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NICOLÁS DE HIDALGO
LABORATORIO DE FARMACIA II
PRÁCTICA No. 10
PROFESOR TITULAR:
PROFESOR DE LABORATORIO:
SECCIÓN: 07 SEMESTRE: 7
EQUIPO:08
MORELIA, MICHOACÁN
Cálculos y resultados.
Al inicio de la práctica se nos entregaron 3 ratones macho 0para realizar el método de marcaje, en este
caso el de manchado.
Tabla 10.2.- Clave, peso y dosis de pentobarbital en miligramos para cada ratón.
• Ratón ECV.
-Peso: 29.122g
-75mg de pentobarbital sódico por cada kilogramo (1000g) de peso corporal.
(29.122𝑔)(75𝑚𝑔) 2184.15𝑔. 𝑚𝑔
= = 2.18415𝑚𝑔
1000𝑔 1000𝑔
• Ratón BCV.
-Peso: 22.871g
-4.2mg de pentobarbital sódico por cada kilogramo (1000g) de peso corporal.
(22.871𝑔)(4.2𝑚𝑔) 96.0582𝑔. 𝑚𝑔
= = 0.0960582𝑚𝑔
1000𝑔 1000𝑔
• Ratón LOV.
-Peso: 25.836g
-17.8mg de pentobarbital sódico por cada kilogramo (1000g) de peso corporal.
(25.836𝑔)(17.8𝑚𝑔) 459.8808𝑔. 𝑚𝑔
= = 0.4598808𝑚𝑔
1000𝑔 1000𝑔
Tabla 10.3.- Clave, peso y dosis de pentobarbital en solución para cada ratón.
Clave Peso (g) Dosis (ml)
ECV 29.122 0.29122
BCV 22.871 0.22871
LOV 25.836 0.25836
• Ratón ECV.
-2.18415mg
-7.5 mg de pentobarbital sódico por cada mililitro en solución.
(2.18415𝑚𝑔)(1𝑚𝑙) 2.18415𝑚𝑔. 𝑚𝑙
= = 0.29122𝑚𝑙
7.5𝑚𝑔 7.5𝑚𝑔
• Ratón BCV.
-0.0960582mg
-0.42 mg de pentobarbital sódico por cada mililitro en solución.
(0.0960582𝑚𝑔)(1𝑚𝑙) 0.0960582𝑚𝑔. 𝑚𝑙
= = 0.22871𝑚𝑙
0.42𝑚𝑔 0.42𝑚𝑔
• Ratón LOV.
-0.4598808mg
-1.78 mg de pentobarbital sódico por cada mililitro en solución.
(0.4598808𝑚𝑔)(1𝑚𝑙) 0.4598808𝑚𝑔. 𝑚𝑙
= = 0.25836𝑚𝑙
1.78𝑚𝑔 1.78𝑚𝑔
Tabla 10.4.- Clave, peso y dosis de pentobarbital de los ratones administrados por el equipo 8.
• Ratón ECV.
-0.29122ml
-1 mililitro de pentobarbital sódico corresponde a 100 unidades.
(0.29122𝑚𝑙)(100𝑈) 29.122𝑚𝑙. 𝑈
= = 29.122𝑈 = 29𝑈
1𝑚𝑙 1𝑚𝑙
• Ratón BCV.
-0.22871ml
-1 mililitro de pentobarbital sódico corresponde a 100 unidades.
(0.22871𝑚𝑙)(100𝑈) 22.871𝑚𝑙. 𝑈
= = 22.871𝑈 = 23𝑈
1𝑚𝑙 1𝑚𝑙
• Ratón LOV.
-0.25836ml
-1 mililitro de pentobarbital sódico corresponde a 100 unidades.
(0.25836𝑚𝑙)(100𝑈) 25.836𝑚𝑙. 𝑈
= = 25.836𝑈 = 26𝑈
1𝑚𝑙 1𝑚𝑙
Tabla 10.5.- Efectos del pentobarbital en los ratones administrados por el equipo 8.
Pentobarbital Respuesta
Dosis Solución administrada
Sedación Hipnosis Muerte
(mg/kg) (mg/ml)
4.2 0.42 - - -
17.8 1.78 - - -
75 7.5 + + -
Formula.
𝑛
∗ 100 = %
𝑛𝑡
Donde.
𝑛: número de individuos
Sustitución de la formula.
2 0 9
∗ 100 = 20% ∗ 100 = 0% ∗ 100 = 90%
10 10 10
1 10
∗ 100 = 10% ∗ 100 = 100%
10 10
Al corregir los porcentajes solo se corrigieron los de 0% y 100%, debido a que la grafica a utilizar era
logarítmica.
Donde.
𝑛: número de individuos
Grafica 10.1.- Dosis administradas versus el porcentaje (%) de respuesta de los ratones macho
(sedación, hipnosis y muerte).
𝐷𝐸50 𝑆 = 10𝑚𝑔/𝑘𝑔 𝐷𝐸50 𝐻 = 44𝑚𝑔/𝑘𝑔 𝐷𝐿50 = 186𝑚𝑔/𝑘
Formula.
𝐷𝐿50
𝑀𝑆 =
𝐷𝐸50
Sustitución de la formula.
Grafica 10.2.- Sigmoides de dosis administradas versus el porcentaje (%) de respuesta de los ratones
macho (sedación, hipnosis y muerte).
𝐷𝐸50 𝑆 = 7.5𝑚𝑔/𝑘𝑔 𝐷𝐸50 𝐻 = 34𝑚𝑔/𝑘𝑔 𝐷𝐿50 = 145mg/kg
Formula.
𝐷𝐿50
𝑀𝑆 =
𝐷𝐸50
Pentobarbital Respuesta
Dosis Solución administrada
Sedación Hipnosis Muerte
(mg/kg) (mg/ml)
4.2 0.42
--+-+----- ---------- ----------
4.158UP 3.0325UP 3.0325UP
17.8 1.78
+++++++-++ -------+-- ----------
6.282UP 3.718UP 3.0325UP
75 7.5
++++++++++ ++++++++++ --------+-
6.960UP 6.960UP 3.718UP
315 31.5
++++++++++ ++++++++++ ++++++++++
6.960UP 6.960UP 6.960UP
• 20% = 4.158𝑈𝑃
• 90% = 6.282𝑈𝑃
• 97.5% = 6.90𝑈𝑃
• 10% = 3.718𝑈𝑃
• 2.5%
2%=2.946
3%=3.119
0.173
∆= 3.119 − 2.946 = 0.173 = 0.0173 (0.0173)(5) = 0.0865
10
2.946 + 0.0865 = 3.0325
Grafica 10.3.- Sigmoides de dosis administradas versus unidades de probabilidad estadística (Probitas)
de respuesta de los ratones macho (sedación, hipnosis y muerte).
𝐷𝐸50 𝑆 = 7.5𝑚𝑔/𝑘𝑔 𝐷𝐸50 𝐻 = 33𝑚𝑔/𝑘𝑔 𝐷𝐿50 = 135𝑚𝑔/𝑘𝑔
Formula.
𝐷𝐿50
𝑀𝑆 =
𝐷𝐸50
Discusión de resultados.
El ratón sigue siendo el animal más difícil para el logro de una verdadera sedación o hipnosis sin que se
produzca la muerte. Además de las sobredosis, quizás las causas más comunes de los fallos sean una
excesiva pérdida de calor y la hipotermia. La administración por la vía intraperitoneal con pentobarbital
sódico es la de uso más frecuente, aunque las grandes variaciones entre los diferentes ratones y cepas
hacen que sea mucho más arriesgado que la ruta intravenosa. Los ratones macho son menos susceptibles
a los barbitúricos que las hembras y existen también variaciones con respecto a la raza del ratón (Clifford,
1978).
Según Aparicio (2013), la dosis efectiva media (DE50) es la dosis necesaria de una sustancia necesaria para
producir un efecto específico en la mitad de la población (50%). Durante esta práctica se analizaron los
efectos de sedación e hipnosis. De acuerdo con De la Rosa et. al. (2022) la sedación es un estado de calma
y reducción de la excitación, y puede manifestarse en ratones de diversas maneras, como la disminución
de la actividad locomotora, la reducción de la respuesta a estímulos externos, y la relajación muscular, la
dosis de pentobarbital necesaria para alcanzar este efecto es de 4.8 miligramos por cada kilogramo
(Hernández y Vergara, 2019), en nuestro caso se obtuvo que la dosis efectiva media fue de 7.5 miligramos
por cada kilogramo, valor que es bastante cercano al establecido por Hernández y Vergara. La hipnosis
es definida por De la Rosa et. al (2022) como la perdida del reflejo de enderezamiento en animales de
laboratorio, Ramírez (1990) expresa que para alcanzar este efecto se debe de administrar una dosis de
pentobarbital de entre 40 y 60 miligramos por cada kilogramo de peso del ratón, la dosis efectiva media
obtenida fue de 33 miligramos por cada kilogramo, valor que se encuentra ligeramente fuera del rango
establecido.
Aparicio (2013), define la dosis letal media (DL50), como la dosis de una sustancia necesaria para producir
la muerte al 50% de la población. Al usar pentobarbital en ratones, la dosis para alcanzar esta respuesta
debe ser de 100-150 miligramos por cada kilogramo (Ramírez, 1990). La dosis letal media de pentobarbital
en ratones que se obtuvo fue de 135 miligramos por cada kilogramo, esta dosis se encuentra dentro del
rango establecido por Ramírez (1990).
Conclusión.
Bibliografía.
1. Aparicio, L. E. (2013). Evaluación de la inducción del efecto anestésico en rata de laboratorio
cepa Wistar vía Intraperitoneal. UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD
DE ESTUDIOS SUPERIORES ZARAGOZA. https://www.zaragoza.unam.mx/wp-
content/Portal2015/Licenciaturas/qfb/tesis/tesis_aparicio_lozano.pdf
2. Clifford, D. H. (1978). Preanesthesia, Anesthesia, Analgesia y Euthanasia. In: Fox, J. G.; Cohen, BJ.
and Loew, F.M. (eds.). Laboratory Animal Medicine. New York, Academic Press, INC. pp. 536-548
3. Cantú, P. A. (2017). Margenes de seguridad en fármacos. Lifeder.
https://www.lifeder.com/margenes-de-seguridad-en-farmacos/
4. De la Rosa, M. P., Hernandez, B. L., Merino, V. J., Molina, N. L. y Torres, S. D. (2022).
Determinación experimental de la dosis efectiva 50 (de50) sedante en ratones. Universidad
nacional autónoma de México. https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-
nacional-autonoma-de-mexico/farmacologia-ii/prectica-no6-determinacion-experimental-de-la-
dosis-efectiva-50-de50-sedante-en-ratones/685516
5. Hernández, E. J. y Vergara, F. E. (2019). Determinación experimental de la dosis efectiva 50
(DE50) sedante en ratones. Studocu. https://www.studocu.com/es-mx/document/benemerita-
universidad-autonoma-de-puebla/farmacologia/138013918-de50-sedante-en-
ratones/11676520
6. Ramirez, A. (1990). Anestesia en el animal de laboratorio. Centro de investigación hospitalaria
general de Valencia. https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-nacional-
autonoma-de-mexico/farmacologia-general/roedores-hipnosis-anestesia-rata-raton/18320594
https://nucleus.usal.es/sites/default/files/servicios/sea/formularios/EutanasiaPNSEA4.pdf