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UNIVERSIDAD ABIERTA Y A

DISTANCIA DE MÉXICO
“INGENIERÍA EN BIOTECNOLOGÍA”

Actividad
Entregable:
Unidad 2
Técnicas de Laboratorio de
Biología
Sustancias Puras y Reactivos

En el ámbito de la medicina veterinaria, la detección temprana de enfermedades es crucial


para la salud y el bienestar de los animales. Una técnica comúnmente empleada en el
diagnóstico de diversas enfermedades, incluyendo la brucelosis canina, es la aglutinación
rápida en placa. Este ensayo explorará en detalle esta técnica, su aplicación en la
investigación de la seroprevalencia de Brucella canis en poblaciones caninas, así como las
soluciones utilizadas en su implementación.

Como estudiantes de Ingeniería en Biotecnología en la Universidad Abierta y a Distancia de


México (UnADM), es crucial comprender y dominar una variedad de técnicas de laboratorio,
así como la preparación de soluciones, ya que éstas son fundamentales para el éxito en el
campo de la biotecnología.

Parte I. Problemas sobre soluciones

a) El vinagre es una disolución de ácido acético en agua. Si determinado vinagre tiene


una concentración del 4.5% en volumen. ¿Cuánto ácido acético hay en 0.75L de ese
vinagre?

El porcentaje en volumen (%V/V) se define como la cantidad de volumen del soluto presente
en una cantidad determinada de solución. La fórmula para calcular el porcentaje en volumen
es:

v Volumen!"#$%"
% = × 100
v Volumen!"#$&'ó)
Datos:

Volumen!"#$%" = ¿?
Volumen!"#$&'ó) = 0.75 L
*
[Concentración Ácido acético]= 4.5 % *

Dado que el vinagre tiene una concentración del 4.5% en volumen, significa que en 100 ml de
vinagre, 4.5 ml son de ácido acético.

Para encontrar cuánto ácido acético hay en 0.75 L de vinagre, primero debemos determinar
cuántos mililitros representan el 4.5% de 0.75 L:

4.5 mL
VolumenÁ&. .&é%'&". = 0.75 L × = 0.03375 L
100 mL

1000 mL
VolumenÁ&. .&é%'&". = 0.03375 𝐿 = 33.75 𝑚𝐿
1L

Entonces, en 0.75 L de vinagre, hay 33.75 mL de ácido acético.


b) Calcula la molaridad de 855 ml de una disolución acuosa que contiene 45g de NaOH
(Hidróxido de sodio).

La molaridad (M) es una medida de la concentración de una solución, definida como el número
de moles de soluto presentes en un litro de disolución. La fórmula para calcular la molaridad
es:

Moles !"#$%"
M =
Volumen!"#$&'ó)

Para calcular la molaridad, primero necesitamos determinar los moles de NaOH utilizando su
masa molar. La masa molar del NaOH es la suma de las masas atómicas de los átomos que
lo componen:
g
Na = 22.99
mol
g
O = 16
mol
g
H = 1.0
mol
𝑔
PM0123 = 40
𝑚𝑜𝑙

Ahora, calculamos los moles de NaOH utilizando la fórmula:

Masa 0123 (g)


Moles de NaOH =
Masa molar0123 (g/mol)
Datos:

Masa de NaOH = 45 g
𝑔
PM0123 = 40
𝑚𝑜𝑙

45(g)
Moles de NaOH = 𝑔 = 𝟏. 𝟏𝟐𝟓 𝒎𝒐𝒍𝒆𝒔
40 𝑚𝑜𝑙

Dado que tenemos 855 ml de disolución, convertimos esto a litros.

1L
855 m𝐿 = 0.855 𝐿
1000 mL

Sustituyendo en la fórmula original;

1.125 mol NaOH


M = = 1.316 mol/L
0.855 L

La molaridad de la disolución es de 1.316 M.


Solución/ Función de la Solución/Reactivo Imagen
Reactivo
La solución salina se utiliza para diluir muestras
biológicas y reactivos durante la prueba de
aglutinación rápida en placa. Ayuda a mantener
la integridad de las células y permite una mejor
interacción entre los anticuerpos y los antígenos
Solución presentes en la muestra.
Salina (SS):

Figura 1 “Solución Salina”


(KUBUS, 2024).

El lavado con buffer, típicamente fosfato salino


balanceado (PBS), se utiliza para eliminar los
residuos de suero o sangre de las muestras
durante el proceso de lavado en la prueba de
aglutinación rápida en placa. Esto ayuda a
Lavado con reducir la interferencia y a mejorar la precisión de
Buffer (PBS) la prueba al eliminar posibles contaminantes.

PBS es una solución isotónica y no tóxica para Figura 2 “ Solución PBS 1X”
células. 1X PBS la concentración final es; 8.0 g/L (Delta Microscopies, 2024).
NaCl, 0.2 g/L KCl, 1.42 g/L Na2HPO4, 0.24 g/L
KH2PO4 y pH 7.4. (Delta Microscopies, 2024).
El conjugado anticuerpo-antígeno es una
solución que contiene anticuerpos marcados con
una sustancia detectable, como enzimas o
Conjugado colorantes fluorescentes. Esta solución se utiliza
Anticuerpo- para detectar la presencia de antígenos
Antígeno específicos en la muestra, formando complejos
antígeno-anticuerpo visibles o detectables.
Figura 3 “ Kit Anticuerpos”
(EllieLab, 2024).

El cálculo de porcentaje en volumen es una habilidad esencial en el laboratorio de


biotecnología, ya que permite la preparación precisa de soluciones con concentraciones
específicas. En muchas ocasiones, es necesario preparar soluciones con concentraciones
conocidas de reactivos, como en el cultivo celular, la extracción de ADN, o la producción de
compuestos bioactivos.

Por ejemplo, al preparar medios de cultivo para células, es crucial garantizar que los nutrientes
esenciales estén presentes en las concentraciones adecuadas para promover el crecimiento
celular óptimo. El cálculo de porcentaje en volumen nos permite determinar la cantidad exacta
de cada componente que se debe agregar para alcanzar la concentración deseada en el
medio de cultivo.
Análisis de Molaridad: Importancia en la Caracterización de Sustancias

La molaridad es una medida fundamental en el laboratorio de biotecnología, ya que


proporciona información sobre la concentración de soluciones y la cantidad de sustancia
presente en un volumen determinado de disolución. Este análisis es crucial en la
caracterización de sustancias, como en la cuantificación de proteínas, la determinación de la
actividad enzimática, o la evaluación de la pureza de compuestos químicos.

Según Willey & Woolverton (2013); en la producción de proteínas recombinantes, es


necesario determinar la concentración de la proteína producida para garantizar la eficacia del
proceso de expresión génica. El análisis de molaridad nos permite calcular la cantidad de
proteína presente en una muestra y evaluar la eficiencia de la producción.

Para Albert et al. (2014). Aunque estas técnicas son fundamentales en el laboratorio de
biotecnología, también presentan desafíos específicos. El cálculo de porcentaje en volumen
requiere atención meticulosa a las unidades y conversiones de volumen, mientras que el
análisis de molaridad puede verse afectado por factores como la precisión de las mediciones
y la pureza de los reactivos.

Además, con el avance de la tecnología y las nuevas tendencias en biotecnología, es


importante estar al tanto de las últimas metodologías y herramientas disponibles para mejorar
la precisión y eficiencia de estas técnicas en el laboratorio.

Conclusión

Como estudiantes de Ingeniería en Biotecnología en la UnADM, es fundamental desarrollar


habilidades sólidas en técnicas de laboratorio como el cálculo de porcentaje en volumen y el
análisis de molaridad. Estas habilidades no solo son relevantes para la realización exitosa de
experimentos en el laboratorio, sino que también son fundamentales para avanzar en nuestra
comprensión y aplicación de la biotecnología en diversos campos, desde la salud hasta la
agricultura y la industria.

Dominar estas técnicas nos equipa con las herramientas necesarias para abordar los desafíos
y oportunidades en la biotecnología y contribuir al avance de la ciencia y la innovación en el
mundo actual.
REFERENCIAS

Alberts, B., Johnson, A., Lewis, J., Raff, M., Roberts, K., & Walter, P. (2014). Molecular
Biology of the Cell (6th ed.). Garland Science.

Brown, T. A. (2016). Genomes (4th ed.). Oxford University Press.

Nielsen, J., & Keasling, J. D. (2016). Engineering cellular metabolism. Cell, 164(6),
1185-1197. doi:10.1016/j.cell.2016.02.004

Sambrook, J., Fritsch, E. F., & Maniatis, T. (1989). Molecular Cloning: A Laboratory
Manual (2nd ed.). Cold Spring Harbor Laboratory Press.

Voet, D., Voet, J. G., & Pratt, C. W. (2016). Fundamentals of Biochemistry: Life at the
Molecular Level (5th ed.). Wiley.

Willey, J. M., Sherwood, L., & Woolverton, C. J. (2013). Prescott's Microbiology (9th
ed.). McGraw-Hill Education.

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