Relación entre concentración de monóxido de

carbono total en sangre y porcentaje de

saturación de carboxihemoglobina por
espectrofotometría UV - VIS

Integrantes:
Aballay, Candela
D’ Amico, Bianca
Galdame, Francisco
Godoy, Matías
Ledesma, Anna Paula
Quevedo, Lautaro
 INTRODUCCIÓN
● El monóxido de carbono es un gas tóxico producto de combustiones
incompletas, altamente letal por ser incoloro, inodoro e insípido.
● Cuando el monóxido de carbono es inhalado, pasa a la circulación
sanguínea y se une irreversiblemente con la hemoglobina, desplazando al
oxígeno. Este mecanismo genera hipoxia celular¹.
● La espectrofotometría es una técnica que emplea la luz para medir la
concentración de compuestos químicos. La absorción de radiaciones
depende de la estructura de las moléculas y es específica de cada
sustancia.
● Los métodos espectrofotométricos cuantifican el porcentaje de saturación
de carboxihemoglobina². El mismo presenta ciertas limitaciones por
interferencias como coágulos, lípidos y otros derivados de la hemoglobina.

¹ Contenido de oxígeno a nivel celular disminuido.

² COHb%: porcentaje de carboxihemoglobina. V.normal = >10%

OBJETIVOS

● Objetivo general:
1. Establecer la relación entre la concentración de monóxido de carbono total y el
porcentaje de saturación de carboxihemoglobina por espectrofotometría UV/VIS.
● Objetivos específicos:
1. Determinar el porcentaje de saturación de carboxihemoglobina en sangre total por
espectrofotometría UV/VIS.
2. Evaluar la estabilidad de la carboxihemoglobina en muestras de sangre.
 MATERIALES
● Tubos de ensayo.
● Micropipeta.
● Nevera de refrigeración.
● Sustancia reductora para evitar la interferencia de derivados de la
hemoglobina¹ en la determinación de carboxihemoglobina.
● CO, monóxido de carbono.
● Anticoagulantes.
● Espectrofotómetro UV/Vis.

¹. Formas alteradas de la hemoglobina. Por ejemplo: metahemoglobina,

sulfohemoglobina.
 MÉTODOS

● Anticoagulación: agregados a las dichas muestras en los tubos para evitar la

formación de coágulos sanguíneos.
● Saturación de las muestras por burbujeo con monóxido de carbono, hasta
alcanzar concentraciones entre 10% y 20%, entre 21% y 49% y mayores o
iguales que 50%. Así se obtuvieron los las concentraciones conocidas.
● Refrigeración: para su almacenamiento en condiciones de entre 2°C y 8°C,
durante dieciséis días.
● Reducción de los derivados de la hemoglobina: para evitar la interferencia en
la determinación de carboxihemoglobina.
● Análisis del espectro.
RESULTADOS
Al analizar la dispersión de los datos, no se
encuentra una aparente relación entre el
porcentaje de saturación de carboxihemoglobina
y la concentracion de monoxido de carbono total.
Influyen en la concentracion de monoxido de
carbono total (suma de monóxido unido a la
hemoglobina y el monóxido de carbono libre)
distintos factores como la edad, estado físico, si
la persona es fumador, etc.
 DISCUSIÓN
La estabilidad a corto plazo de la carboxihemoglobina por UV/Vis se estudió durante 16 días, con
anticoagulante y se obtuvo un total de 48 valoraciones de concentración. Factores que afectaron la
concentración:
● Rango de concentración ( >10%, 10% a 20%, 21 a 49%, <50%)
● Tipo de anticoagulante
● Interacción entre estos dos.

CONCLUSIÓN
● En los estudios de estabilidad a corto plazo, no hay variación significativa de concentración de
COhb cuando las muestras fueron almacenadas en condiciones de refrigeración y con diferentes
anticoagulantes.
● En las muestras de sangre no se encontró una relación lineal entre monóxido de carbono total y
carboxihemoglobina.
● El monóxido de carbono unido a la hemoglobina posee una relación lineal con el porcentaje de
saturación de carboxihemoglobina. Mientras que las concentraciones de monóxido de carbono
libre en el organismo dependen de condiciones de variabilidad biológicas, hecho que lo convierte
probablemente en el culpable de la falta de correlación entre la concentración de monóxido de
carbono total y el porcentaje de saturación de carboxihemoglobina