
Depende de la reacción de l urobirinógeno y de otros cromógenos con el reactivo
benzaldehido de Ehrilich para formar un color rojo.
INTERPRETACION
Urobilinógeno normal:
1. El urobilinógeno es un cromógeno que se forma en el intestino por la acción
reductora de las bacterias sobre la bilirrubina. Una porción se excreta en heces,
pero por otra parte se absorbe hacia la circulación portal y se regresa para ser
eliminada por el hígado a través de la bilis. Parte del urobilinógeno entra en el
riñón durante el tiempo que esta en circulación general y una pequeña cantidad
se excreta por orina.
2. La orina canina y la felina tendrán una producción de color en diluciones hasta
de 1:32, y en ocasiones hasta de 1:64.
INTERPRETACION:
TIPOS DE CELULAS
1. Células epiteliales
Células epiteliales escamosas:
Células de mayor tamaño
Tienen un contorno irregular y se encuentran solas o en hojas
Se derivan de la capa superficial de la uretra y de la vagina
IMPORTANCIA:
4. Cilindros:
Estos elementos son células cilíndricas que aparecen en el sedimento urinario; su
nombre deriva de la forma que representan, un cilindro real de luz tubular
Se forman principalmente en la luz de los túbulos dístales y en los túbulos
colectores de los riñones
Importancia:
En el caballo una gran cantidad de moco homogéneo es normal por que es el único
animal con glándulas secretoras de moco en la pelvis renal y en parte del uréter
cercano al riñón
En otros animales las hebras mucosas pueden indicar irritación de la uretra, aunque
por lo general su presencia se debe a contaminación de la muestra de orina por las
secreciones genitales
Bacterias:
El uso del objetivo de gran potencia, las bacterias se ven como pequeños objetos
que efectúan movimientos verdaderos o movimientos brawnianos.
Importancia:
Escasa, a menos que la orina haya sido recolectada con técnica aséptica por
medio de cateterización o aspiración de la vejiga a través de la pared abdominal
con jeringa o aguja.
Normalmente no se aprecian bacterias en la orina.
Grandes cantidades de bacterias que se observan en infección en aparato urinario.
7. Parásitos
Entre los huevos de parásitos que pueden verse en el sedimento urinario se
encuentran:
Stephanuros dentatus: gusano del riñón del cerdo
Dicttophyma renales: Gusano gigante renal del perro
Dirofilaria immitis: La microfilaria puede apreciarse en orina ( raro)
Capillaria plica: Gusano de la vejiga del gato y perro
Las muestras de orina contaminadas con heces pueden contener una variedad
de huevos de parásitos.
8. Protozoarios
Las tricomonas y la giardia por lo general se encuentran debido a contaminación de
las heces del aparato genital
9. Espermatozoides
Se reconocen fácilmente por su estructura característica
10. Cristales
La presencia de cristales en la orina depende del pH, de la solubilidad y
concentración de los cristaloides y los coloides; rara vez tienen importancia clínica.
RESULTADOS Y CONCLUSIONES
En el reporte de práctica se describirán estos dos puntos siendo aspectos
fundamentales para la calificación de la práctica.
Objetivo:
El alumno comprenderá el procedimiento que se lleva a cabo para realizar las
diferentes pruebas serológicas de ELISA (microaglutinación antígeno anticuerpo)
en modalidad de Snap
Esta Técnica sirve para detectar anticuerpos en contra de Dirofilaria oculta, Erlichia
canis, Anaplasma y enfermedad de Lyme mediante la utilización de sangre entera,
suero o plasma de perro doméstico.
Equipo:
Kit canino diagnóstico para la prueba de antígenos (Gotero, cámara receptora
(dispositivo SNAP), tubo para muestra y reactivo)
Procedimiento:
Equipo:
Kit canino diagnóstico para la prueba de antígenos (Gotero, cámara receptora
(dispositivo SNAP), tubo para muestra y reactivo).
Procedimiento:
Objetivo:
Equipo:
Procedimiento:
1.- Extraer el hisopo del tubo de extracción e impregnarlo (en su punta) de una fina
capa de materia fecal.
2.- Rompa la apoya morada del reservorio de reactivo, doblándola por el cuello,
presione tres veces para hacer pasar la solución azul a través de la punta del
hisopo, mezclándose así la muestra.
3.- Coloque la cámara (dispositivo SNAP) en posición horizontal, retire el hisopo
del tubo de extracción usándolo como pipeta deje caer 5 gotas del líquido en la
ventana de la cámara.
4.- Dejar pasar unos segundos (30-60 seg) para dar tiempo a que se llene
completamente la cámara.
5.- Proceder a hacer presión sobre la cámara hasta que quede horizontal
completamente.
6- Esperar por 8 minutos y proceder a la lectura (según lo indica el manual del
laboratorio Idexx)
3. Veterinary hematology Fifh edition. Feldam Zinkl Jain. Lippincott Williams &
Wilkins. 2000 Small animal clinical diagnosis by laboratory methods Willard,
Tvedten and Turnwald. 3ra edition Saunders 1999
Objetivo específico
El alumno construirá los conocimientos que le permitirán analizar diferentes
muestras citológicas reconociendo las alteraciones presentes y las posibles causas
que ocasionaron su presentación.
Procedimiento:
El procedimiento de muestreo es sencillo, una vez delimitada la zona (linfonodo o
masa) se realiza la asepsia (alcohol o cualquier antiséptico).
Se introduce la aguja (21-25) en la masa a muestrear) se hace la presión negativa
con la jeringa y se hacen cambios de dirección (sin sacar la aguja de la zona a
muestrear).
b) Impresión
Procedimiento:
1. Consiste en presionar la muestra o lesión sobre un portaobjetos
2. Se utiliza en lesiones externas o en tejidos removidos durante cirugía.
3. Después de obtener la impresión, se procede a realizar la tinción.
4. Observación al microscopio.
Desventaja:
Se obtiene una muestra superficial recolectando pocas células, sangre o bacterias
secundarias a la lesión (mayoría de veces oculta diagnóstico).
Utilización de hisopos es de gran utilidad en tractos fistulosos, oído y vagina.
Este examen es uno de los más importantes en relación con el estudio ginecológico
de la perra. El contenido celular de la secreción vaginal se altera en respuesta al
nivel de estrógenos en sangre que causa proliferación del endometrio y flujo
sanguinolento por diapédesis y cornificación de las células espiteliales vaginales.
Material:
Hisopos de algodón.
Portaobjetos.
Tinción de Wright.
Lápiz de diamante.
Algodón.
Alcohol.
Metanol.
Piseta con agua.
Microscopio.
c) Raspado:
Se realiza un raspado del tejido o lesión con una hoja de bisturí
Material colectado es colocado sobre un portaobjetos
Para realizar un frotis por deslizamiento.
Se utiliza en lesiones externas o en tejidos removidos durante cirugía
Ventaja:
Se obtiene una mayor cantidad de células del tejido en comparación a
la impresión.