Universidad de San Carlos de Guatemala

Facultad de Ciencias Químicas y Farmacia

Escuela de Química Biológica
Depto. de Bioquímica
QF y Biología 2023
Yessica Amarilis Orellana Gómez QF 201701238
sección B

Práctica No. 6
AISLAMIENTO Y PROPIEDADES QUÍMICAS DE LA HEMOGLOBINA

Cuestionario
1. ¿Cómo funciona un oxímetro de pulso para determinar el nivel de saturación de oxígeno en
la sangre?
Emitiendo rayos de luz que pasan a través de la sangre, la cantidad de oxígeno
en la sangre se determina dependiendo la cantidad de oxihemoglobina o
desoxihemoglobina presente (Bencomo et al, 2016).

2. Investigue una metodología para el aislamiento de hemoglobina a partir de una muestra de

sangre y describa brevemente el procedimiento que se realiza.

Figura 1. Aislamiento de hemoglobina a partir de glóbulos rojos

Fuente: Camacho, 2012.

3. ¿Qué es carbaminohemoglobina? ¿Cómo se forma y cuál es su relevancia biológica?

El termino se refiere a los aminoácidos de la molécula hemoglobina que se han
asociado al dióxido de carbono. Es una de las formas fisiológicas en las que el dióxido
de carbono viaja por la sangre para su eliminación (Pacheco, 2004).
4. En la cinética de formación de metahemoglobina, ¿por qué es importante leer a
cada medio minuto? ¿Qué comportamiento espera observar en las absorbancias?
Porque la formación de metahemoglobina depende de la cantidad de nitrito y eso
depende de la cantidad de tiempo para poder observar la formación de moléculas.
(Koolman, 2005).

5. Investigue el método de formación de cianometahemoglobina y la toxicidad de los

reactivos que se emplean.
Se realiza mediante la extracción de un amuestra sanguínea con anticoagulante
beta, mediante sistema venoset. Para la reparación del reactivo, se realiza mediante
la mezcla de 5 ml del reactivo de Drafking en 250 ml de agua destilada. Dicha mezcla
se debe conservar en frascos de ámbar a una temperatura de 25°C. S tiene un
blanco, una muestra y un estándar, se deben colocar alrededor de 2.5 ml del
reactivo de Drafking en cada tubo de ensayo. Al tubo de muestra se le agregan 1 ml,
la cual debe estar homogenizada. Para el estándar se coloca 1 ml en el tubo que
corresponde la estándar. Se debe sellar el tubo de la muestra y reposar por 10
minutos. Se debe realizar la lectura en el espectrofotómetro a 540 nm, realizando la
medición con el blanco, como primera medición, como segunda medición se realiza
la medición del estándar, siendo la tercera lectura la de la muestra. Al respecto de
los reactivos se debe tener mucho cuidado ya que se utilizan elementos nocivos para
la salud como lo es el reactivo de Drafking, el cual contiene cianuro, el cual puede
ocasionar envenenamiento o la muerte del practicante del procedimiento. (Stewart,
2005) (Rodwel, Bender, Bhotham, Kennely, Weil, 2018).

6. ¿Cómo se forma la carboxihemoglobina y por qué es clínicamente relevante?

La carboxihemoglobina es una proteína resultante de la unión de la hemoglobina con el
monóxido de carbono, esta medida es relevante para el diagnóstico de diversas
enfermedades (Suzaño, 2014).

7. Investigue qué es la hemoglobina glicosilada (HbA1c) y su importancia clínica.

Es un examen sanguíneo que se realiza para determinar el estado de diabetes, se
refiere a la glucosa que se puede añadir o unir al grupo hemo, y hace relación entre
el nivel de glucosa en la sangre, lo cual se debe a la vida media de los glóbulos rojos
que tienen una vida media de alrededor de 120 días, de 8 a 12 semanas, como rango
medio de la vida de dichas células, la cual se ve afectada por la anemia, donaciones
de sangre o perdida de las mismas. (Rodwel, Bender, Bhotham, Kennely, Weil,
2018).
Referencias
Bencomo S., Villanza S. & Salas B. (2016). Diseño y construcción de oxímetro de pulso.
Universidad de Carabobo
Camacho J. (2012). Elaboración de soportes de colágeno tipo I asociados a hemoglobina
aislada de sangre periférica humana. Universidad Nacional de Colombia.
https://repositorio.unal.edu.co/handle/unal/20305
Koolman, J. (2005). Bioquímica médica. México: Medicina Panamericana.
Pacheco, D. (2004). Bioquímica Medica. Limusa.
Rodwel, V., Bender, D., Bhotham, K., Kennely, P. y Weil, P. (2018) Harper. Bioquímica
ilustrada. 31˚ Ed. México: McGraw- Hill.
Stewart, L. (2005). Toxicology. Mecanism and analytical methods. Estados Unidos: Acobia
Poss.
Suzaño P. (2014). Estandarización de métodos espectrofotométricos para la
determinación de malondialdehido y carboxihemoglobina en estrés oxidativo.
Universidad Mayor San Andrés.
https://repositorio.umsa.bo/handle/123456789/5687
Diagrama de flujo.

Diagrama no.1 - Preparación de solución concentrada de Oxihemoglobina

Diagrama no.2 – Preparación de los derivados de hemoglobina
Diagrama no.3 - Espectro de Metahemoglobina concentrada
Diagrama no.4 - Cinética de la formación de Metahemoglobina